中华人民共和国国家标准
GB/T 16285-2008代替GB/T162851996
Determination of glucose in foodEnzyme-colorimetric method and enzyme-electrode method
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准与GB/T16285-1996相比主要变化如下:
标准名称改为:食品中葡萄糖的测定酶-比色法和酶-电极法;
按GB/T1.1-2000和GB/T20001.4-2001的规定修改了文本格式.
本标准的酶-比色法为仲裁法:酶-电极法为快速法.
本标准的附录A、附录B为规范性附录.
本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口.
本标准起草单位:中国农垦北方食品监测中心(酶-比色法)、山东省科学院生物研究所(酶-电极法).
本标准主要起草人:张宗城、刘宁、冯德荣、孙士青、宋家华.
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
-GB/T 162851996
酶-比色法和酶-电极法 食品中葡萄糖的测定
1范围
本标准规定了酶-比色法和酶-电极法测定食品中葡萄糖的分析步骤.本标准适用于各类食品中葡萄糖的测定:亦适用于食品中其他组分转化为葡萄糖的测定. 本标准的酶-比色法的最低检出限量为0.01μg/mL:酵-电极法的最低检出限量为1.0mg/100mL
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款,凡是注日期的引用文件,其随后的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然面,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准.
GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法(GB/T6682-1992,neqISO3696:1987)
3酶-比色法
3.1方法提要
葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下,催化3-D-葡萄糖(葡萄糖水溶液)的氧化反应,生成D-葡萄糖酸--内酯和过氧化氢.受过氧化物酶(POD)催化,过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色醒亚胺.在波长505nm处测定醋亚胺的吸光度,计算食品中葡萄糖的含量.
3.2反应式
CHOO;→C;HOHO GODH;O; C;H;OHC HN O*C;H NOH O POD
3.3试剂和溶液
3.3.1试剂和分析用水
试剂均使用分析纯试剂,或生化试剂;分析用水应符合GB/T6682规定的二级水规格,或重蒸馏水.
3.3.2组合试剂盒
2号瓶:内含苯酚溶液(0.022mol/L)100mL.
3号瓶:内含葡萄糖氧化酵(glucose oxidase)400U(活力单位)、过氧化物酶(辣根,peroxidase)1000U(活力单位).
葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的活力要求和判定见附录A.
1、2、3号瓶应在约4C保存.
3.3.3酶试剂溶液
将1号瓶(3.3.2)和2号瓶(3.3.2)的内容物充分混合均匀,再将3号瓶(3.3.2)的内容物溶解其中,轻轻摇动(勿剧烈摇动),使葡萄糖氧化酶和过氧化物酶完全溶解,此溶液应在约4C保存,有效期1个月.
3.3.4亚铁氰化钾溶渡(0.085mol/L)
称取3.7g亚铁氰化钾,溶于100mL水中,摇匀.