中华人民共和国国家标准
GB/T17778-2025代替GB/T 177782005
预混合饲料中D-生物素的测定
Determination of D-biotin in feed additive premix
国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：
a）更改了适用范围，增加了检出限和定量限（见第1章，2005年版的第1章）；b）高效液相色谱法中增加了标准溶液保存有效期和标准曲线（见4.2.6、4.2.7、4.2.8）；c）高效液相色谱法中更改了原理、标准储备液浓度、定容体积和计算公式（见4.1、4.2.6、4.5.1、d）分光光度法中增加了标准溶液保存有效期（见5.2.5、5.2.6）： 4.6 2005年版的 4.1、4.2.3.1 4.5.1、4.6) ;e）分光光度法中更改了溶剂、提取条件、反应体系和测定波长（见5.2、5.5.1、5.5.2，2005年版的3.2、3.5.1、3.5.2)
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口.
本文件起草单位：广州汇标检测技术中心、浙江新和成股份有限公司.
本文件主要起草人：郝燕娟、罗群、杨金枢、王智民、施东明、龙志曦、杨雨澄、罗梓峰、沈达荣、陈晓强、潘浣钰、章益明、权化丽、隋艳梅.
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：
1999年首次发布为GB/T17778-1999，2005年第一次修订；
本次为第二次修订.
预混合饲料中D-生物素的测定
1范围
本文件描述了维生素预混合饲料、复合预混合饲料中D-生物素的高效液相色谱和分光光度测定方法.
本文件适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料中D-生物素的测定.
本文件高效液相色谱法的检出限为1mg/kg，定量限为3mg/kg：分光光度法的检出限为1.5mg/kg，定量限为5mg/kg-
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4高效液相色谱法
4.1原理
试样中的D生物素用水提取，高效液相色谱仅测定，外标法定量.
4.2试剂或材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂.
4.2.1水：GB/T6682，级. 4.2.2乙晴：色谱纯.4.2.3二乙烯三胺五乙酸（DTPA）.4.2.45mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠，加人适量水溶解，冷却至室温，定容至100mL.4.2.50.05%三氟乙酸溶液：量取0.5mL三氟乙酸，用水定容至1000mL，用氢氧化钠溶液（4.2.4）调 节pH 至2.5.4.2.6标准储备溶液（0.2mg/ml)：称取D-生物素（CAS号：58-85-5，纯度不低于98%）标准品10mg（精确至0.01mg）于50mL容量瓶中，加水、超声溶解，用水定容，混匀.于2C~8℃保存，有效期3个月.中，用水稀释至刻度.于2℃~8℃保存，有效期2个月.
