中华人民共和国国家标准
GB/T 20763-2006
猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、 氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、 甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、 咔唑心安残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
Method for determination of acetopromaizine chlorpromazin haloperidol.propionylpromazine xylazine azaperone azaperol and carazolol residuesin porcine kidney and muscle tissues-LC-MS-MSmethod
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A和附录B为资料性附录.本标准由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出. 本标准由中华人民共和国质量监督检验检疫总局归口.本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局.本标准主要起草人：庞国芳、宋文斌、董振霖、李一尘、李军、赵守成、贾新.
本标准系首次发布的国家标准.
猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、 氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、 甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、 咔唑心安残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙听噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆及其代谢物阿扎哌醇和p-阻断剂咔唑心安残留量的液相色谱-申联质谱测定方法.
本标准适用于猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙盼噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安残留量的测定.
本标准的方法检出限：猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、丙酰二甲氨基丙盼噻嗪、味唑心安均为0.5μg/kg，甲苯噻嗪为0.25μg/kg，阿扎哌隆为0.2 μg/kg，阿扎哌醇为0.15μg/kg，氟啶醇为0. 1 μg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
(GB/T 6379. 12004 ISO 5725-1;1994 IDT) GB/T6379.1测定方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义
GB/T6379.2测定方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法（GB/T6379.2-2004，ISO5725-2：1994，IDT）
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-1992 negISO3696:1987)
试样中残留的六种镇定剂及其代谢产物在碱性条件下用特丁基甲醚提取，并通过向提取液中加人磷酸盐缓冲液（pH=3），使镇定剂被提取到缓冲溶液中，并用特丁基甲醚净化缓冲溶液，改变缓冲溶液为碱性，将镇定剂反提取到特丁基甲醚中，浓缩，定容.供液相色谱-申联质谱仪测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
4.1乙睛：色语纯.4.2甲醇：色谱纯.4.3无水乙醇：色谱纯.4.4盐酸：优级纯.
4.5特丁基甲醚.4.6氢氧化钠.4.7氢氧化钠溶液：5mol/L.称取50.0g氢氧化钠（4.6）用水溶解，定容到250ml.4.8磷酸二氢钾.4.9磷酸二氢钾溶液：1mol/L，pH=3，称取68.045g磷酸二氢钾（4.8）用水溶解，用盐酸（4.4）将溶4.10甲酸铵. 液的pH值调至3.0，定容到500mL.4.11甲酸：色谱纯.4.12甲酸铵缓冲液；0.1mol/L pH=4，称取6.306g甲酸铵（4.10）用水溶解，用甲酸（4.11）将pH值调到4.0，定容至1000ml.4.14流动相A：0.01mol/L甲酸铵缓冲液，pH=4（4.13），通过0.2μm过滤器过滤.4.15流动相B：乙（4.1）通过0.2pm过滤器过滤.4.16流动相C：甲醇（4.2）通过0.2μm过滤器过滤.4.17混合流动相：将70mL流动相A，15mL流动相B以及15mL流动相C混合. 4.18六种镇定剂及其代谢物和p-阻断剂标准物质.4.18.1乙酰丙嗪，纯度≥99%，4.18.2阿扎账隆，纯度：99%4.18.3咔唑心安，纯度：99%.4.18.4氯丙嗪盐酸，纯度：99%.4.18.5氟骤啶醇，纯度≥99%.4.18.6丙酰二甲氨基丙盼噻嗪盐酸，纯度：98%.4.18.7甲苯噻嗪盐酸，纯度：99%.4.18.8阿扎哌醇，浓度 10.0pg/mL（甲醇）.4.19六种镇定剂及其代谢物和β-阻断剂标准储备溶液 4.19.1乙酰丙嗪、阿扎哌隆、咔唑心安、氯丙嗪、氯哌啶醇、丙酰二甲氨基丙盼噻嗪、甲苯噻嗪标准储备溶液：0.10mg/mL.称取适量的上述标准物质（4.18.1~4.18.7），分别用无水乙醇（4.3）.配成0.10mg/mL的标准储备液.储备液避光在2C～4C条件下贮存.每年配制一次.4.19.2阿扎醇标准储备溶液：1.0μg/mL.准确移取1.0mL阿扎哌醇标准液（4.18.8）于10mL容量瓶中，用无水乙醇（4.3）定容至刻度，混匀，配成1.0μg/mL的标准储备液.储备液避光在2C~4C条件下贮存，每年配制一次.4.20六种镇定剂及其代谢物和p阻断剂混合标准储备溶液吸取适量的标准储备溶液（4.19.1和4.19.2），用乙晴配制成混合标准储备溶液.在2C~4C条4.21六种镇定剂及其代谢物和B-阻断剂混合标准工作溶液 件下贮存.根据每种镇定剂及其代谢物的灵敏度和仪器线性范围用空白样品提取液配成不同浓度（ng/mL）的混合标准工作溶液.在2C~4C条件下避光贮存.注：称取标准物的质量是按纯度和含盐量修正过的质量.
5仪器
5.1液相色诺-串联四极杆质谱仪：配有电喷雾的离子源.5.2电子天平：感量0.1mg和0.1g. 5.3离心机：最大转速为10000r/min.5.4离心管：锥形底玻璃离心管，15mL和10mL具塞；锥形底聚丙烯离心管，50mL.具螺旋盖.5.5过滤器：聚四氟乙烯膜过滤器：0.2um×13mm：尼龙膜过滤器：0.2pm×47mm.5.6液体分配器：1 mL~10mL和 5mL~50mL.000~000~o喜5.8流动相过滤装置.5.9氮气浓缩仪. 5.10高速涡流混合器.5.11振荡器.5.12食物调理机.5.13一次性移液管.5.14酸度计：测量精度为士0.02unit.5.15超声波仪，5.16一次性注射器：1mL.5.17试样瓶：2.0mL.
6试样的制备与保存
6.1试样的制备
猪肾要去除脂肪和其他的非肾脏组织，猪肉要去皮和骨头.将其搅碎拌匀.分出0.5kg作为试样，将制备好的试样密封，并做上标记.
6.2试样保存
将试样置于一18C条件下贮存.
7测定步骤
7.1提取
称取试样2.00g（精确到0.01g）放人50mL聚丙烯离心管中，加人200pL乙晴进行涡流混合，混合后加人400uL5mol/L氢氧化钠溶液，并进行涡流混合30s.在（80土5）C水浴中放置1h.在此期间，要对每个测定样品进行两次涡流混合.1h后，将样品从水浴中取出并冷却至室温.加人12mL特丁基甲醚，置于振荡器上高速振荡15min，离心15min（转速为4000r/min）.吸出上清液，定量将特定基甲醚转移到干净的15mL的玻璃离心管内，待净化.
7.2净化
（4 000r/min）.将特丁基甲醚层吸出弃去.在磷酸盐溶液中加人2mL特丁基甲醚，振荡5min，离心5min（4000r/min），吸出特丁基甲醚层，弃去，然后再在磷酸盐缓冲溶液中加人2mL特丁基甲醚重
