中华人民共和国国家标准
GB/T21517-2008
饲料添加剂 叶黄素
Feed additive-Lutein
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录B为规范性附录，附录A为资料性附录.本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口， 本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、国家饲料质量监督检验中心（北京）、成都枫润科技有限公司、武汉新华扬生物有限责任公司.本标准主要起草人：赵小阳、田河山、孙鸣、李巍、詹志春、陶正国、马东霞、王彤、杨文军.
本标准首次发布.
饲料添加剂叶黄素
1范围
本标准规定了饲料添加剂叶黄素产品的分类、要求、试验方法、检验规则及标签、包装、贮存、运输.
炭黑等辅料，有效成分主要是叶黄素和它的同分异构体玉米黄质，也有少量的其他类胡萝卜素和蜡质， 本标准适用于以植物万寿菊中脂溶性提取物为原料，经皂化后，制成水剂或采用淀粉、玉米芯粉、白在饲料工业中作为着色剂类饲料添加剂.
分子式：CH0
相对分子质量：568.88（2001年国际相对原子质量）
结构式：
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备（GB/T603-2002.ISO6353-1，1982，NEQ)
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-1992，neqISO3696：1987）GB/T13079饲料中总砷的测定 GB10648饲料标签GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法
GB/T606化学试剂水分测定通用方法卡尔费休法
3分类
3.1产品按标示量的不同可分为：1.5%、1.6%、2.0%三种.
3.2根据合同要求确定，
4要求
本品为自由流动的橘黄色细微粉末或橘黄色液体，易氧化，不溶于水，溶于乙醇.
4.2技术指标
技术指标应符合表1规定.
表1技术指标
日 指 标粉状 液体含量（以CHO;计1（占标示量的百分比）/% 06 >90 /(mg/kg) ≤3.0 ≤3 0错/(mg/kg) ≤10 0 ≤10 0水分/% 粒度（0.84mm孔径标准箱） 100%通过 ≤8.0pH值 5 0~8 0
5试验方法
除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水符合GB/T6682中一级用水规定，标准溶液的制备应符合GB/T603.
5.1试剂和溶液
5.1.1正已烷：色谱纯.5.1.2乙酸乙酯：色谱纯.5.1.3正已烷， 5.1.4无水乙醇.5.1.5丙酮.5.1.6甲苯.5.1.7亚硝酸钠.5.1.9亚硝酸钠溶液（50g/L). 5.1.8硫酸.5.1.10硫酸溶液（0.5mol/L）：吸取硫酸（5.1.8)1.5mL缓缓注人100mL水中，冷却，摇匀.5.1.11提取剂：正已烷乙醇丙酮甲苯=10677（体积比）.
5.2仪器和设备
实验室常用设备及以下设备.5.2.1超声波水浴.5.2.2超纯水装置.5.2.3紫外分光光度计.5.2.5高效液相色谱仪：带紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器）. 5.2.4石英比色Ⅲ（1cm）.5.2.6原子吸收分光光度计.
5.3鉴别试验
样品的丙酮溶液在连续加人亚硝酸钠溶液（5.1.9）和硫酸溶液（5.1.10）后额色消失.
5.3.2方法二
取试样溶液（5.4.2.1)，用分光光度计测定，以1cm石英比色Ⅲ在420nm~480nm波长范围内测定试样溶液的吸收光谱，应在445nm土1nm、473nm土1nm的波长处有最大吸收峰.
5.3.3方法三（仲裁法）
5.3.3.1原理
叶黄素含量以总类胡萝卜素含量表示，试样中总类胡萝卜素经混合溶剂提取后，注人正相色谱柱2
上，用流动相洗脱，分离出叶黄素和玉米黄质，其色谱峰的分离度为3.06~3.09，叶黄素含量应在70%以上，玉米黄质含量在10%以上并通过峰面积比例测知其相对含量.
5.3.3.2试液的制备
根据产品含量（参见附录A）.称取试样约0.15g~0.2g（精确至0.0002g），置于100mL棕色容量瓶中，加提取剂（5.1.11）约80mL，在超声波水浴中加热超声提取20min.冷却至室温，用提取剂（5.1.11）定容至刻度，混匀，过滤，用移液管准确移取1mL滤液到10mL容量瓶中，用氨气吹干，用流动相稀释至刻度，混匀，溶液过0.45pm滤膜，供高效液相色谱仪分析.
5.3.3.3色谱条件
固定相：硅胶柱.内径4.6mm，长250mm，粒度3μm.流动相：正已烷乙酸乙脂=70十30（体积比），超声脱气.流速：1.5mL/min检测器：紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器），检测波长445nm或473nm. 进样量：20zL
5.3.3.4试样测定
将试样分析液（5.3.3.2），按上述色谱条件进行进样分析，得到叶黄素和玉米黄质，色谱峰见图 B. 1
5.3.3.5结果计算
叶黄素（%）=总类胡萝卜素量×叶黄素的峰面积（%）玉米黄质（%）=总类胡萝卜素量×玉米黄质的峰面积（%）（2）
5.4叶黄素（以总类胡萝卜素计）含量的测定
5.4.1原理
总类胡萝卜素在波长445nm士1nm处有最大吸收，可根据该波长处测定吸收度和标准百分吸光系数（E）计算其含量.
5.4.2分析步骤
5.4.2.1试液的制备
根据产品含量（参见附录A），称取试样约0.15g~0.2g（精确至0.0002g），置于100mL棕色容量瓶中，加约80mL无水乙醇（5.1.4），在超声波水浴中加热超声提取20min，冷却至室温，用无水乙醇（5.1.4）定容至刻度，混匀，过滤，用移液管准确移取1mlL滤液到10mL容量瓶中，用无水乙醇（5.1.4）稀释至刻度，混匀.
5.4.2.2试样测定
将试样分析液（5.4.2.1）置于1cm石英池中，用紫外分光光度计，在波长445nm士1nm处测定吸收度A，以无水乙醇（5.1.4）为空白对照.
5.4.2.3计算和结果的表示
）
式中：
A-试料（5.4.2.1）吸收度：1000试料（5.4.2.1）稀释倍数；m-试料质量，单位为克（g）；2550总类胡萝卜素百分吸光系数（E=2550）平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字.
5.4.3允许差
同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果绝对值之差应不大于0.3%.
