中华人民共和国国家标准
GB/T22728-2008
化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和 二丁基羟基甲苯（BHT)的测定 高效液相色谱法
Determination of butylated hydroxyanisole（BHA）andbutylated hydroxytoluene（BHT） in cosmeticsHighperformance liquid chromatography
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A为资料性附录.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院.本标准主要起草人：陈会明、郝楠、于文莲、周新、白桦、刘娟、卢加文.
化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和 二丁基羟基甲苯（BHT）的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和二丁基羟基甲苯（BHT）的液相色谱测定方法.
本标准适用于固体、膏状和液体化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和二丁基羟基甲苯（BHT）的测定.
本标准的方法检出限：丁基羟基苗香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）均为0.005%.
2原理
用甲醇超声提取化妆品中的BHA、BHT，离心分离，取上清液过滤，滤液经配有紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量.
3试剂与材料
除另有说明外，试剂均为分析纯，水为二次去离子水或重蒸水.
规由1
优级纯或者色谱纯.
3.2标准品
BHA，纯度不小于98%（其中3-BHA，纯度不小于90%；2-BHA，纯度不大于8%）：BHT，纯度不小于99%
3.3标准储备液
BHA的标准储备液：准确称取BHA标准品0.1g.精确至1mg.用甲醇溶解后转移至100mL容量瓶中，甲醇定容，振荡均匀，即得BHA质量浓度为1000μg/mL的标准储备液.
BHT的标准储备液：准确称取BHT标准品0.1g精确至1mg，用甲醇溶解后转移至100mL容量瓶中，甲醇定容，振荡均匀，即得BHT质量浓度为1000μg/mL的标准储备液.
4仪器
4.1高效液相色谱仪：配紫外检测器.4.2超声波清洗器.4.4注射式样品过滤器：配有有机相滤膜，滤膜孔径0.45gum. 4.3高速离心机：不小于15000r/min.4.5锥形瓶：具磨口塞，50mL.4.6容量瓶：100mL、25mL.
5测定
5.1试样处理
5.1.1固体、音状化妆品：称取化妆品0.5g（精确到1mg）于50mL锥形瓶中，加入甲醇25.00mL，超声提取20min，以12 000r/min高速离心15min，上清液过0.45 ym滤膜，滤液供测试.
5.1.2液体化妆品：称取液体化妆品（香水、爽肤水等）0.5g（精确到1mg）于25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分摇匀，上清液过0.45pm滤膜，滤液供测试.
5.2标准工作曲线的绘制
得质量浓度为200μg/mL的混合标准工作溶液，逐级稀释该溶液得到质量浓度为100μg/mL、50 pg/mL、25 μg/mL、10μg/mL、5μg/ml、1 μg/mL的混合标准工作溶液，供高效液相色谱测定，得出标准工作曲线.
5.3测定步骤
5.3.1色谱条件
a）色谱柱：Cs5pm，250mm×4.6mm（内径）或相当者；b）流动相：甲醇水（10：1）；d）检测波长：278nm； c）流速：1.0mL/min;e）柱温：室温；f）进样量：10l
5.3.2高效液相色谱测定
谱条件进行测定，在选定色谱条件下，标准溶液（5.2）按质量浓度由稀至浓顺序依次进样，得到峰面积 分别准确吸取样品待测液（5.1）及标准工作溶液（5.2）注人高效液相色谱仪，应用5.3.1规定的色与质量浓度的标准工作曲线.试样溶液中的BHA、BHT的响应值应在标准工作曲线的线性范围内.在5.3.1规定的色谱条件下，BHA、BHT标准物质的保留时间分别为3.924 min、8.955min.BHA和BHT标准物质的色谱图参见附录A中图A.1.
5.4空白试验
除不加试样外，均按上述步骤（5.1~5.3）同时完成空白试验.
6结果计算
结果按式（1）计算，计算结果保留到小数点后两位，计算结果需扣除空白值.
x=xV×10° × 100 ........... (1)
式中：
XBHA或BHT的含量，%； c标准曲线查得的BHA或BHT的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；V样品稀释后总体积，单位为毫升（mL）：-样品质量，单位为克（g）.
7回收率和精密度
%6~%96回V%0~%1000.24%~2.70%;
添加质量浓度为0.01%~1.00%时.BHT的回收率为97.5%～108.5%，相对标准偏差为0.27 %~2. 29%
丁基羟基苗香醚（BHA）： 二丁基羟基甲苯（BHT1
图A.1BHABHT标准物质高效液相色谱图
