中华人民共和国国家标准
GB/T23817-2009
大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定
Method for determination of sulfonylurea herbicide residues in soybean
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A、附录B和附录C均为资料性附录.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院.本标准主要起草人：陈冬东、李淑娟、祁彦、李建中、安娟、张新忠、杨强、占春瑞、李晓娟、储晓刚.
大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定
1范围
本标准规定了大豆产品中环氧密磺隆、噻吩磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄密磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、氯嘧磺隆、氟密磺隆残留量的高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱的测定方法.
本标准适用于大豆中环氧密磺隆、噻盼磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄嘧磺隆、氟磺隆、吡密磺隆、氯喀磺隆、氟密磺隆残留量的检测及确证.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，1SO3696：1987，MOD）
3原理
试样中磺酰豚类除草剂用乙晴提取，经氟罗里硅土柱净化后，用高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
4.2甲醇. 4.1乙晴：色谱纯.4.3丙酮.4.4二氧甲烷，4.5正已烷.4.6甲酸. 4.7氟罗里硅土：60mm~100mm 650C烘4h，降至室温后.称取95g氟罗里硅土加入5g水，配制成含水量为5%的氟罗里硅土，放人磨口瓶中在干燥器中平衡过夜后备用.4.8无水硫酸钠：650C灼烧4h，冷却后置于干燥器中存放备用.4.9二氯甲烷-丙酮-甲醇（7.520.5，体积比）：量取7.5mL二氯甲烷、2mL丙酮和0.5mL甲醇，4.10二氯甲烷-甲醇（11.体积比）：量取10mL二氯甲烷和10mL甲醇，混匀. 混匀.4.11战膜：0.22 pm4.12标准品：环氧嘧磺隆、噻盼磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄密磺隆、氟磺隆、耿密磺隆、氯嘧磺隆、氟嘧磺隆，纯度均大于98%，相关信息参见附录A中表A.1.4.13标准储备液：准确称取适量的10种磺酰腺标准品，用乙分别配制成浓度为100yg/mL的标准 储备液.4.14混合标准工作液：根据需要，分别吸取10种磺酰腺标准储备液用乙晴稀释配制成适当浓度的混合标准工作液.
5仪器和设备
5.1高效液相色谱仪（HPLC）：配有二极管阵列检测器. 5.2液相色谱-质谱质谱仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾离子源（ESI）.5.3均质器.5.4玻璃净化柱：300mm×10mm（内径）玻璃层析柱，依次填人2cm无水硫酸钠，2.5g的5%氟罗里硅土，2cm高的无水硫酸钠.使用前用20mL二氯甲烷活化.5.5振荡器. 5.6离心机.5.7旋转蒸发仪.5.8聚四氟乙烯离心管.
6试样制备与保存
6.1试样制备
取代表性试样500g.用粉碎机粉碎并使其全部通过0.425mm的样品筛，混和均匀.装入洁净的容器内，密封并标识.
6.2试样保存
试样于0C～4C避光保存.取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发生变化.
7分析步骤
7.1提取
称取5g试样（精确至0.01g）于50mL聚四氟乙烯离心管中，加人30mL乙晴于振荡器提取20min，4000r/min离心5min.将上清液转人150mL分液漏斗中.再向残渣中加入30mL乙晴重复上述操作一次，合并两次提取液于分液漏斗中.向分液漏斗中加人30mL用乙晴饱和的正已烷，振摇甲烷溶解残渣.
7.2净化
将上述提取液全部转移至柱上.用10mL二氯甲烷-丙酮-甲醇（7.520.5.体积比）（4.9）淋洗柱子并弃去，再用20mL二氯甲烷-甲醇（11，体积比）（4.10）进行洗脱并收集于梨形瓶中.洗脱液于旋转蒸发器40C下浓缩至干.用1mL流动相溶解定容.过0.22um滤膜，供HPLC和LC-MS/MS 测定.
7.3测定
7.3.1HPLC参考条件
a）色谱柱：C250mm×4.6mm（内径）.5pm，或相当者；b）流动相：乙-水（磷酸调pH=2.5），梯度条件参见附录B中表B.1； c）流速：1.0mL/min;d）检测波长：230nm；e）进样量：10pl；f）柱温：30C.
7.3.2LC-MS/MS参考条件
a）色谱柱：C150mm×2.1mm（内径），5pm，或相当者；b）流动相：乙-0.1%甲酸水溶液.梯度条件参见附录B中表B.2；2
c）流速：0.2mL/min;d）进样量：10yL:e）柱温：30C. f）质谱条件：参见附录B中表B.3和表B.4.
7.3.3定量测定
7.3.3.1HPLC法：根据样液中磺酰豚的含量，选定浓度相近的标准工作溶液，待测样液中某种磺酰眼的响应值应在仪器检测的线性范围内.对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定.在上述HPLC仪器条件下，参考保留时间分别为：环氧密磺隆10.74min，听磺隆11.25min，甲磺隆12.30min.醚 苯磺隆13.59min，氯磺隆14.11min，苄嘧磺隆17.35min，氟磺隆19.15min，吡嘧磺隆19.33min，氯嘧磺隆19.84min，氟嘧磺隆20.89min.液相色谱图参见附录C中图C.1.
7.3.3.2LC-MS/MS法：根据样液中磺酸类的含量，选定浓度相近的标准工作液，待测样液中某种磺酰脲的响应值应在仪器检测的线性范围内，对标准工作液及样液等体积参插进样测定.在上述仪器6.63min.氯磺隆6.86min，苄嘧磺隆8.46min.氟磺隆9.49min.吡密磺隆9.91min，氯穆磺隆 条件下，参考保留时间分别为：环氧密磺隆5.49min，噻吩磺隆5.63min，甲磺隆6.15min，醚苯磺隆9.91min，氟嘧磺隆10.46min.液相色谱-质谱/质谱色谱图参见附录C中图C.2.
7.3.4定性测定
按照上述条件测定试样和标准溶液，如果试样中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液相比在土2.5%的允许偏差之内：样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相对 丰度偏差不超过表1的规定，则可判断样品中存在相应的目标化合物.
表1定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度/% >20~50 >10~20 10允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50
7.4空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行.
8结果计算和表达
试样中待测化合物的残留量可以采用测定仪器的软件处理器或者按式（1）计算：
式中：
X-试样中被测组分的残留含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；A--样液中被测组分的峰面积；A标准工作液中被测组分的峰面积；c-标准工作液中被测组分的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）； V样液最终定容体积.单位为毫升（mL）；m一最终样液所代表的试样量，单位为克（g）.注：计算结果需将空白值扣除.
9测定低限和回收率
9.1测定低限
本标准液相色谱法对各待测物的测定低限为0.02mg/kg；液相色谱-质谱/质谱法对各待测物的测定低限为0.005mg/kg.
