中华人民共和国国家标准
GB/T23890-2009
Rapid determination of erucic acid and glucosinolate in rapeseed-Photometry
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A和附录B为资料性附录，本标准由中华人民共和国农业部提出并归口. 本标准起草单位：农业部油料及制品质量监督检验测试中心、中国农业科学院油料作物研究所.本标准主要起草人：李培武、张文、吴渝、李光明、汪雪芳、谢立华、王友平.
油菜籽中芥酸及硫苷的测定分光光度法
1范围
本标准规定了油菜籽中芥酸、硫苷含量测定的分光光度法.本方法的最低检出限：芥酸为0.5%，硫苷为10pmol/g. 本标准适用于双低油菜种子和商品籽中芥酸、硫苷含量的快速检测.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB5491粮食、油料检验扦样、分样法
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准.
3. 1
芥酸erucic acid
油菜籽油中所含顺”-二十二碳一烯酸，以所占脂肪酸组成的百分率表示.
3. 2
硫苷glucosinolate
油菜籽中所含硫代葡萄糖苷简称硫苷，以每克饼柏或每克油菜籽中所含硫苷总量的微摩尔数表示，
4原理
4.1芥酸测定原理
油菜籽油中芥酸含量不同，在聚乙二醇辛基苯基醚乙醇溶液中形成的浊度不同，根据浊度与芥酸含量的相关关系测定芥酸含量.
4.2硫普测定原理
油菜籽中硫苷与米曲霉硫武水解酶反应生成硫苷降解产物，和邻联甲苯胺乙醇溶液反应生成有特征吸收峰的有色产物，采用光度法测定硫苷含量.
5试剂
除非另有规定，使用试剂均为分析纯试剂.
5.1水，GB/T6682，二级.5.2超纯水，GB/T6682，一级.5.3聚乙二醇辛基苯基醚（CHO）乙醇溶液：10mg/mL.称取10.0g聚乙二醇辛基苯基醚用无 水乙醇溶解并定容至1000mL.5.4硫酸二氢钾（KH：PO ）溶液：0.1mol/L.称取1.36g磷酸二氢钾用蒸馏水溶解并定容至100 mL
5.5pH为6.0的 buffer 溶液；0.5mg/mL米曲霉硫式水解酶和0.1mol/L的KHPO 于纯水中定容，在pH计上用稀HPO调节pH值为6.0，冰箱中冷藏备用.5.60.62mg/mL的邻联甲苯胺：称取0.62g邻联甲苯胺充分溶解于无水乙醇中，定容至1L.贮藏5.7油菜籽硫苷测试板”：使用96孔板，试剂为pH为6.0的buffer溶液和0.62mg/mL的邻联甲苯 于棕色瓶中，冰箱中冷藏于一周内使用.胺溶液.
6仪器设备
6.1微孔板光度计：参见附录A. 6.2脂肪制备器：参见附录B.6.3微型粉碎机.6.4恒温箱.6.5天平：量程0~200g.感量10mg.6.7微量移液器：1000gL. 6.6可调微量移液器：200pl.
7取样
按照GB5491执行.取样时，应清除样品外来杂质.样品含水量大于13%时，需风干或50C烘干至水分小于13%.
8分析步骤
8.1芥酸测定
8.1.1预先将石英比色杯和20mL超纯水置于32C土0.5C恒温箱（6.4）中预热恒温.8.1.2取5g~8g油菜籽（第7章）倒人脂肪制备器制取油样.用取油管收集，静置备用.8.1.3称取0.30g油样于50mL具塞三角瓶中，用移液管加人25mL聚乙二醇辛基苯基醚乙醇溶液 （5.3），旋紧塞子，用力振摇，充分混匀后，放入32C士0.5C恒温箱（6.4）中保温15min.8.1.4在恒温箱内，用微量移液器（6.7）将1000gL恒温至32C的超纯水（5.2）加入三角瓶，边滴加边摇动三角瓶，旋紧塞子后摇匀，随即倒人比色杯，用微孔板光度计（6.1）进行芥酸测定，测定值即为油菜籽芥酸含量.
8.2硫苷测定
8.2.1取油菜籽样品约3g~5g（第7章），用微型粉碎机或研体磨碎，细度40目.8.2.2称取0.50g粉碎样品，置于5mL具塞试管.用移液管加人3mL水（5.1），塞紧塞子，充分混匀后室温下放置8min.8.2.3用脱脂棉过滤，或离心机（3000r/min）离心5min，取上清液50μL加人到硫苷测试板孔（5.7）8.2.4微孔板光度计测定硫苷，作空白调零后测定值即为每克饼柏或每克油菜籽中所含硫苷总量的微 内，静置8min，用微量移液器（6.6）加人150pL磷酸二氢钾溶液（5.4）后再静置2min.摩尔数（ymol/g）.同一样品进行两次重复测定，测定结果取算术平均值.
1）油莱籽硫苷测试板是由农业部泊料及制品质量监督检验测试中心提供的产品的商品名称.给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可.如果其能等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品
9精密度
9.1芥酸
芥酸含量大于5%时，两次平行测定结果绝对相差不大于1.0%：芥酸含量小于5%时，两次平行测定结果绝对相差不大于0.5%.
9.2硫昔
饼柏中硫苷含量两次平行测定结果绝对相差不大于8.0mol/g.油菜籽中硫苷含量两次平行测定结果绝对相差不大于4.0gmol/g.
