中华人民共和国国家标准
GB/T24800.12-2009
Determination of p-phenylenediamine.o-phenylenediamine andm-phenylenediamine in cosmetics
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A、附录B为资料性附录.本标准由中国轻工业联合会提出. 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.本标准负责起草单位：上海市质量监督检验技术研究院.本标准主要起草人：周泽琳、张辉、王丁林、严罗美、巢强国.
引言
品生产原料即组分添加到化妆品中.如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，则化妆品 本标准中的被测物质邻苯二胺、间苯二胺是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆成品应符合《化妆品卫生规范》对化妆品的一般要求，即在正常及合理的可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害.
目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法.
化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺 的测定
1范围
本标准规定了用高效液相色谱法和气相色谱法测定化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的含量.
本标准适用于化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的测定.
本标准高效液相色谱法对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的检出限均为150μg/g，定量限均为500μg/g；气相色谱法对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的检出限均为150μg/g，定量限均为500μg/g.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注明日期的引用文件，其随后所究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准. 有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，1SO3696:1987 MOD）
3高效液相色谱法
3.1原理
试样经甲醇超声提取后，经滤膜过滤，采用高效液相色谱分离，二极管阵列检测器检测，外标法定量.
3.2试剂和材料
3.2.1标准物质：对苯二胺，纯度不小于99%. 除另外说明外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.3.2.2标准物质：邻苯二胺，纯度不小于99%，3.2.3标准物质：间苯二胺，纯度不小于99%.3.2.4甲醇：色谱纯.3.2.5乙睛：色谱纯. 3.2.6亚硫酸钠溶液：质量分数为2%.3.2.7三乙醇胺.3.2.8磷酸.3.2.9三乙醇胺磷酸缓冲溶液：准确移取10.0mL三乙醇胺溶解于1000mL水中.用磷酸调pH7.7.经0.45um滤膜过滤.二胺各0.25g（精确至0.1mg）于100ml.的容量瓶中.用甲醇溶解并定容至刻度，此溶液1ml相当于2.50mg对苯二胺、邻苯二胺、间苯二胺，该溶液4C可避光保存3天.3.2.11对苯二胺、邻苯二胺、间苯二胺混合标准系列使用溶液：准确吸取混合标准溶液储备液（3.2. 10）0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL于6个25mL容量瓶中.用甲醇稀 释至刻度.配制成浓度为50 mg/L100 mg/L 200 mg/L.、300mg/L、400 mg/L500 mg/L 的混合标准系列使用溶液，并另配制试剂空白，溶液现配现用.
GB/T 24800. 12-2009
3.3仪器和设备
3.3.1高效液相色谱仪：具二极管阵列检测器.3.3.2分析天平：感量0.1mg. 3.3.3分析天平：感量0.01g.3.3.4pH计：渊量精度士0.02pH.3.3.5具塞比色管：50mL.3.3.6容量瓶：25mL、100mL.3.3.7激涡振荡器. 3.3.8超声振荡器，3.3.9滤膜：孔径0.45um.
3.4分析步骤
3.4.1样品处理
称取2.00g（精确至0.01g）样品于50mL具塞比色管.加入1mL2%亚硫酸钠溶液（3.2.6）、25mL甲醇（3.2.4），误振荡30s，再加入15mL甲醇（3.2.4），混勾，超声提取15min，用甲醇（3.2.4）定容至刻度.充分混匀后，静置，上清液经0.45μ滤膜过滤，滤液作为待测样液.
3.4.2高效液相色谱参考条件
b）流动相：三乙醇胺磷酸缓冲溶液乙晴（973）： a）色谱柱：反相C柱，250mm×4.6mm，5μm.或相当者；c）流速：1.0mL/min;d）柱温：30C；e）检测器：二极管阵列检测器： f）检测波长：280nm；g）进样量：5μL.注：流动相比例流速等色谱条件随仪器面异应通过试验选择最佳操作条件使苯二胺类化合物与化妆品中其他组分峰获得完全分离.
3.4.3测定
按3.4.2色谱条件.取混合标准系列使用溶液（3.2.11）和3.4.1步骤中滤液5uL进样.得到标准曲线和试样溶液的峰面积.从标准曲线上查得试样溶液中的对苯二胺、邻苯二胺、间苯二胺的浓度.
标准物质与加标样品的液相色谱图参见附录A的图A.1.
3.5结果计算
试样中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的含量按式（1）进行计算.
式中：
X一试样中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的含量，单位为质量分数（%）；试样质量，单位为克（g）. V试样溶液的体积，单位为毫升（mL）：计算结果保留两位有效数字.注：对于混合使用的试样，取含有苯二股染料的试样进行检测，计算结果按实际使用时的比例进行折算.
3.6允许差
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%.
3.7方法回收率
在添加浓度为0.05%~0.5%范围内，对苯二胺、间苯二胺和邻苯二胺的回收率分别为91%～2
