中华人民共和国国家标准
GB/T28080-2011
小麦印度腥黑穗病菌检疫鉴定方法
Detection and identification of Tilletia indica Mitra
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
目 次
前言1范围3小麦印度黑穗病菌基本信息 2规范性引用文件4方法原理5检疫鉴定流程6取样方法6.1未经加工小麦取样方法6.2加工小麦取样方法6.3袋装面粉抽样比例7主要仪器设备和试剂 37.1主要仪器设备 7.2主要试剂8检测与鉴定8.1样品前处理8.2形态学鉴定8.3单个冬孢子直接分子检测 8.4孢子培养物的分子检测8.5序列测定与比对9结果判断与表述.9.1形态学鉴定结果判断和表述9.2单个孢子直接分子检测结果判断和表述9.3孢子培养物分子检测结果判断和表述 9.4序列测定与比对10样品和原始数据保存.10.1样品保存.10.2原始数据保存附录A（资料性附录） 小麦印度程黑穗病菌其他信息附录B（规范性附录） 形态学鉴定 ......附录C（资料性附录） 小麦印度腥黑穗病菌与近似种的孢子显微形态图和扫描形态图附录D（规范性附录）单个冬孢子直接分子检测 12附录E（规范性附录）孢子培养物常规PCR检测 14附录F（规范性附录）孢子培养物实时荧光PCR检测 16附录G（规范性附录）序列测定与比对 18
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院.本标准主要起草人：章桂明、程颖慧、王颖、陆清、凌杏元、龙海、陈枝楠、向才玉、杨伟东、缪建银.
小麦印度胆黑穗病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了小麦印度腥黑穗病菌的检疫鉴定方法，包括形态学方法和分子生物学检测方法，规定了小麦印度程黑穗病菌检疫鉴定流程，明确了取样和样品保存方法.
本标准适用于小麦及其加工产品传带的小麦印度腥黑穗病菌的检测.
本标准也适用于除小麦以外的该病菌其他寄主传带小麦印度腥黑穗病菌的检测.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T18085植物检疫小麦化黑穗病菌检疫鉴定方法GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求
3小麦印度腥黑穗病菌基本信息
中文名：小麦印度屋黑穗病菌，
学名：Tilletia indica Mitra.
异名：Neovossia indica (Mitra)Mundkur.
病害英文名：karnal bunt of wheat(简称 KB)，partial bunt of wheat
属真菌界Fungi、担子菌门 Basidiomycota 黑粉菌纲Ustomycetes、黑粉菌目Ustilaginales、腥黑粉菌科Tilletiaceae、黑粉菌属Tilletia
小麦印度腥黑穗病菌主要通过发病种子和附着于健康种子表面的冬孢子进行远距离传播，也可随土壤及其他农用工具进行传播.
小麦印度腥黑穗病菌的其他信息参见附录A.
4方法原理
和PCR仪等对小麦印度黑糖病菌进行鉴定. 根据小麦印度腥黑穗病菌的生物学和形态学特征以及分子生物学特征，应用相关仅器，包括显微镜
5检疫鉴定流程
检疫鉴定流程见图1.
图1小麦印度腥黑穗病菌检疫鉴定流程图
