血清型4h单核细胞增生李斯特菌检测技术
Detection technology for serotype 4h Listeria monocytogenes
中国兽医协会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由扬州大学提出.
本文件由中国兽医协会归口.
本文件起草单位：扬州大学、国家食品安全风险评估中心、中国动物疫病预防控制中心、安徽省动物疫病预防与控制中心、江苏立华食品集团股份有限公司.
本文件主要起草人：焦新安、股月兰、郭云昌、李薇薇、孙雨、陈静、姚浩、孙佳善、胡亚辰.
T/CVMA
引言
本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及到条目9.8和附录D相关专利的使用.本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场.
下，就专利授权许可进行谈判.该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案.相关信息可以通过以下联系方式获得：
专利持有人姓名：扬州大学（股月兰、宁海波、徐国晨、杜洪香、姚浩）.
地址：江苏省扬州市文汇东路48号.
请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
血清型4h单核细胞增生李斯特菌检测技术
1范围
本文件规定了动物源样品中血清型4h单核细胞增生李斯特菌的设备和材料、培养基和试剂、样品采集、保存与运输、分离培养、生化鉴定、协同溶血反应、多重PCR及荧光PCR鉴定方法.
本文件适用于动物源样品中血清型4h单核细胞增生李斯特菌的分离及定性与定量检验.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求NY/T541兽医诊断样本采集、保存与运输技术规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
血清型4h单核细胞增生李斯特菌serotype 4hListeriamoncytogenes
指细菌菌体抗原（O抗原）为4：鞭毛抗原（H抗原）为AB的特征.该血清型菌株的序列分型为ST626，不能利用鼠李糖进行代谢.在羊血琼脂平板上，与马红球菌共培养时可观察到协同溶血现象.在灌胃感染模型中，该菌株在小鼠脏器中的定植能力是现有强毒力李斯特菌的200至400倍.
4缩略语
下列缩略语适用于本文件.
CFU：菌落形成单位（Colony forming units）DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）EDTA：乙二胺四乙酸(Ethylene diamine tetraacetic acid)FB：Fraser肉汤增菌液（Fraser borth）Lm：单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）OA：李斯特菌显色培养基（Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti）OD：光密度（Optical density）
bp：碱基对（base pair）
