中华人民共和国国家标准
GB/T28942-2012
Sampling procedure of vector infected by pathogens-Flea
中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口,
本标准主要起草单位:中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所、中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、北京市疾病预防控制中心.
本标准主要起草人:赵彤言、张映梅、董言德、鲁亮、张勇、
病媒生物感染病原体采样规程蚤
1范围
本标准规定了现场蚤感染病原体的采样规程. 本标准适用于多种可传播疾病的蚤感染或可能感染病原体的采样.
2试剂材料及仪器设备
乙醚、干冰、冰块、鼠笼、鼠夹、粘蚤纸、探蚤棒、塘瓷盘、眼科镀子、鼠袋、冻存管、布袋、冰盒、液氮罐、低温冰箱(-80℃).
3操作步骤
3.1标本的采集
3.1.1动物体表蚤采集
直接装于鼠袋,扎紧鼠袋,带回实验室,在密闭的空间内用乙醚麻醉后,将动物和鼠袋放于携瓷盘内,从 采用鼠夹法或鼠笼法采集动物.将鼠夹捕获的动物取下后,装人鼠袋,扎紧鼠袋:鼠笼捕获的动物动物体表和鼠袋表面仔细查找蚤.
3.1.2动物巢穴蚤采集
一处理: 掏取宿主窝巢中的草屑等内容物和浮土,装入鼠袋,带回实验室,麻醉后,可采取以下方法的其中之
a)放入水盘中,水面没过内容物至少5cm.将废弃物挑出,之后搅动水面,使蚤类漂浮于水面后捡蚤:b)直接从内容物中查蚤.
3.1.3洞干蚤采集
用探蚤棒(制作方法参见附录A)伸人洞干中拉动,取出后将探蚤棒上的粘蚤物放人鼠袋,带回实验室麻醉后掠蚤.
3.1.4地面游离蚤的采集
每日黄昏前1h~2h在室内墙角放置粘蚤纸(制作方法参见附录A),次日黎明时回收,检取粘附的蚤.
3.2标本保存
将采集的蚤依据采集的宿主分装于冻存管,并进行编号,详细记录标本的名称、数量、采集地点、生境、时间、采集人及宿主动物名称等信息(见附录B).编号的冻存管再用布袋装好,并对布袋进行编号,详细记录布袋中冻存管的编号情况.
用于细菌学检验标本应在4C~8℃中保存,可用加冰块的冰盒保存:用于其他病原体检验标本应冻结保存,可用干冰、液氮或一80℃冰箱保存.
4安全防护要求
4.1现场采集时应有专用的交通工具装载鼠笼、鼠夹,且与人员隔离.装载鼠夹和鼠笼的车辆待工作结束后及时消毒杀虫,4.2进行采集工作时,采集人员需要穿着浅色的防护服,防蚤袜,雨靴、戴乳胶手套,可能裸露部位涂抹 驱避剂.4.3用鼠夹法采蚤时,采集人员不可用手直接接触采获的动物.对口鼻出血的动物装入鼠袋后,鼠袋外层应加套一个塑料袋.4.4分类鉴定时,应在能够防止蚤类选逸的实验室或装置中进行操作,蚤应冷冻或麻醉致死后才能进行收集和分类工作,工作人员要求穿着连体式生物防护服,戴乳胶手套、口罩和帽子. 4.5接种相关疫苗.
附录A
(资料性附录)
A.1粘蚤纸制作方法
用16开的白纸或牛皮纸单面涂上一层用两份松香和范麻油(或凡士林)豆油各一份合制而成的粘剂,并用刷子涂抹均匀.粘蚤纸在使用当天现用现配.
A.2探蚤棒制作方法
用直径2.5cm、长1m左右具有一定弹性的橡皮管,外套以白布或蕴以棉花即可.