中华人民共和国国家标准
GB/T 29587-2013
Detection and identification of Cronartium ribicola J.C.Fisch.
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口.
本标准起草单位:中华人民共和国北京出人境检验检疫局、四川省森林病虫防治检疫总站、北京林业大学、中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局.
梁新苗、李建光、程颖慧、王颖、吴兴海、丁元明、李曼. 本标准主要起草人:高文娜、杨佐忠、贺伟、韩品、吕玉峰、汪万春、周琦、廖芳、邓丛良、江丽辉、边勇、
松疱锈病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了松疱锈病菌(CromariumribicolaJ.C.Fisch.)的检疫鉴定以病原菌的形态特征及在寄主植物上的症状作为依据,明确了现场检疫、病原菌分离、镜检鉴定、样品保存的方法.
本标准适用于松属Pinusspp.的单维管束松亚属寄主植物中松疱锈病菌的检疫鉴定.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件.
SN/T1126进出境木材检疫规程
SN/T1157进出境植物苗木检疫规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
单维管束松亚属Subgen.Srrobus
针叶基部的叶鞘早落,鳞叶不延下生长,针叶内具一条维管束,木材材性较软,结构均匀,强度较小,早材带至晚材带渐变,本射线管胞内壁上无锯齿,晚材细胞切向墅上具缘纹孔显著,本射线细胞水平壁纹孔明显、端壁常具节状加厚.
3. 2
双维管束松亚属Subgen.Pinus
针叶基部的叶鞘宿存,鳞叶下延生长,针叶内具两条维管束,球果种鳞的鳞脐均生于鳞盾的中央,木材材性较硬,结构不均匀,强度较大,松脂较多,早材带至晚材带通常急变,本射线管胞内壁上具有深或浅的锯齿,晚材管胞切向壁上具缘纹孔或有或无,本射线细胞水平壁纹孔缺如或稀少.
4松疱锈病菌基本信息
中文名:松疱锈病菌,又称白松疱锈病菌、茶燕生柱锈菌.
学名:Cronartium ribicola J. C Fisch. 1872.
异名:Peridermium strobe Kleb.
病害中文名:松疱锈病,又称白松疱锈病、五针松疱锈病、华山松疱锈病、红松疱锈病.
病害英文名soft-pine stem blister rust white-pine blister rustwhite-pine stem rust korean-pine
属于担子菌亚门 Basidiomycotina、冬孢菌纲Teliomycetes、锈菌目Uredinales、栅锈菌科Melamp-soraceae、柱锈菌属Cronartium.
该病原菌主要通过苗木引种栽植、带皮原木贸易运输进行远距离传播和蔓延.
GB/T 29587-2013
松疱锈病菌的其他信息参见附录A.
5方法原理
观察松疱锈病菌在寄主植物上的症状,显微观察病原菌的形态特征,进行检测鉴定.
6器材和试剂
6.1器材
片、盖玻片、放大镜、枝剪、手套、木工斧(电锯)、照相机、样品袋、标签、采样凭证等. 生物数码显微镜(带数码成像系统)、目(物)镜测微尺、试剂瓶、刀片、镊子、洗瓶、量筒、量杯、载玻
6.2试剂
蒸馏水、中性树胶等.
7检测
7.1取样
在检疫过程中,根据不同样品类型,分别按照SN/T1157或SN/T1126中的方法进行.
7.2松属寄主症状检查
(疱囊)或散发出大量锈黄色的锈孢子:感病枝、干皮层可见初期呈白色后变橘黄色泪滴状“蜜滴”(即性 重点检查松属植株枝干部是否有流脂、皮层肿大、破裂并从裂缝中生出黄白色至橘黄色的锈孢子器孢子液),"蜜滴”消失后皮下可见"血迹"状斑(参见附录A、附录B).挑取观察到可疑症状的样品,送实验室作进一步检验鉴定.
8签定
对于有可疑症状的样品在有症状部位挑取孢子在显微镜下观察测量,并记录特征数据.
9病原菌孢子形态鉴定特征
9.1性孢子器和性孢子
性孢子器黄白色或橘黄色,平展于松树皮层中,性孢子无色,鸭裂形,单细胞,大小为(2.4pm~4. 5 μm) × (1. 8 μm ~2. 5 μm) .
9.2锈孢子器和锈孢子
枝干皮层外,高4.0μm~6.0mm,短径3.0ym~5.0mm,长径4.0μm~40.0mm.单个锈孢子锈黄 锈孢子器由无色梭形细胞组成的癌囊状或圆柱状包膜所包裹,初期为黄白色,后变为橘黄色,生于色,成堆时为橘黄色,球形或卵圆形,大小为(22.8μm~33.6pm)×(14.4μm~28.8μm),表面生柱状疣突,疣上有5层~7层环纹,并有一与疣突顶部共处同一球面的平滑区.
10结果判定
如果松树寄主症状检查结果符合7.2的描述,病原菌孢子形态观察结果符合9.1、9.2的鉴定特征,且符合柱锈属Cronarium分种检索表(参见附录C)对茶蔗生柱锈菌的描述,可判定检测样品携带松疮锈病菌Cronartiumribicola;反之,则非松疱锈病菌.
11样品保存与结果记录
保存样品经登记和经手人签字后妥善保存.对检出松疱锈病菌的样品应制备永久玻片并干燥后保存,以备复核,该类样品保存期满后,需销毁处理.
试验记录应包括:样品来源、种类、时间:检验试验的时间、地点、方法和结果;经手人、试验人员和审核人员的签字:寄主的症状照片等,上述资料应归档并妥善保存.