中华人民共和国国家标准
GB/T30926-2014
化妆品中7种维生素C衍生物的测定 高效液相色谱-串联质谱法
Determination of 7kinds ofvitamin Cderivatives in CosmeticsHigh performance liquid chromatography-tandem Mass spectrometry
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中国轻工业联合会提出.
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.
本标准起草单位：大连市产品质量监督检验所（国家日化产品质量监督检验中心）、大连标准检测技术研究中心、上海市日用化学工业研究所、上海香料研究所.
本标准主要起草人：毛希琴、郑顺利、胡侠、潘炜、沈敏、钱茵.
化妆品中7种维生素C衍生物的测定 高效液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了化妆品中7种维生素C衍生物[抗坏血酸葡萄糖苷、3-O-乙基抗坏血酸、抗坏血酸磷酸酯盐（以抗坏血酸磷酸酯计）、抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸四异棕榈酸酯的测定一高效液相色谱申联质谱法.
本标准规定的高效液相色谱串联质谱法适用于化妆品中7种维生素C衍生物的定量测定.
本标准方法对目标化合物检出限均为3pg/g，对目标化合物定量限均为10pg/g.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
利用水和二氯甲烷双液相体系将水溶性维生素C衍生物（抗坏血酸葡萄糖苷，3-O-乙基抗坏血酸，抗坏血酸磷酸酯盐）与化妆品中油溶性成分及表面活性剂初步分离，水提物用C固相萃取小柱脱除其中的非极性强的干扰成分后，用反相高效液相色谱分离，申联四级杆质谱检测，标准曲线外标法定量.
油溶性维生素C衍生物（抗坏血酸硬脂酸酯，抗坏血酸棕榈酸酯，抗坏血酸二棕榈酸酯，抗坏血酸四异棕榈酸酯）用有机溶剂溶解提取，必要时用硅胶固相萃取小柱脱除蜡基基质后，用反相高效液相色 谱分离，串联四级杆质谱检测，标准曲线外标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水.和纯度参见附录A.4.2甲醇：色谱纯.4.3异丙醇：色谱纯. 4.4甲酸：色谱纯.4.5二氯甲烷.4.6无水乙醇，4.7四氢呋哺.4.8环已烷. 4.9丁基羟基茴香醚（BHA）.
4.1标准物质：7种维生素C衍生物的化合物名称、INCI名称、CAS号、分子式、结构式、相对分子质量4.102，6-二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）.
GB/T 30926-2014
4.11维生素E醋酸酯.4.12柠檬酸.4.14甲酸. 4.13亚硫酸氢钠（NaHSO）.4.15乙二胺四乙酸（EDTA)二钠.4.16C固相萃取小柱：200mg/3mL.使用前，依次用3mL甲醇和3mL水活化.4.17硅胶固相萃取小柱：200mg/3mL.使用前，用3mL环己烷（4.8）活化.%0 4.18溶液I：称取0.0037gEDTA二钠，0.5gNaHSO，用500mL蒸馏水溶解.甲醇400mL水配制）溶解.4.20溶液Il：称取BHA，BHT，VE醋酸酯，柠橡酸各0.1g，用500mL无水乙醇（4.6）溶解.4.21溶液IⅣ：称取BHA，BHT，VE醋酸酯，柠橡酸各0.1g，用500mL四氢呋哺（4.7）溶解.4.22溶液V：称取BHA，BHT，VE醋酸酯各0.1g，用500mL环己烷（4.8）溶解. 4.23溶液V：向200m1溶液Ⅲ（4.20）中加人1mL甲酸（4.14）.4.24溶液I：称取0.0037gEDTA二钠（4.15），0.5gNaHSO（4.13），用500mL40%甲醇水溶液（以200mL甲醇300mL水配制）溶解.4.250.05%甲酸的水溶液：向1L水中加人0.5mL甲酸（4.4）. 注：溶液1～司配制均应尽量选择棕色瓶，配钢后应注意遗光保存，建议保存时间不超过2周.4.260.05%甲酸的甲醇异丙醇溶液；500mL甲醇500mL异丙醇0.5mL甲酸（4.4）.（）由0由由由%0
4.28标准储备液
4.28.1油溶性维生素C衍生物标准储备液
抗坏血酸四异棕榈酸酯）各标准物质250mg分别置于4个25mL的棕色容量瓶中，用溶液IV（4.21）溶 准确称取油溶性维生素C衍生物（抗坏血酸硬脂酸酯抗坏血酸棕榈酸酯，抗坏血酸二棕榈酸酯，解定容，配制浓度为10mg/mL的标准储备溶液，于4C～6℃条件下避光保存，抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸二棕榈酸酯的保存期为3天，抗坏血酸四异棕榈酸酯的保存期为2周.
4.28.2水溶性维生素C衍生物标准储备液
准确称取3种水溶性维生素C衍生物（抗坏血酸葡萄糖苷，3-O-乙基抗坏血酸，抗坏血酸磷酸酯10mg/ml标准储备液，于4℃～6C条件下避光保存，保存期为3天.
4.29系列标准溶液
4.29.1系列标准溶液A
将4种油溶性维生素C衍生物的标准储备液（4.28.1）等体积混合并用溶液IV（4.21）稀释10倍，配制1mg/ml.的混合标准溶液.用溶液IV（4.21）逐级稀释，配制成浓度分别为1000μg/L，800μg/L，600μg/L 200μg/L，100μg/L的系列标准混合溶液.需现用现配.
4.29.2系列标准溶液B
将3种水溶性维生素C衍生物的标准储备液（4.28.2），等体积混合并用溶液I（4.18）稀释10倍，配制1mg/mL的混合标准溶液.用溶液I（4.18）逐级稀释，配制成浓度分别为1000μg/L，
800μg/L，600μg/L，200μg/L.100μg/L的系列标准混合溶液.需现用现配.注：墓于本方法中抗坏血酸磷酸酯盐（一般为镁垫或钠盐形式）均以抗坏血酸磷酸酯形式被检出.方法无法分辨是抗坏血酸的哪种盐形式.为统一测试结果建议选择抗坏血酸磷酸酯钠作为标准物质-测试结果则报告以抗坏 血酸磷酸酯计的含量[按式(2)进行].4.300.2μm微孔聚丙烯滤膜针式过滤器.
4.310.2xm微孔尼龙滤膜针式过滤器.
5位器和设备
5.1高效液相色谱申联四级杆质谱联用仪（ESI源）.5.3涡混合器.5.4超声波清洗器.5.5离心机：转速不小于5000r/min，离心试管容量10mL，15mL.5.6离心机：转速不小于12000r/min，离心试管容量2mL.5.7移液枪或移液器.
5.2分析天平：感量0.1mg：0.01mg.
6分析步骤
6.1油溶性维生素C衍生物的分析
6.1.1试样制备
6.1.1.1膏霜、乳液、化妆水、粉基类等化妆品样品的制备
称取0.1g样品（精确至0.001g）于10mL具塞离心管中，准确加人5mL溶液N（4.21），涡靛混合1min，室温超声10min后，移取1mL~2mL于2mL塑料离心管中，12000r/min离心5min，转人进样瓶中待测，或涡旋混匀后的溶液5000r/min离心10min后经聚丙烯滤膜过滤（4.30）转入进样瓶中待测.
6.1.1.2甲油类化妆品样品的制备
称取0.1g样品（精确至0.001g）于10mL具塞离心管中，向离心管中分别准确加入4mL溶液IV（4.21）和1mL溶液V（4.22），涡旋混合1min.移取1mL~2mL于2mL具塞塑料离心管中，12000r/min离心5min-转入进样瓶中待测，或涡旋混匀后的溶液5000r/min离心10min后经聚丙 烯滤膜过滤器（4.30）转入进样瓶中待测.
6.1.1.3唇膏等蜡基化妆品样品的制备
V（4.22）于50C水浴中超声分散至澄清透明，然后向离心管中准确加人3mL溶液Ⅲ（4.20），涡旅混匀 称取0.1g样品（精确至0.001g）于10mL具塞离心管中，向离心管中准确加人2mL溶液1min，移取1mL~2mL于2mL塑料离心管中，12000r/min离心5min，转人进样瓶中待测，或涡旋混匀后的溶液5000r/min离心10min后经聚丙烯滤膜过滤器（4.30）转入进样瓶中待测，
必要时，用硅胶固相萃取小柱脱除蜡基基质.具体操作如下：
称取0.1g样品（精确至0.001g）于10mL具塞离心管中，向离心管中加入3mL溶液V（4.22）于50C水浴中超声分散至澄清透明.将溶液趁热过硅胶周相萃取小柱（4.17），再用1mL~2mL环已烷（4.8）（50C水浴中预热）润洗离心管，润洗溶液一并加入硅胶固相萃取小柱，待上述溶液通过
