中华人民共和国国家标准
GB/T31858-2015
眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂 酸性黄1和酸性橙7的测定 高效液相色谱法
Simultaneous determination of acid yellow 1 and acid orange 7 prohibited usingin eye cosmetics-High performance liquid chromatography
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中国轻工业联合会提出.
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.
本标准起草单位：杭州市质量技术监督检测院、上海市日用化学工业研究所、中国计量学院、德清县质量技术监督检测中心.
本标准主要起草人：李玮、屠海云、俞晓平、沈群、芮昶、沈敏、肖海龙、杜晓婷、夏钟兴、赵凯、潘向荣、王啸、周敏、孙岚、陈美春、阮小娇、施华标、黄建萍.
引言
本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的眼部护肤化妆品中禁用物质，不得作为眼部则化妆品成品应符合《化妆品卫生规范》对眼部化妆品的一般要求，即在正常及合理的、可预见的使用条 化妆品生产原料即组分添加到眼部护肤化妆品中，如果技术上无法避免禁用物质带入眼部化妆品时，件下，不得对人体健康产生危害.
目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对眼部护肤化妆品中测定这些物质提供检测方法.
眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂 酸性黄1和酸性橙7的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了用液相色谱法测定膏霜、乳液、液体类眼部护肤化妆品中禁用的水溶性着色剂酸性黄1、酸性橙7的测定方法.
本标准适用于眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的测定，不适用于测定含有酸性黄1和酸性橙7的色淀的眼部护肤化妆品.
本标准方法检出限为1.5mg/kg，定量限为5.0mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
膏霜、乳液类眼部化妆品用三氯甲烷分散后，用水为溶剂进行提取：液体类眼部化妆品直接用水定容，然后用配有二极管阵列检测器（DAD）的液相色谱仅检测，外标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水.
4.1三氯甲烷.4.2乙酸铵.4.3甲醇：色谱纯.4.4着色剂标准品：酸性黄1和酸性橙7，纯度不小于99.0%，分子式、相对分子质量、着色剂索引号、 CAS号、结构式参见附录A.4.5标准储备溶液：准确称取1g（精确至0.0001g）着色剂标准品（4.4）至1000mL容量瓶中，用水溶解并定容，配制成1000mg/L的单个标准储备液，保存在棕色瓶中，4℃C保存.4.6标准工作溶液：分别移取适量的标准储备溶液，配制成0.5mg/L 2.0mg/1. 10.0mg/1.50.0mg/L 100.0mg/L浓度的混合标准工作溶液，现配现用.4.7乙酸铵缓冲溶液：称取1.54g乙酸铵（4.2）至1000m1容量瓶中，加水溶解并定容，所用溶剂和溶液分析前过0.45m滤膜并用超声脱气.
5位器和设备
5.1高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器或紫外检测器，
GB/T 31858-2015
5.2高速离心机.5.5分析天平：感量分别为0.0001g和0.001g. 5.4激涡混合仪.5.6微孔滤膜：0.45ym.
5.3超声波清洗仪.
6分析步骤
6.1样品处理
甲烷（4.1），涡振荡至样品分散均匀，准确加人10.00mL水，激涡振荡5min.6500r/min离心10min，上层清液经0.45μm微孔滤膜（5.6）过滤，滤液以待进样.
6.1.2液体类眼部化妆品：准确称取1.0g（精确到0.001g）样品于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后经0.45pm微孔滤膜（5.6）过滤，滤液以待进样.
6.2测定
6.2.1液相色谱分析参考条件
液相色谱分析参考条件如下：
a）色谱柱：C柱（250mm×4.6mmid.5μm）或其他效果等同的色谱柱；c）进样量：10pl; b）柱温：30℃；d）流动相：甲醇，乙酸铵缓冲溶液（4.7）；e）流速：1.0mL/min；f) 检测波长：240nm；g）梯度洗脱条件见表1.
表1梯度洗脱条件
时间 甲醇 乙酸铵缓冲溶液步骤 min % %0 0 00 30 702 00 30 702 9 00 S6 53 12 50 95 54 13 00 15 00 30 705 30 70
6.2.2标准工作曲线绘制
用配制的标准工作溶液（4.6）绘制以标准工作溶液中被测组分峰面积为纵坐标，标准工作溶液浓度为横坐标的标准工作曲线.水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7混合标准物质色谱图和标准样品光谱图参见附录B.
