中华人民共和国国家标准
GB/T32112-2015
Determination ofperoxidein oral care productsHigh performance liquid chromatography method
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中国轻工业联合会提出.
本标准起草单位：国家轻工业牙膏蜡制品质量监督检测中心、云南白药集团股份有限公司、北京市海淀区产品质量监督检验所、杭州市质量技术监督检测院.
本标准主要起草人：郑卫、高鹰、李显波、孙东方、孟玉、沈萼芮、尚维、安晓光.
口腔护理产品中过氧化物的测定 方法高效液相色谱法
1范围
分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差. 本标准规定了高效液相色谱法测定口腔护理产品中过氧化物的方法要点、试剂与标准物质、仅器、
本标准适用于以过氧化氢和其他释放过氧化氢的化合物或混合物（如过氧化腺和过氧化锌）为原料的口腔护理产品中过氧化物含量的测定.
本标准对过氧化物含量以过氧化氢计，检出限为0.3pg/mL，定量下限为2.0μg/ml.若取1.0g样品，过氧化氢的最低检出浓度为30mg/kg，最低定量浓度为200mg/kg，
2规范性引用文件
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法要点
滤，用液相色谱分离紫外检测器检测，采用内标法计算含量，得到样品中过氧化氢的含量. 试样采用水浸提取、反应释放出过氧化氢，取部分上清液与三苯基麟衍生反应，衍生溶液经滤膜过
4试剂与标准物质
4.1除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和水为GB/T6682规定的一级水.4.3三苯基麟溶液：称取三苯基麟1.3g，用乙晴溶解，定容至25mL，浓度为0.2mol/L，现用现配. 4.2乙晴：色谱纯.4.4过氧化氢：30%，分析纯.4.53%过氧化氢溶液：量取10mL过氧化氢（30%），水定容至100mL，使用前需要进行标定，标定方法见附录B.瓶中.用水定容至刻度，摇匀，配制成质量浓度为1000mg/L.的标准储备溶液.4.7过氧化氢标准工作液：精确移取过氧化氢储备液（4.4），用水配制质量浓度分别为5mg/L、10 mg/L、50mg/L、100mg/L 200 mg/L.、300 mg/L的系列标准工作液.4.8邻苯二甲酸二乙酯（DEP）：色谱纯. 4.9邻苯二甲酸二乙酯（DEP）内标溶液：称取邻苯二甲酸二乙酯（DEP）（4.8）0.5g，精确至0.0001g，置于500mL容量瓶中，用乙晴定容至刻度，摇匀.该溶液浓度为1000mg/L.
4.10溶剂：配制试液所需要的乙晴和水，乙晴先超声处理、水煮沸脱气，然后进行氮气置换处理.
5仪器
5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器.5.2分析天平：精确度0.1mg.5.3微孔滤膜：0.45μm.5.4自动进样器；10 gL
6分析步骤
6.1样品处理
准确称取1g样品（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中.加人去离子水定容，磁力搅拌10min均匀分散，在离心机中以3000r/min的速率离心10min，冷却备用.
6.2过氧化氢标准溶液衍生化反应
精确移取过氧化氢标准工作液（4.7）1.0mL于10mL棕色容量瓶中，加人1.0mL三苯基腾溶液（4.3）及4.0mL邻苯二甲酸二乙酯（DEP）内标溶液（4.9），加人乙腾定容到刻度，摇匀.置于暗处反应30min.
6.3试样溶液衍生化反应
溶液（4.3）及4.0m1邻苯二甲酸二乙酯（DEP）内标溶液（4.7），加人乙晴定容到刻度，摇匀.经0.45μm微孔滤膜过滤，置于暗处反应30min，待测.
6.4测定
6.4.1高效液相色谱参考条件
流速：1.0ml/min.检测波长：225nm.进样量：10L流动相：乙晴和水，梯度洗脱条件见表1.
液相色谱柱参数：C色谱柱.4.6mm×250mm.5pm
表1
时间 流建 乙A 水Bmin mL/min %0 60 409 60 4010 1.00 100 015 100 020 16 60 60 40 40
6.4.2标准工作曲线的制备
色谱条件下测定其峰面积，记录氧化三苯基脾及内标物邻苯二甲酸二乙酯（DEP）的峰面积，以标准溶液 吸取10L经过氧化氢标准工作溶液衍生化反应（6.2）所得衍生液注人高效液相色谱仪，在表1的浓度为横坐标、氧化三苯基麟的峰面积与内标物邻苯二甲酸二乙酯（DEP）的峰面积比值为纵坐标，绘制标准工作曲线.
标准溶液液相色谱图，参照附录A中图A.1.
6.4.3测定
吸取10uL经试样溶液衍生化反应（6.3）所得试样衍生液注人高效液相色谱仪，在表1的色谱条件下测定其峰面积，记录氧化三苯基腾及内标物邻苯二甲酸二乙酯（DEP）的峰面积，计算氧化三苯基腾的峰面积与内标物邻苯二甲酸二乙酯（DEP)的峰面积比值，利用回归方程式计算样液中过氧化氢的浓度.
样品参考谱图，参照附录A中图A.2.
7结果计算
试样中过氧化氢的含量X（mg/kg）按式（1）计算：
式中：
（一试样溶液中过氧化氢的浓度，单位为微克每毫升（mg/L)： X-口腔护理产品中过氧化物的含量（以过氧化氢计），单位为毫克每千克（mg/kg）：V试样定溶体积，单位为毫升（mL）：m一试样质量，单位为克（g）；N稀释倍数.
8回收率
方法的回收率为96.3%~108.1%.
9标准偏差
相对标准偏差小于7%（n=6).
