中华人民共和国国家标准
GB/T36056-2018
Method for analysis of forestry biomass-Determination ofsoluble saccharides content
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由国家林业局提出.
本标准由全国林业生物质材料标准化技术委员会（SAC/TC416）归口.
本标准起草单位：中国林业科学研究院木材工业研究所、山东农业大学、中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所、山东瑞三化工科技有限公司、厦门市格灵生物技术有限公司.
本标准主要起草人：范东斌、李琪、韩振泰、李改云、秦特夫、张冉、纪合建、陈智勇.
林业生物质原料分析方法 可溶性糖的测定
1范围
本标准规定了林业生物质原料中可溶性糖的测定方法的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器和设备、式样地采取和处理、实验步骤、结果计算和表达、检测低限和精密度、试验报告.
本标准适用于林业生物质原料中木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖含量的测定.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T30366-2013生物质术语GB/T35814一2018林业生物质原料分析方法样品处理方法GB/T36055-2018林业生物质原料分析方法含水率的测定 GB/T35820-2018林业生物质原料分析方法取样方法
3术语和定义
GB/T30366-2013界定的以及下列术语和定文适用于本文件.
3.1
林业生物质forestry biomass
林业生产和加工过程中产生的生物质.主要包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝Y、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物、造纸废弃物以及废弃木材）、能源林等.
[GB/T 30366-2013 定义2.1.3]
3.2
林业生物质原料可溶性糖soluble saccharidesof forestrybiomass
甘露糖、葡萄糖和蔗糖. 使用热水回流浸提法从林业生物质原料中提取的水溶性糖组分、主要包括木糖、阿拉伯糖、果糖、
4原理
定量. 用热水提取林业生物质原料中的可溶性糖提取液经过滤、定容后，采用高效液相色谱测定，外标法
5试剂和材料
5.1除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或去离子水.
GB/T 36056-2018
5.2乙晴：色谱纯.5.3流动相水：色谱级.5.4糖标准品：木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖，纯度不低于98%.5.5糖标准贮备液：分别称取1g（精确至0.1mg）经过（45土3）℃干燥恒重后的本糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖的标准品，置于100mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容，配制成浓度为10mg/mL的5.6糖标准工作液：分别吸取糖标准贮备液0.10mL、0 30mL、0.60mL0.80mL、1.00mL、3.00mL、 混合糖标准贮备液.置于0℃～4C冰箱中，可保存一个月.0.8mg/mL、1 mg/mL、3 mg/mL、5 mg/mL的糖标准工作液.
6仪器和设备
6.1高效液相色谱仪，配有示差折光率检测器或蒸发光检测器；建议色谱柱使用氨基色谱柱或其他一次进样能充分分离木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖的色谱柱.6.2电子天平：精度0.1mg.6.3恒温水浴.6.4烘箱. 6.5微量自动进样器：5μL~50μL6.6粉碎机.6.7滤膜：0.22 yum6.8玻璃锥形漏斗：口径75mm.6.9定性滤纸：直径15cm.6.11抽滤瓶：250ml. 6.10磨口锥形瓶：250ml.
7试样的采取和处理
处理.准备粒径为250μm~425μm（40目~60目）的风干试样不少于200g，置于密闭容器中. 按照GB/T35820-2018和GB/T35814-2018所述方法，对林业生物质原料进行试样的采取和
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8.1试样含水率的测定
按照GB/T36055一2018所述湿基含水率测定方法测定试样的含水率.
8.2可溶性糖的提取
称取4g~5g（m，精确至0.1mg）试样，移人容量为250mL的磨口锥形瓶中，加人50mL95C~100℃的热蒸馏水，锥形瓶口装上回流冷凝管，置于沸水浴中（水浴的水平面需高于装有试样的磨口锥形瓶中的液面）浸提1h，并经常摇荡.冷却后采用倾泻法经定性滤纸过滤，并收集滤液，滤渣用50mL95C～100C的热蒸馏水洗回到磨口锥形瓶中，重复上述浸提操作2次.合并3次滤液，置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度（f），取约2mL滤液，用0.22pm微孔滤膜过滤至样品瓶，待测.
8.3液相色谱分析
8.3.1色谱参考条件
a）色谱柱：氨基色谱柱（4.6mm×250mm，3.5m），配有相应的保护柱；b）流动相：乙晴（5.2）1水（5.3）：三乙胺=83：1710.1（体积比）.过0.22gm滤膜；c）流速：1.OmL/min；d）柱温：30℃；f）进样体积：5pL~30μL.取决于提取液浓度. e）检测器：示差折光率检测器：
8.3.2标准工作曲线的绘制
分别吸取7个浓度的糖标准工作液，经0.22μm滤膜过滤后，注人高效液相色谱仪，在上述参考色谱条件下测定糖标准溶液的响应值（峰高），以糖浓度为横坐标、峰高为纵坐标，利用线性回归方法拟合 各糖的标准工作曲线，即：
式中：
（.--某糖标准溶液浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；A某糖的液相色谱信号响应值； k.-某糖标准工作曲线的斜率，单位为毫克每毫升（mg/mL）；b.某糖标准工作曲线的截距，单位为毫克每毫升（mg/mL）.
糖种类标识：
8.3.3试样中可溶性糖的测定
提取液进行重复进样，若提取液中糖浓度过高，先将提取液进行稀释（稀释比例记为D），再进行测定. 吸取提取液，注人高效液相色谱仪，在8.3.1色谱参考条件下测定提取液的响应值（峰高），对每个根据标准工作曲线计算提取液中木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖的含量（g.）.
9结果计算和表达
林业生物质原料中可溶性糖的含量x单位用毫克每克（mg/g）表示，按式（2）计算：
式中：
糖种类标识；q.--根据标准工作曲线算出的提取液中糖的含量.单位为毫克每毫升（mg/mL)；D---试样溶液检测前稀释倍数；1提取液总体积，单位为毫升（mL）；m--试样质量，单位为克（g）； u---试样含水率，%.
如果符合重复性，取两次独立测定的算术平均值作为测定结果，精确至小数点后两位.
