BJS
食品补充检验方法
BJS 202502
国家市场监督管理总局 发布
食品中普萘洛尔等25种β-受体阻滞 剂类化合物的测定
1范围
左布诺洛尔、喷布洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、卡拉洛尔、倍他洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、噻吗洛尔、比索 本方法规定了食品中呵噪洛尔、阿普洛尔、普萘洛尔、氧烯洛尔、阿替洛尔、美托洛尔、索他洛尔、洛尔、拉贝洛尔、醋丁洛尔、贝凡洛尔、阿罗洛尔、塞利洛尔、奈必洛尔、卡维地洛、兰地洛尔的高效液相色谐-申联质谱测定方法.
本方法适用于饮料（含固体饮料）、代用茶、保健食品（口服液、片剂、胶囊）中吲噪洛尔、阿普洛尔、洛尔、倍他洛尔、美洛尔、纳多洛尔、噻鸣洛尔、比索洛尔、拉贝洛尔、醋丁洛尔、贝凡洛尔、阿罗洛尔、 普蔡洛尔、氧烯洛尔、阿替洛尔、美托洛尔、索他洛尔、左布诺洛尔、喷布洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、卡拉塞利洛尔、奈必洛尔、卡维地洛、兰地洛尔的测定.
2原理
试样经乙晴或乙醇提取，过滤膜后，采用高效液相色谱-串联质谱检测，外标法定量.
3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水.
3.1试剂
3.1.1甲酸（CHO）. 3.1.2乙晴(CH;N).3.1.3乙醇（CHO）：分析纯.
3.2试剂配制
3.2.10.1%甲酸水溶液：移取甲酸（3.1.1）1mL，加水稀释至1000mL.混匀备用.
3.3标准品
吲噪洛尔、阿普洛尔、盐酸普萘洛尔、盐酸氧烯洛尔、阿替洛尔、酒石酸美托洛尔、盐酸索他洛尔、盐酸左布诺洛尔、喷布洛尔、盐酸卡替洛尔、盐酸艾司洛尔、卡拉洛尔、倍他洛尔、美菩洛尔、纳多洛尔、噻吗 洛尔、富马酸比索洛尔、盐酸拉贝洛尔、盐酸醋丁洛尔、盐酸贝凡洛尔、阿罗洛尔、盐酸塞利洛尔、盐酸奈必洛尔、卡维地洛、兰地洛尔标准品，纯度≥97%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品.其中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见附录A.
3.4标准溶液的配制
3.4.1标准储备液（100μg/mL）
分别准确称取按纯度和含盐量折算后的吲噪洛尔、阿普洛尔、普萘洛尔、氧烯洛尔、阿替洛尔、美托
BJS 202502
洛尔、索他洛尔、左布诺洛尔、喷布洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、卡拉洛尔、倍他洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、 噻吗洛尔、比索洛尔、拉贝洛尔、醋丁洛尔、贝凡洛尔、阿罗洛尔、塞利洛尔、奈必洛尔、卡维地洛、兰地洛尔标准品（3.3）各10mg（精确至0.00001g），分别用乙晴（3.1.2）溶解并稀释至100mL，摇匀，制成浓度为100pg/mL的标准储备液，混匀.将溶液转移至试剂瓶中，-18℃以下保存，有效期6个月.
3.4.2混合标准中间液（1μg/mL）
分别准确吸取各标准储备液（3.4.1)0.2mL，置于同一20mL容量瓶中，用乙晴（3.1.2）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1μg/mL的混合标准中间液，混匀.将溶液转移至试剂瓶中，一18℃以下保存，有效期1个月.
3.4.3标准系列工作液
分别准确吸取混合标准中间液（1μg/mL)（3.4.2）适量，用空白基质提取液（5.2.3）稀释成各化合物临用新制.或根据需要采用乙晴（液体饮料、口服液）（3.1.2）配制适当浓度的溶剂标准工作液.标准曲线系列工作溶液浓度或依实际需要适当调整.
牌S'
3.5.1微孔滤膜：0.22pm，有机系.
4仪器和设备
4.1高效液相色诺-申联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）.4.2分析天平：感量分别为0.001g和0.00001g.4.3离心机：最高转速不低于8000r/min.4.4超声波清洗仅：功率250W.4.5涡旋混合器.
5分析步骤
5.1试样制备和保存
5.1.1液体饮料、口服液、软胶囊
除二氧化碳；软胶囊取10g试样或全部试样（试样低于10g时，胶囊取整粒，含胶囊壳），囊壳剪碎.搅 液体饮料、口服液取50g试样或全部试样（试样少于50g时）；含二氧化碳的液体样品通过超声去拌均匀后装人活净容器中，密封，置4C保存，备用.
5.1.2代用茶、固体饮料、片剂、硬胶囊
或全部试样（试样低于10g时，胶囊取整粒，含胶囊壳），胶囊壳剪碎.磨制成颗粒状或粉状，装入洁净 代用茶、固体饮料取50g试样或全部试样（试样低于50g时）：保健食品片剂、硬胶囊取10g试样容器中，密封，置4C保存，备用.
5.2样品前处理
5.2.1液体饮料、口服液、软胶囊
准确称取1g（精确至0.001g）试样于10mL具塞刻度试管中，加人8mL.乙晴（3.1.2），密塞，超声2
提取10min.用乙晴（3.1.2）稀释至刻度.过0.22μm微孔滤膜，取滤液，待测定.
5.2.2代用茶、固体饮料、片剂、硬胶囊
准确称取1g（精确至0.001g）试样于离心管中，加入4mL乙醇（3.1.3），涡旋2min，超声提取10min，8000r/min离心5min，上清液转移至10mL容量瓶中，残渣用4mL乙醇（3.1.3）重复提取一次，合并两次上清液于同一容量瓶中，用乙醇（3.1.3）定容，过0.22μm微孔滤膜，取滤液，待测定.
5.2.3空白基质提取液
称取与试样基质基本相同或相近的阴性基质样品，按照5.2的操作步骤进行空白基质提取液的制备，
阴性基质样品中各待测化合物含量应在方法检出限以下.
5.3仪器参考条件
5.3.1色谱参考条件如下.
a）色谱柱：C色谱柱（2.1mm×100mm，1.8μm），或性能相当者.b）流动相：A为0.1%甲酸水溶液（3.2.1），B为乙晴（3.1.2），参考梯度洗脱程序见表1.c）流速：300 pL/min.d）柱温；40℃.e）进样量：2pL.
表1参考梯度洗脱程序
时间/min 流动相A/% 流动相B/%0 95 516 40 6017 95 520 95 5
5.3.2质谱参考条件如下.
a）离子源：电喷雾离子源（ESI源）.b）干燥气、雾化气、葡气、碰擅气等均为高纯氮气或其他合适气体，使用前应调节相应参数使质谱 灵敏度达到检测要求，毛细管电压、干燥气温度、鞘气温度、鞘气流量、喷嘴电压、碰撞能量、碎裂电压等参数应优化至最佳灵敏度，母离子及碎片离子等参考信息见附录B.
5.4试样溶液的测定
5.4.1定性测定
将标准系列工作溶液和试样溶液分别注人高效液相色谱-申联质谱仪中测定，在相同试验条件下，试样中待测组分的色谱峰保留时间与标准工作液中的对应组分保留时间偏差在土2.5%以内，且试样中待测组分定性离子对的相对离子丰度与浓度相近的标准工作液中对应组分的定性离子的相对丰度比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为试样中检出对应的待测组分.
表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 10最大允许偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50
5.4.2定量测定
将标准系列工作液（3.4.3）和试样溶液按仪器参考条件（5.3）进行测定，以标准系列工作液（3.4.3）的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，按外标法计算试样中目标成分的含量.试样中待测化合物的峰面积应在标准曲线范围内，超出标准曲线质量浓度上限的试样，应根据实际浓度用乙 睛或空白基质提取液稀释至线性范围内再进行测定.
液体饮料基质中25种标准物质检测谱图见附录C.
5.5空白试验
除不加试样外，均按5.2的步骤操作.
6结果计算
试样中各待测组分的含量按公式（1）计算：
式中：
X-试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：p 一由标准曲线得到的试样溶液中各待测组分的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/ml）；P一-由标准曲线得到的空白溶液中各待测组分的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL)；试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）；m--试样的质量，单位为克（g）； f-稀释倍数.计算结果保留三位有效数字.
7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的15%.
8其他
当取样量为1g，定容至10mL时，吲噪洛尔、阿普洛尔、普慕洛尔、氧烯洛尔、阿替洛尔、美托洛尔、索他洛尔、左布诺洛尔、喷布洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、卡拉洛尔、倍他洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、噻吗洛尔、比索洛尔、拉贝洛尔、醋丁洛尔、贝凡洛尔、阿罗洛尔、塞利洛尔、奈必洛尔、卡维地洛、兰地洛尔的 方法检出限均为0.005mg/kg，定量限均为0.010mg/kg.
