NY/T 5404.1-2026 病毒微生物农药 甘蓝夜蛾核型多角体病毒 第1部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药.pdf

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中华人民共和国农业行业标准

NY/T5404.1-2026

病毒微生物农药甘蓝夜蛾核型多角体病毒 第1部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药

Virus-based insecticides-Mamestra brassicaenucleopolyhedrovirus (MabrNPV)Part 1:Mamestra brassicaenucleopolyhedrovirus technical concentrate (TK)

中华人民共和国农业农村部 发布

前言

本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.

本文件是NY/T5404《病毒微生物农药甘蓝夜蛾核型多角体病毒》的第1部分.NY/T5404已经发

布了以下部分:

第1部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药:

一第2部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂;

第3部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂.

请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.

本文件由农业农村部种植业管理司提出.

本文件由全国农药标准化技术委员会(SAC/TC133)归口.

本文件起草单位:农业农村部农药检定所、中国科学院武汉病毒研究所.

病毒微生物农药甘蓝夜蛾核型多角体病毒 第1部分:甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药

1范围

本文件规定了甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药的要求,试验方法,产品的检验与验收,标志、标签、包装、储运和质量保证期.

本文件适用于以病毒包涵体为主要成分的甘蓝夜核型多角体病毒母药.

2规范性引用文件

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款,其中,注日期的引用文件,文件.

GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法 GB3796农药包装通则GB4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T16150农药筛析试验方法 GB/T20813农药产品标签通则GB/T30361农药干燥减量的测定方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件.

3.1

甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药Mamestra brassicae nucleopolyhedrovirus(MabrNPV)technical con-centrate (TK)

以甘蓝夜核型多角体病毒包涵体为主要成分,有效含量为甘蓝夜蛾核型多角体病毒的含量,通常情

况还会包含伴随病毒扩增而产生的宿主昆虫或细胞的生物组分.

3.2

病毒包涵体occlusion body(OB)

病毒水平传播的主要载体形式,其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中.

生测效价比potency ratio

生物学活性. 根据药物的药理和对生物体的作用设计试验,比较样品、标准品引起的生物反应,测定药物效价或其

3. 4

菌落形成单位colonyforming units(CFU)

由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落.指在琼脂平板上,在一定温度下,经过一定时间培养后形成的每一个菌落是计算细菌或霉菌数目的单位

NY/T 5404. 1-2026

3.5

杂菌菌落总数numberofmicrobialcontaminants

培养所得到的微生物(真菌和细菌)菌落数之和. 将甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上,在一定温度下,经过一定时间

4要求

4.1外现

通常为灰白色至棕褐色均匀粉状物,无可见机械杂质,不应有结块;或者灰白色至棕褐色液体,存放过程中可能出现沉淀,经搅动能恢复为均匀的悬液,不应有结块.

4.2规范项目及指标

甘蓝夜蛾核型多角体病毒母药还应符合表1的要求.

表1甘蓝夜螨核型多角体病毒母药控制项目指标

项目 指标病毒包函体数量-OB/mL(COB/g) ≥100 亿生测效价比(标准品LC/待测样品LC).% 杂菌菌落总数,CFU/mL(CFU/g) ≤1. 0×10° ≥80 0pH 范围 5. 0~7.5细度(通过75um标准第),% 干燥减量'.% ≥95 0 ≤5.0当母药为固体时.

5试验方法

5.1一般规定

除非另有说明,本文件所用试剂均为分析纯,所述溶液均为水溶液,试验用水为GB/T6682中规定的三级水.

5.2抽样

按GB/T1605中"固体制剂采样"液体制剂采样”方法进行.用随机数表法确定抽样的包装件,最终抽样量固体应不少于200g,液体不少于600ml.

5.3PCR扩增及DNA测序法对病毒毒种的鉴定

m13通用引物序列)进行PCR扩增反应,琼脂糖凝胶电泳检测后.用m13通用引物对PCR产物进行测序,将测序结果与甘蓝夜蛾核型多角体病毒CHb-1株的polh基因、lef-8基因及lef-9基因的核苷酸序病毒. 列进行比对分析,这3个基因的核昔酸一致性均大于98%,即认定试样中的病毒为甘蓝夜核型多角体

甘蓝夜蛾核型多角体病毒有效成分描述见附录A.

甘蓝夜蛾核型多角体病毒毒种的鉴定按照附录B的规定执行.

5.4病毒包涵体含量的测定

5.4.1方法提要

水稀释成水悬浮液,并稀释至适当倍数后,滴加在血球计数板上,在光学显微镜下计数.根据血球计数板 甘蓝夜蛾核型多角体病毒包涵体含量的测定采用血球计数板计数法.称取少量病毒试样,用定量的上病毒包涵体的数量及稀释倍数,计算出单位质量(体积)病毒包涵体的数量.

5.4.2仪器、设备

分析天平:精确至0.0001g.微量移液器:100pL~1 000μL

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