中华人民共和国国家标准
GB/T 37206-2018
有机分离膜抗菌性能测试方法
Test method for antibacterial properties of organic separation membrane
中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由全国分离膜标准化技术委员会(SAC/TC382)提出并归口.
膜天膜科技股份有限公司、山东招金膜天股份有限公司、长江大学、广州中国科学院先进技术研究所、浙 本标准起草单位:天津膜天膜工程技术有限公司、北京科泰兴达高新技术有限公司、天津大学、天津江津膜环境科技有限公司、国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所.
本标准主要起草人:赵莹、于慧、周明璟、王志、王春浩、王乐译、张梦、孔赞、王剑鸣、冯磊、王瀚消、刘燕、许以农、唐小珊.
有机分离膜抗菌性能测试方法
1范围
本标准规定了水处理用有机分离膜抗菌性能的测试方法.本标准适用于有机平板膜、中空纤维膜抗菌性能的测试,其他类型的有机分离膜可参考执行.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB4789.2-2016食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T26813双光束紫外可见分光光度计YY0569-2011Ⅱ级生物安全柜
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1抗菌antibacterial[GB/T 31402-2015 定义3.1] 制品表面抑制细菌生长的状态或药剂抑制制品表面细菌生长的效果.
3.2有机膜organicmembrane以有机聚合物制成的具有分离功能的半透膜.[GB/T20103-2006.定文2.1.8]
' 平板膜flat membrane外形为平板或纸片状的膜.[GB/T 20103-2006 定文2.1.27]
3.4中空纤维膜hollow fiber membrane 外形为纤维状、空心的膜.注:改写 GB/T 20103-2006定义 2.1.28.
3.5
菌落形成单位colony formingunit:CFU
殖所形成的集落. 在活菌培养计数时,为表达活菌的数量,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁
9'
抗菌率antibacterialrate
在抗菌试验中用百分率表示微生物数量减少的值.[GB 21551.1-2008,定义3.6]
4方法原理
将膜试样和空白对照分别与一定细菌浓度的测试用菌悬液培养一定时间,测定培养后洗脱液中的细菌数,计算膜试样的抗菌率,
5仅器设备
5.1ⅡI级生物安全柜:符合YY0569-2011的规定.5.2分光光度计:符合GB/T26813的规定. 5.3恒温恒湿培养箱:温度应保持(36土1)℃.5.4电热恒温水浴锅:控温准确度土1℃.5.5高压蒸汽灭菌锅:温度应保持(121土2)℃.5.7天平:感量为0.1g. 5.6冷藏箱:温度应保持5℃~10℃5.8无菌平Ⅲ:玻璃或聚苯乙烯制直径90mm.5.9无菌试管:15mm×150mm.5.10无菌移液器:量程为 10pL~100μL、100μL~1000μL、2mL~10miL5.11无菌接种环.
6试剂或材料
6.1要求
测试中培养基和试剂应按制造商的说明书配制,配制后,放人高压蒸汽灭菌锅中,在121℃条件下试剂存放时间不应超过30d. 灭菌20min后待用.如不立即使用,应置于无菌冷藏箱中,在5℃~10℃条件下保藏.培养基和
6.2主要试剂
6.2.2氢氧化钠(NaOH):分析纯. 6.2.1无菌水:符合GB/T6682中规定的二级水,使用前灭菌.6.2.3盐酸(HCI):分析纯.6.2.4氯化钠(NaCl):分析纯.6.2.5磷酸二氢钾(KHPO):分析纯.6.2.6葡萄糖:分析纯. 6.2.7牛肉膏:生化试剂.6.2.8蛋白陈:生化试剂.6.2.9琼脂粉:生化试剂.6.2.10酵母膏:生化试剂. 6.2.11胰蛋白陈:生化试剂.2
6.3培养基和试剂的制备
6.3.11/500营养肉汤
称取0.3g牛肉膏、1.0g蛋白陈、0.5g氯化钠于烧杯中,加人100mL无菌水,加热煮沸溶解并混合均匀后,取2mL用无菌水稀释至1000mL,用0.1mol/L的NaOH溶液和0.1mol/L的HC1溶液调节pH值至7.0±0.2.
6.3.2营养琼脂
称取3.0g牛肉膏、10.0g蛋白陈、5.0g氯化钠、15.0g琼脂粉于烧杯中,加人1000mL无菌水,加热煮沸溶解并混合均匀后,用0.1mol/L的NaOH溶液和0.1mol/L的HCl溶液调节pH值至7.0±0.2.
6.3.3平板计数琼脂
称取2.5g酵母膏、5.0g胰蛋白陈、1.0g葡萄糖、15.0g琼脂粉于烧杯中,加人1000mL无菌水,0.2. 加热煮沸溶解并混合均匀后,用0.1mol/1.的NaOH溶液和0.1mol/L的HCl溶液调节pH值至7.0±
6.3.4斜面培养基
取6mL~10mL经过高压蒸汽灭菌未凝固的营养琼脂加人到倾角约15的试管中,冷却凝固.
6.3.5磷酸盐缓冲液
称取3.4g磷酸二氢钾溶解于50mL无菌水中,用浓度为1mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.0±0.2,转移到100mL容量瓶中加无菌水定容然后取1.25mL稀释至1000mL.
6.4菌种
测试所用的菌种或菌株应来源于国家级菌种保藏管理中心.根据需要可选用其他菌种或菌株作为测试用菌,但应在检测报告中注明并说明理由.推荐用测试菌种如下:
金黄色葡萄球菌(CGMCC1.2910或ATCC6538P):*大肠杆菌(CGMCC1.2463或ATCC8739).
7测试方法
7.1样品处理
在无菌环境下对膜试样进行处理,操作步骤如下:
a)将待测有机平板膜制成直径为(20土1)mm的圆形,中空纤维膜剪成(20土1)mm的试样;b)用无菌水清洗干净,浸泡24h,多次漂洗;c)对膜试样进行灭菌处理,风干24h; d)中空纤维膜试样整齐紧密地排成(20土1)mm×(20土1)mm的正方形,固定.准备3个平行试样.
7.2测试用菌悬液的制备
7.2.1菌种保藏
将菌种接种于斜面培养基(6.3.4)上,在5℃~10℃下保藏,每月转种1次.不得使用转种超过5次或