中华人民共和国国家标准
GB/T36389-2018
T4DNA连接酶
T4 DNA ligase
国家市场监督管理总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由全国工具酶标准化工作组（SAC/SWG11）归口.司、厦门致善生物科技股份有限公司、厦门大学、安琪酵母股份有限公司. 本标准起草单位：福建南生科技有限公司、福建华灿制药有限公司、苏州海狸生物医学工程有限公本标准主要起草人：郑登忠、詹学雄、黄发灿、任辉、赵晶、章丽丽、宋娜杰、张永有、姚膀.
引言
T4DNA连接酶来源于重组基因工程菌，催化相邻DNA链的5'-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，促使黏性末端之间或平末端之间的连接.制订T4DNA连接酶国家标准，用以推动该类工具酶的产业化具有重要的意义.
T4DNA连接酶
1范围
本标准规定了T4DNA连接酶的技术要求、检验方法、包装、运输、贮存和保质期.本标准适用于从重组基因工程菌分离纯化的T4DNA连接酶.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T191包装储运图示标志GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法YY/T0087电泳装置YY/T0657医用离心机
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
T4 DNA 连接酶T4 DNA ligase
一种核酸连接酶能催化相邻DNA链的5'-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，促使黏性末端之间或平末端之间的连接.
3.2
T4 DNA连接酶活性单位activity unit of T4 DNA ligase
在20pL1×T4DNA连接酶反应缓冲液中，16C反应条件下，30min能使50%的经HindⅢ消化的ADNA片段[5'端浓度为0.12 μmol/L(300μg/mL)]连接所需的酶量定义为1个活性单位（U).
4技术要求
4.1外观
澄清透明的液体，无沉淀.
4.2T4DNA连接酶活力
≥8 000 U/mL.
4.3杂质
不应含有核酸外切酶和核酸内切酶，
GB/T 36389-2018
5检验方法
5.1外观
直接或将样品倒人无色透明试管中，在自然光条件下，肉眼观察.
5.2T4DNA连接酶活力
依据附录A的方法进行检测.
5.3杂质
5.3.1核酸外切酶
依据附录B的方法进行检测.
5.3.2核酸内切酶
依据附录C的方法进行检测.
6包装、运输及贮存
6.1包装
内包装材料应洁净无污染，封口应严密，无泄漏.外包装箱储运图示标志应符合GB/T191的规定.
6.2运输
产品应在冷冻条件下运输，运输工具应清洁卫生、干燥，并有防雨、防晒设施，运输过程中应做好防护措施避免倒置及破损.不宜与有毒、有害、有异味物品混运.
6.3贮存
应在温度低于一20℃的条件下储存.
7保质期
在符合本标准规定的条件下，包装完好未启封的产品保质期为3年：超过保质期，使用前应检测酶活力，
