BJS
食品补充检验方法
BJS 202501
食品中坎地沙坦酯、拉西地平、 阿齐沙坦的测定
国家市场监督管理总局 发布
食品中坎地沙坦酯、拉西地平、 阿齐沙坦的测定
1范围
本方法规定了食品中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的液相色谐-申联质谱测定方法. 本方法适用于压片糖果、代用茶、固体饮料、茶饮料、饼干、果冻、配制酒和保健食品（口服液、茶剂、片剂、硬胶囊、软胶囊）中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的测定.
2原理
试样经0.2%甲酸乙躺溶液提取，提取液经离心、稀释、过滤膜后，采用液相色谱-串联质谱仪检测.外标法定量.
3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯水为GB/T6682规定的一级水.
3.1试剂
3.1.1乙晴（CHCN). 3.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.3.1.3甲醇（CHOH）：色谱纯.3.1.4甲酸（HCOOH）：色谱纯.3.1.5甲酸铵（HCOONH）：色谱纯.
3.2试剂配制
3.2.10.2%甲酸乙溶液：量取2mL甲酸（3.1.4），用乙晴（3.1.1）溶解并定容至1000mL，混匀.3.2.25mmol/L甲酸铵溶液：称取0.315g甲酸铵（3.1.5），用水溶解并定容至1000mL，混匀.
3.3标准品
坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦标准品，纯度≥98.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品，其中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见附录A.
3.4标准溶液配制
3.4.1标准储备液（1.0mg/mL)
分别准确称取坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦标准品（3.3）各10mg，用甲醇（3.1.3）溶解并定容于10mL容量瓶中，混匀，将溶液转移至棕色试剂瓶内.一20C及以下避光保存，有效期6个月.
3.4.2混合标准中间液
分别准确吸取坎地沙坦酯和阿齐沙坦标准储备液0.1mL、拉西地平标准储备液0.2mL于10mL
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容量瓶中，用甲醇（3.1.3）定容至刻度混匀，将溶液转移至棕色试剂瓶内，其中坎地沙坦酯和阿齐沙坦 的质量浓度均为10μg/mL，拉西地平的质量浓度为20μg/mL.一20℃及以下避光保存，有效期3个月.
3.4.3基质标准系列工作溶液
用空白基质提取液（5.2.3）将混合标准中间液（3.4.2）逐级稀释，配制成基质标准系列工作溶液，其中坎地沙坦酯和阿齐沙坦的系列质量浓度为1μg/L、2μg/L、5μg/L、10yg/L、25μg/L和50yg/L，拉西地平的系列质量浓度为2μg/L、4μg/L、10μg/L20μg/L、50μg/L和100μg/L，或依仪器响应情况配制适当浓度的基质标准系列工作溶液.临用现配.
注：拉西地平对光不稳定，配制过程需避光.
3.5材料
3.5.1亲水性聚四氟乙烯微孔滤膜：0.22um，或性能相当者.
4仪器和设备
4.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI源）.4.2电子天平：感量分别为0.001g和0.01mg- 4.3涡旋混合器.4.4超声波提取仪.4.5离心机：转速≥4000r/min.4.7匀浆机. 4.6粉碎机.
5分析步骤
5.1试样制备与保存
5.1.1固体试样、半固体试样
取适量代表性试样（压片糖果、代用茶、固体饮料、饼干、茶剂、片剂）置粉碎机中粉碎，充分混匀：硬胶囊试样（含胶囊壳）整体进行粉碎：软胶囊试样先取出内容物，再将胶囊壳剪碎至2mm以下，并使胶囊壳与内容物充分混匀：果冻试样充分均质至浆状；黏稠状试样充分搅拌均匀.制备好的试样装人洁净 容器中，密封并标记，果冻置4C避光保存，其他按试样标示的保存条件避光保存.
5.1.2液体试样
示的保存条件避光保存. 取适量代表性试样（茶饮料、配制酒、口服液），充分混匀后装人洁净容器中，密封并标记，按试样标
5.2试样前处理
5.2.1固体试样、半固体试样
称取1g（精确至0.001g）试样于50mL具塞离心管中，准确加人25mL0.2%甲酸乙晴溶液（3.2.1）.涡旋混匀1min，超声提取10min，4000r/min离心4min.准确吸取1.0mL上清液，用水定容至2mL，混匀后（若浑浊，则以4000r/min离心4min），用微孔滤膜（3.5.1）过滤，供液相色谱-串联质谱仪
测定.
5.2.2液体试样
准确量取1.0mL试样于25mL容量瓶中，用0.2%甲酸乙晴溶液（3.2.1）稀释至刻度，混匀.准确吸取1.0ml试样溶液，用水定容至2mL，混匀后用微孔滤膜（3.5.1）过滤，供液相色谱-串联质谱仪 测定.
注：拉西地平的操作过程应避免强光照射.
5.2.3空白基质提取液
称取与试样基质基本相同或相近的阴性基质试样，按照5.2.1或5.2.2操作步骤进行空白基质提取液的制备.
阴性基质试样中各待测化合物的含量应在方法检出限以下.
5.3仪器参考条件
5.3.1液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：C色谱柱（2.1mm×50mm，1.7pm），或性能相当者：b）流动相：A为5mmoL/L甲酸铵溶液（3.2.2），B为乙晴（3.1.2），梯度洗脱程序见表1；c）流速：0.3mL/min;d）柱温：35C； e）进样体积：2uL.
表1参考梯度洗脱程序
时间/min 流动相A/% 流动相B/%0 0 95 51.0 95 52 864 5 4 6 95 2 86 56 0 95 5
5.3.2质谱参考条件如下：
b）扫描方式：正离子扫描； a）离子源：电喷雾离子源（ESI源）；c）检测方式：多反应监测（MRM）；d）毛细管电压：3.0kV；f）干燥气流速：16L/min； e）干燥气温度：210℃；g）雾化气压力：206.8kPa；h）鞘气温度：330C；i）勒气流速：11L/min：j）碎裂电压：380V； k）待测化合物定性离子对、定量离子对和碰撞能量的参考值见表2.
表2待测化合物定性离子对、定量离子对和碰撞能量的参考值
化合物名称 定性离子对（m/z） 定量离子对（m/=） 碰撞能量/eV611 0>349 0 38玫地沙坦酯 611 0>423 0 611 0>423 0 12拉西地平 456 1>354 0 456 1>400 0 16456 1>400 0 16阿齐沙坦 457 1>233.0 457 1>233 0 22457 1>279 0 12
5.4标准曲线的制作
将基质标准系列工作溶液（3.4.3）分别注人液相色谱-申联质谱仪中，测定相应的离子对的峰面积，以定量离子对的峰面积为纵坐标，基质标准系列工作溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线.
5.5试样溶液的测定
5.5.1定性测定
在同样测试条件下，试样溶液中待测化合物的保留时间与基质标准工作溶液中对应化合物的保留时间偏差在士2.5%以内，且试样中待测化合物定性离子的相对离子丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中对应化合物的定性离子的相对离子丰度比较，偏差不超过表3规定的范围，则可判定为试样中检出 对应的待测化合物.
表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 <10最大允许偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 5.5.2定量测定 将试样溶液按仪器参考条件（5.3）进行测定，按外标法计算试样中待测化合物的含量.试样溶液中待测化合物的峰面积均应在仅器检测的线性范围之内，超出线性范围时，应根据测定浓度进行适当倍数稀释，同时用同等稀释倍数的空白基质配制标准曲线溶液后再测定. 基质标准溶液中各待测化合物特征离子质量色谱图见附录B. 5.6空白试验 除不加试样外，均按5.2的步骤操作. 6结果计算 试样中待测化合物的含量按式（1）计算：
