ICS65.150 B52 DB32 江苏省地方标准 DB32/T3925—2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增(LA MP)检测技术规范 Technical specification of detecting white-spot syndrome virus (WSSV)by loop- mediated isothermal amplification (LAMP) 2020-12-15发布 2020-01-15实施 江苏省市场监督管理局发布 i DB32/T3925—2020 前言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作到则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草. 本文件的附录A、B为资料性附录. 本文件由苏州大学提出并归口. 本文件起草单位：苏州大学、江苏省水生动物疫病预防控制中心 本文件主要起草人：薛仁宇、贡成良、陈辉、曹广力、魏育红、方 苹、胡小龙、朱敏、刘波. DB32/T3925—2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增(LAMP)检测技术规范 1范围 本文件规定了用LAMP技术检测白斑综合征病毒的方法. 本文件适用于环介导等温扩增(LAMP)对虾、蟹白斑综合征病毒的鉴定及其检疫. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅改日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SC/T7103—2008水生动物产地检疫采样技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 环介导等温扩增Loop-mediated isothermal amplification(LAMP) 一种新的等温核酸扩增方法，其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异性引物，利用一种链置 换DNA聚合酶在等温条件下保温30min-60min 所完成的核酸扩增反应. 4试剂和材料 4.1水 应符合GB/T6682中一级水的要求. 4.2模板制备缓冲液 缓冲液中含20 mM Tris-HCl 10 mM KCI 体积百分数0.1%Triton X-100 10mM(NH4)2SO4 2 mM MgS04 -20℃保存. 4.3 Bst DNA聚合酶 8U/L -20℃保存，不能在反复冻融或经历温度剧烈变化情况后使用. 4.4 dNTPs混合物 含dATP、dTTP、dCTP、dGTP各2.5umol/L的混合物，- 1 ...
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