NY/T 3001-2016 饲料中氨基酸的测定 毛细管电泳法.pdf

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B 46 ICS 65.120
NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3001-2016
饲料中氨基酸的测定 毛细管电泳法 Determinationof amino acidsinfeed- Capillaryelectrophoresis
2016-11-01发布2017-04-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T3001-2016
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由农业部畜牧业司提出。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。

本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)]。

本标准主要起草人:李丽蓓、冯忠华、王彤、饶正华、崔昂、魏书林、张苏、严明、严寒、唐健、田静、 刘晓露。

NY/T 3001-2016
饲料中氨基酸的测定毛细管电泳法
1范围 本标准规定了饲料中氨基酸测定的毛细管电泳法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和饲料原料中氨基酸含量的测定。

可测定的 氨基酸种类包括胱氨酸、赖氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、脯氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、 丙氨酸、氨酸、亮氨酸与异亮氨酸之和、酪氨酸和苯丙氨酸的测定,不适用于蛋氨酸和色氨酸含量的 测定。

2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T15399-1994饲料中含硫氨基酸测定方法一离子交换色谱法 GB/T18246-2000饲料中氨基酸的测定 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 样品需在6mol/L盐酸中水解成单一氨基酸,经异硫氰酸苯酯溶液(PITC)衍生,再用毛细管电泳 的方法进行分离和定量。

但待测氨基酸不同,前处理方法有所不同。

其中,胱氨酸必须在水解前用过甲 酸氧化为磺基丙氨酸,才能衍生测定;而酪氨酸必须用未氧化的样品水解测定;其他氨基酸则可选用上 述任一方法处理测定。

4试剂和材料 除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯和符合GB/T6682规定的一级水。

4.1碳酸钠溶液,c(NaaCOs)=0.1mol/L:取(0.715土0.001)g碳酸钠.加15mL水于25mL的容量 瓶中溶解,用水定容。

溶液在塑料瓶中保存2个月。

4.2异硫氰酸苯酯溶液(PITC溶液):取0.4mLPITC于25mL棕色容量瓶中,用2-丙醇定容至刻度 4.3氢氧化钠溶液:称取2g氢氧化钠于250mL玻璃杯中,用水稀释至100ml。

在塑料瓶中保存6 个月。

4.5磷酸氢二钠溶液:取(4.78土0.01)g十二水磷酸氢二钠于100mL容量瓶中,溶解后定容。

溶液 保存2个月。

4.6磷酸二氢钠溶液:取(2.28土0.01)g一水合磷酸二氢钠或(2.57土0.01)g二水合磷酸二氢钠于 100mL容量瓶中,溶解后定容至刻度。

溶液保存2个月。

4.7磷酸盐缓冲液(pH7.7~7.8):取50mL磷酸氢二钠溶液(4.5)和5mL磷酸二氢钠溶液(4.6)于 100mL容量瓶中,用水定容。

溶液保存2个月。

1
NY/T 3001--2016 4.8β-环糊精溶液:取(0.570±0.001)gβ-环糊精倒人50mL烧杯中.加人25mL~30mL水并充分 混合至完全溶解。

若有必要,可将烧杯放在水浴锅中加热(温度不超过50℃)。

溶解后转移至50mL的 容量瓶中,用水定容并充分混合。

溶液保存2个月。

定容至刻度。

溶液保存2周。

4.1013种单一氨基酸储备溶液,4.0mg/mL:称取精氨酸盐酸盐(0.02420土0.00001)g.一水合组氨 酸盐酸盐(0.02700土0.00001)g,赖氨酸盐酸盐(0.02490土0.00001)g.丙氨酸、天冬氨酸、氨酸、甘 氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸各(0.02000土0.00001)g,分别置于10mL带 盖瓶中,分别准确加人5mL水溶解。

若有必要,可在水浴锅中缓慢加热60℃~70℃来充分地溶解氨基 酸。

天冬氨酸和谷氨酸储备液保存1个月,其他氨基酸溶液保存个月 4.11苯丙氨酸和酪氨酸储备溶液,0001)gg的两种氨基酸,用1mL 盐酸(4.4)和9mL水的混合液溶解,使其完全溶解。

储备 液保存2个月。

取(0.04000±0.000g磺小玻璃瓶中,加水溶 解并定容至10mL。

该储备可保存3
液:分别精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、...

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