ICS11.220 B41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T553-2015 代替NY/T5532002 禽支原体PCR检测方法 Detection of avian mycoplasmas by polymerase chain reaction(PCR) 2015-05-21发布 2015-08-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T553-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替NY/T553一2002《禽支原体病诊断技术》. 本标准与NY/T553一2002相比，删除了血清凝集实验，选取了PCR方法检测鸡毒支原体和滑液 囊支原体. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中国动物卫生与流行病学中心. 本标准主要起草人：王娟、李卫华、王玉东、黄秀梅、龚振华、郭福生. 本标准的历次版本发布情况为： NY/T553—2002. I NY/T553-2015 禽支原体PCR检测方法 1范围 本标准规定了禽支原体PCR(聚合酶链式反应)的检测技术要求. 本标准适用于禽支原体病的流行病学调查和辅助性诊断. 2缩略语 下列缩略语适用于本文件. MG:mycoplasma gallisepticum鸡毒支原体. MS:mycoplasma synoviae滑液囊支原体. PBS:phosphate buffered solution磷酸盐缓冲液. 3实验室设备要求 3.1仪器 基因序列分析仪、台式高速冷冻离心机、电泳仪、电泳槽、冰箱、紫外凝胶成像系统、微量移液器、水 浴锅、涡旋仪等. 3.2操作区域 样品处理区要有相应的生物安全设施；配液区要求高度洁净；电泳区要与其他操作区域相互隔离. 3.3操作者 操作者应接受过PCR技术培训，熟悉防止核酸污染和溴乙锭污染的具体措施，熟悉电泳结果的判 断方法. 4相关试剂 4.1 2XTag Master Mix 生物试剂公司生产. 4.21.5%琼脂糖凝胶 见A.1. 4.31XTAE缓冲液 见A.2. 4.4溴乙锭(10ug/L) 见A.3. 4.5商品化的DNA分子量标准 要求在100bp~300bp之间有5条以上的指示条带. 4.6标准菌株 S6株、WVU1853株购自中国兽医药品监察所. 4.7阴性对照品 用高压灭菌的PBS作为阴性对照标准品. 5操作程序 5.1样品处理 1 ...
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