ICs11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27536-2011 猪流感病毒分离与鉴定方法 Isolation and identification of swine influenza virus 2011-11-21发布 2012-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27536—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所. 本标准主要起草人：乔传玲、杨焕良、陈艳、辛晓光、陈化兰. I GB/T27536—2011 猪流感病毒分离与鉴定方法 1范围 本标准规定了猪流感病毒分离与鉴定方法. 本标准适用于各种亚型猪流感的病原分离和鉴定. 2试验材料、试剂 2.1剪刀、镊子. 2.21mL注射器. 2.3单道及多道微量移液器、吸头. 2.49~11日龄SPF鸡胚. 2.5犬肾细胞(MDCK). 2.66孔培养板. 2.7DMEM培养基. 2.8 HEPES缓冲液(1mol/L储存液). 2.9胎牛血清. 2.10TPCK-胰蛋白酶（胰蛋白酶经TPCK处理）. 2.110.01mol/LpH7.0~7.4磷酸盐缓冲液(PBS)(参见附录A中A.1). 2.12磷酸盐缓冲液(pH5.9)(参见附录A中A.5). 2.130.85%生理盐水（参见附录A中A.2). 2.14阿氏(Alsevers)液（参见附录A中A.3). 2.150.5%红细胞悬液（参见附录A中A.4). 2.16胎球蛋白（参见附录A中A.6). 2.17过碘酸盐（参见附录A中A.7). 2.18亚砷酸盐（参见附录A中A.8). 2.19硫代巴比妥酸（参见附录A中A.9). 2.20无菌蒸馏水或去离子水， 3仪器 3.1生物安全柜（柜内负压，有HEPA过滤器可避免细胞培养物污染及保护操作人员安全） 3.2孵化器. 3.3CO2培养箱. 3.4台式高速冷冻离心机. 3.537℃水浴加热器. 3.6煮沸锅， 3.7棉拭子（医用棉签）， 3.8研磨器. 1 ...
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