ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27640-2011 马痘诊断技术 Diagnostic techniques for horsepox disease 2011-12-30发布 2012-04-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27640—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口， 本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中国动物卫生与流行病学中心. 本标准主要起草人：梁成珠、朱来华、肖西志、郑小龙、邓明俊、岳志芹、毕道荣、梁君妮、徐彪. GB/T27640—2011 马痘诊断技术 1范 本标准规定了马痘临床诊断、病毒分离与鉴定等诊断技术要求. 本标准适用于马痘的诊断. 2临床检查 2.1临床特征 病马于系部和球节处的皮肤上出现丘疹，随后变为水疱，最后为脓疱，并干润面结癣.由于局部疼 痛，可引起玻行，病马一般不显全身症状；有的病马于唇内侧、齿龈、舌、舌系带、颊部等粘膜上发生痘疹， 也是先发丘疹，继而水疱和脓疱，脓疱破裂形成浅的溃疡；母畜外生殖器水肿，并在皮肤和粘膜上形成水 疱、脓疱和遗疡，公畜的病变表现为阴茎、包皮和龟头上的痘疹样病变， 2.2初步判定 2.2.1根据临床特征可作出病马感染马痘的初步判定. 2.2.2最终判定应进行病毒分离鉴定. 3病毒分离 3.1样品采集和运送要求 采取病变部位的渗出液、水疱液和溃疡部位组织作为采集对象，尽量无菌采集，采集后低温送实验 室进行病毒分离. 3.2病毒分离试验 3.2.1所需仪器、设备 3.2.1.1C02培养箱. 3.2.1.2Ⅱ级生物安全柜. 3.2.1.3倒置显微镜. 3.2.1.4带冷冻功能的离心机. 3.2.2材料准备 3.2.2.1细胞培养基DMEM. 3.2.2.2Hela细胞. 3.2.2.3 Hanks液(Hanks液，见A.1;含抗生素，见A.4). 3.2.2.4小牛血清. 3.2.2.5待检马组织：采取病变部渗出液、水疱液或丘疹和溃疡部组织作为标本，用Hanks液配制成 1:10悬液，以1500r/min离心10min 取上清备用. 1 ...
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