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KJ 食品快速检测方法 KJ202209 蔬菜水果中腐霉利的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202209 蔬菜水果中腐霉利的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了蔬菜水果中腐霉利的胶体金免疫层析快速检测方法. 本方法适用于韭菜、番茄、黄瓜、茄子、葡萄、草莓等蔬菜水果中腐霉利的快速测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.样品中腐霉利经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑 制抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化.通过检测线与控制 线(C线)颜色深浅比较，对样品中腐霉利进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1丙酮(C3HO). 3.1.2乙酸乙酯(C4HgO2). 3.1.3乙腈(CHCN). 3.1.4甲醇(CHOH). 3.1.5三羟甲基氨基甲烷(C4H1NOa) 又名Tris碱. 3.1.6盐酸(HCl 37%). 3.2试剂配制 3.2.1Tris-盐酸缓冲液(pH=9.0 0.2mol/L):称取24.2 g Tris碱(3.1.5)于700mL水中，搅拌溶解 后，加入盐酸(3.1.6)调节pH至9.0，用水定容至1000mL. 3.2.2样品提取液：准确移取10mL.甲醇(3.1.4)，用Tris-盐酸缓冲溶液(3.2.1)稀释定容至100mL.. 3.3标准品 腐霉利标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥99.0%. 注：或等同可溯源物质. 表1腐霉利标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 腐霉利 Procymidone 32809-16-8 Cis Hu Cl NO: 284.14 1 KJ202209 3.4标准溶液配制 3.4.1腐毒利标准储备液(1000μg/mL):准确称取25mg(精确至0.1mg)腐霉利标准品(3.3)，置于 50mL烧杯中，用5mL丙酮(3.1.1)溶解，全部转移至25mL容量瓶中，再用少量丙酮多次洗涤烧杯转 移至容量瓶中，最后用丙酮(3.1.1)定容，摇匀，配制成浓度为1000μg/mL的腐霉利标准储备液，避 光一18℃保存，有效期1年. 3.4.2腐霉利标准中间液A(500g/mL):准确移取腐霉利标准储备液(3.4.1)5mL于10mL容量瓶 中，用乙酸乙酯(3.1.2)定容，摇匀，配制成浓度为500g/mL的腐霉利标准中间液A 避光0℃~4℃ 保存，有效期1个月. 3.4.3腐毒利标准中间液B(100μg/mL):准确移取腐霉利标准储备液(3.4.1)1mL于10mL容量瓶 中，用乙酸乙酯(3.1.2)定容，摇匀，配制成浓度为100μg/mL的腐霉利标准中间液B 避光0℃~4℃保 存，有效期1个月. 3.4.4腐霉利标准工作液(10μg/mL):准确移取腐霉利标准中间液B(3.4.3)1mL于10mL容量瓶 中，用乙腈(3.1.3)定容，摇匀，配制成浓度为10μg/mL的腐霉利标准工作液，临用现配. 3.5材料 腐霉利胶体金免疫层析试剂盒：含胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂. 4仪器和设备 4.1电子天平：感量分别为0.01g和0.1mg. 4.2涡旋混合器. 4.3组织捣碎机. 4.4滤纸（滤速：快速，直径：12.5cm). 4.5水浴锅或孵育器. 4.6移液器：量程为100gL、200L、1mL、1...