ICS 67.040 C53 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.211-2008 食品中叶酸的测定 Determinationoffolatesinfoods 2008-11-21发布 2009-03-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 码防伪
GB/T5009.211-2008 前言 本标准修改采用国际分析家学会（AOACINTERNATIONAL)中AOAC944.12《维生素预混料中 叶酸的测定》（Folic acid invitamin preparations)。
本标准与AOAC944.12相比主要差异为： --增加了普通食品试样提取步骤； 一扩大了适用范围。
本标准的附录A和附录B为资料性附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准由中华人民共和国卫生部负贵解释。
本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、辽宁省疾病预防控制中心、浙江省医 学科学院、北京市营养源研究所。
本标准主要起草人：王竹、杨晶明、张旭、马景宏、唐靓、李跃中、王克诚。
GB/T 5009.211-2008 食品中叶酸的测定 1范围 本标准规定了食品中叶酸的测定方法。
本标准适用于食品中叶酸的测定。
本标准的检出限：普通食品，当称样量为5g时，检出限为2μg/100g；营养素补充剂、强化剂及预 混料，当称样量为1g时，检出限为2μg/100g。
2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
3原理 叶酸是细菌生长所必需的营养素，在一定控制条件下，细菌的生长响应与培养基中叶酸含量呈线性 关系。
用比浊法测定试样液中细菌增殖后的混浊度，通过与标准曲线相比较计算出试样中叶酸的含量。
4试剂 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的二级水。
4.1甲苯（C,Hg）。
4.2磷酸钠（NaPO12HO)。
4.3磷酸氢二钠(NaHPO7HO)。
4.4抗坏血酸（CgHgOs）。
4.5无水乙醇（CHO)。
4.6氢氧化钠(NaOH)。
4.7盐酸(HCI)。
4.8鸡胰酶(chicken pancrease)”。
4.9木瓜蛋白酶(papain)”。
4.10淀粉酶（taka-diastase)²。
4.11叶酸（CHgN,O）：纯度>98%。
4.12葡萄糖（CHO）。
4.13蛋白陈(peptone)。
4.14酵母提取物（yeastextract)。
1）由Difco公司提供的产品。
给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他 等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。
2）由Sigma公司提供的产品。
给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。
如果其他 等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。
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GB/T 5009.211--2008 4.15琼脂。
4.16磷酸氢二钾（KHPO)。
4.17磷酸二氢钾（KHPO。
3HO）。
4.18硫酸镁(MgSO7HO)。
4.19氯化钠(NaCl)。
4.20硫酸亚铁(FeSO7H2O)。
4.21硫酸锰（MnSOHO)。
4.22溴麝香草酚蓝（CH2gBrOS)：指示剂。
4.23磷酸缓冲液（0.05mol/L,pH6.8)：分别称取4.35g磷酸钠(4.2)和10.39g磷酸氢二钠(4.3)， 用水溶解至1L。
临用前按大约5g/L的比例加人抗坏血酸（4.4)，使pH值为6.8。
4.24乙醇溶液(1+4)：量取200mL乙醇(4.5)与800mL水混匀。
4.25氢氧化钠乙醇溶液（0.01mol/L)：称取0.4g氢氧化钠（4.6)用乙醇溶液（1+4)(4.24)溶解并稀 释至1000mL。
4.26氢氧化钠溶液（1mol/L)：称取4g氢氧化钠（4.6)，加水溶解并稀释至100mL。
4.27盐酸溶液（1mol/L)：吸取8.4mL盐酸(4.7)，用水稀释至100mL。
4.28鸡胰酶液：称取100mg鸡胰酶（4.8)，加人20mL磷酸缓冲液（4.23)，研磨至匀浆。
现用现配。
4.29蛋白酶-淀粉酶液：分别称取200mg木瓜蛋白酶（4.9)和淀粉酶（4.10)，加人20mL磷酸缓冲液 (4.23)研磨至匀浆。
现用现配。
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