NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1857.7-2010
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程
Rulesfor evaluation of cucumber forresistance to diseasesPart 7:Rule for evaluation of cucumberfor resistance to cucumber mosaic virus
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1857-2010《黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准，共8部分：
一第1部分：黄瓜抗霜霉病鉴定技术规程；一第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程： 第2部分：黄瓜抗白粉病签定技术规程；一第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程；-第5部分：黄瓜抗黑星病鉴定技术规程；一第6部分：黄瓜抗细菌性角班病鉴定技术规程； 一第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程.本部分为NY/T1857-2010的第7部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口. 本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所.本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝.
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程
1范围
本部分规定了黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设计、接种、病情调查、抗病性评价和鉴定记载表格.
本部分适用于各种黄瓜资源对黄瓜花叶病毒病抗性的室内鉴定及评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1抗病性diseaseresistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
2. 2 抗病性鉴定identification of disease resistance通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平.
2.3抗性评价evaluation ofresistancelevels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述.
2. 4 致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力.
2.5在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程. 人工接种artificial inoculation
2. 6病情级别disease rating scale人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2.7接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
2.8病情指数disease index（DI）通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.2. 9
株系strain
同种病毒中不同来源的、血清学相关的，但生物学性状不完全相同，或对不同寄主植物及不同品种具有致病力差异的变异类群.
NY/T 1857. 7-2010
2. 10
黄瓜花叶病毒病Cacumbermosaicvirus
由黄瓜花叶病毒（Cucumbermosaicvirus，CMV）所引起的叶片呈花叶、叶小皱缩、植株黄枯、瓜条畸形症状为主的黄瓜病毒病害.
3接种体制备和保存
接种前进行接种体的繁殖.常用繁殖方法：取少量保存的株系鲜病叶或冻干叶摩擦接种在“早粉2号"番茄或枯斑三生烟的叶片上，置防虫温室内（26℃～30℃）繁殖10d~14d后采收病叶用作接种毒源.将感病毒的叶片置于无菌研体内，在低温下将病叶研碎，加0.03mol/L磷酸盐缓冲液（磷酸氢二钠 10.75g、磷酸二氢钾4.08g、蒸馏水1000mL，调节至pH8.0）匀浆，纱布过滤或3000r/min离心15min，其滤液或上清液即为接种悬浮液.
株系可常年保存在防虫温室内的枯斑三生烟（Nicotiana tabacun cvs.Samsun NN）或珊西NC烟（N.cvs.XanthiNC）上，或将鲜病叶制作成冻干叶保存在一20C以下的冰箱内.
里，再将容器置于4C冰箱里，头两天每天换一次干燥剂，以后每两天换一次，直到叶片彻底干燥为止. 冻于叶的简易制作法：将鲜病叶剪成小块，与硅胶或氯化钙隔层（用滤纸隔开）放置在密封的容器整个制作过程应防止其他病毒污染.
4室内抗性鉴定
4.1鉴定室设置
人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境.
4.2鉴定对照品种
鉴定时设“中农9号"黄瓜为抗病对照品种，“中农19号"黄瓜为感病对照品种.
4.3鉴定设计
鉴定材料随机或顺序排列，每份材料重复3次，每重复10株苗.
4.4鉴定材料育苗
鉴定材料种子经10%磷酸三钠溶液浸泡15min后，用清水冲洗，放入垫有两层滤纸的培养皿中，然后于恒温培养箱中28℃催芽.待胚根长至0.5cm时，将其播于装有播种基质的塑料育苗体内.育苗基质为草炭、蛭石和菜田土（2：1：1），基质经高温蒸汽灭菌（134℃.30min）.在20°℃~25℃的日光温室内育苗，幼苗应生长健壮、一致.
4.5接种
4.5.1接种期
黄瓜花叶病毒病抗性鉴定接种期为1片真叶充分展开时.
4.5.2接种浓度
1g鲜病叶加10mL0.03mol/L的磷酸盐缓冲液.
4.5.3接种方法
少量鉴定采用汁液摩擦接种法，在叶片上撒少许600目的金刚砂，充分洗净手指后用食指蘑取病毒接种液涂抹于叶片上；大量鉴定采用喷枪接种法，即喷枪的杯内盛接种悬浮液，喷枪嘴距叶片约2cm， 空气压缩机压力为205.8kPa~245.0kPa.接种两次，间隔3d~5d.接种后立即用清水冲洗叶面上多余的病毒汁液.
4.6接种后管理
接种后将植株置于24℃～28℃、自然光照的鉴定室内正常管理.
5病情调查
5.1调查时间
病情调查于第一次接种后15d~20d进行.
5.2调查方法
调查每份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别，计算出病情指数（DI).
病情指数按公式（1）计算：
DI = ∑（sxn) NXS ×100 (1)
式中：
DI--病情指数；n各病情级别病株（叶）数； 各病情级别代表数值；N-调查总株（叶）数；S一一最高病情级别代表值.
5.3病情分级标准
室内病情分级及其对应的症状描述见表1.
表1黄瓜黄瓜花叶病毒病病情级别划分
病情缓别 症状描述0 无症状1 心叶明脉或轻花叶3 5 心叶及中部叶片花叶，少数叶片畸形、皱缩 心叶及中部叶片花叶7 重花叶，多数叶片畸形、皱缩9 重花叶，叶片明显畸形，植矮化，甚至死亡
6抗性评价
6.1鉴定有效性判别
当感病对照材料达到其相应感病程度（DI>40），该批次抗花叶病毒病鉴定视为有效.
6.2抗性评价标准
依据鉴定材料的发病程度（病情指数）确定其对花叶病毒病的抗性水平，划分标准见表2.
表2黄瓜对花叶病毒病抗性评价标准
病情指数 抗性评价<DI≤S5 高抗（HR)5<DI≤2 抗病（R）2<D≤ 中抗（MR）4060 (SH）奢
