中华人民共和国国家标准
GB/T 18646-2025代替GB/T18646-2018
动物布鲁氏菌病诊断技术
Diagnostic techniques for animal brucellosis
国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布
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目次
前言.引言1范围2规范性引用文件术语和定义4缩略语5临床诊断5.2临床症状 5.1流行特点5.3病理变化5.4结果判定6样品采集、保存、运输及处理6.1仪器设备6.2试剂材料6.3样品采集6.4样品运输和保存6.5样品处理.7病原学诊断方法7.1改良姜-尼氏（Ziehl-Neelsen）抗酸染色7.2布鲁氏菌分离与鉴定 7.3实时荧光PCR方法7.4荧光RAA方法7.5多重PCR方法8免疫学诊断方法 *-128.1标准血清 *128.2虎红平板凝集试验（RBT） **138.3试管凝集试验（SAT） -148.4补体结合试验（CFT）8.5间接ELISA 抗体检测方法（iELISA）8.6竞争ELISA抗体检测方法（cELISA） *248.7荧光偏振试验（FPA） 268.8全乳环状试验（MRT）（仅适用于牛） 298.9免疫层析法（ICA）
9综合判定9.1布鲁氏菌疑似感染动物判定 30 **309.2布鲁氏菌感染动物判定附录A（资料性）检测方法的适用性附录B（规范性）布鲁氏菌培养基的配制B.1基础培养基..B.2血清葡萄糖培养基 **33B.3选择培养基 *33附录C（规范性）生化反应试剂的配制C.1结晶紫储备液和工作液配制 34C.2氧化酶试验试剂配制C.3尿素酶活性试验培养基配方及制备 *34附录D（规范性）布鲁氏菌种和生物型的生化鉴定 附录E（规范性）实时荧光PCR、RAA及多重PCR引物和探针序列 *37 *.35附录F（规范性）多重PCR溶液配制及结果判定F.1T.AE电缓冲中液... **.*39F.21.5%琼脂糖凝胶 **39F.3多重PCR判定标准 **39附录G（规范性）试管凝集试验（SAT）试剂的配制 **40G.1含0.5%苯酚的生理盐水 .40G.2含0.5%苯酚的10%氯化钠溶液G.3参照比浊管的制备 **40附录H（规范性）补体结合试验（CFT）试剂的配制及效价测定H.2绵羊红细胞悬液的配制（2.5%）. H.1稀释液配制.H.3溶血素效价测定. ..41H.4补体制备及效价测定H.5抗原效价的测定H.6溶血标准比色管的制备及补体结合试验结果判定方法 ***50H.7待检血清的稀释和灭活附录I（规范性）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂的制备 .52I.1包被抗原LPS提取 52I.2包被液（0.05 mol/L的pH 9.6 碳酸盐缓冲液）I.3封闭液(含 2% BSA0.05%吐温-20 的 pH 7.4 PBS) .52I4样品稀释液（含 1%BSA 的pH 7.4PBS）I.5洗涤液(含 0.05% 吐温-20 的 pH 7.4 PBS)***
1.6显色液.1.7终止液（2mol/L硫酸) 52 53附录J（资料性）竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）单克隆抗体的制备 54附录K（规范性）荧光偏振试验（FPA）抗原和稀释液的制备 55K.1标记抗原的制备. 55K.2样品稀释液的配制 55参考文献 56
