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体
四类人源肠道耐药菌检测技术规范
Technical specification for detection of four categories of human intestinal drug-resistant bacteria
发布
目次
前言1范围..2规范性引用文件3术语和定义，4设备和材料5培养基和试剂6质控菌株7检测程序.8操作步骤9生物安全附录A（规范性） 培养基和试剂.
前言
起草. 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由无锡市疾病预防控制中心提出.
本文件由江苏省预防医学会归口.
本文件起草单位：无锡市疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、江苏省疾病预防控制中心.
本文件主要起草人：管红霞、齐倩倩、马丹、王雅静、周琪、李娟、袁敏、谈忠鸣、钱慧敏、肖勇、沙丹、樊玲芳、冯微宏、曹文婷、韩毅.
四类人源肠道耐药菌检测技术规范
1范围
菌和耐万古霉素肠球菌检测的设备和材料、培养基和试剂、标本采集、保存和转运、菌株分离鉴定、药 本文件规定了人源肠道中产超广谱B-内酰胺酶肠杆菌目细菌、碳青霉烯类耐药菌、多黏菌素耐药敏试验、质量控制、结果判定与报告、生物安全的要求.
本文件适用于人源肠道中产超广谱B-内酰胺酶肠杆菌目细菌、碳青霉烯类耐药菌、多黏菌素耐药
菌和耐万古霉素肠球菌的检测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T639抗菌药物敏感性试验的技术要求CLSIM100抗微生物药物敏感性试验执行标准
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
抗微生物药物敏感性试验 antimicrobialsusceptibility testing，AST
敏感性的微生物学试验. 简称药级试验.检测微生物（本文件特指细菌）对抗微生物药物（本文件特指抗菌药物）的体外
3.2
最低抑菌浓度Minimalinhibitory concentration，MIC
在琼脂或肉汤稀释法药敏试验中能抑制肉眼可见的细菌生长的最低抗菌药物浓度.
3.3
产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌目细菌extended-spectrumβ-lactamase-producingenterobacterales ESBL-E
一类产超广谱β-内酰胺离，对三代头孢菌素（如头孢噬房、头孢他啶、头孢曲松）及单环β-内酰胺类（如氨曲南）耐药的革兰阴性杆菌.其酶活性可被β-内酰胺酶抑制剂（如克拉维酸）所抑制.
3.4
碳青霉烯类耐药菌carbapenemresistantorganism，CRO
通过药试验，对亚胺培南、美罗培南、厄他培南或多立培南任何一种碳青霉烯类抗生素表现为耐药或产生碳青霉烯酶的细菌.主要包括碳青霉烯耐药肠杆菌、碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌和碳青霉烯耐 药销绿假单胞菌.
多黏菌素耐药菌polymyxin-resistant bacteria PRB通过药敏试验，对多黏菌素类药物（黏菌素或多黏菌素B）表现为耐药的细菌.
3.6
耐万古霉素肠球菌vanycin-resistantenterococcus VRE
菌. 通过药敏试验，对万古霉素表现为耐药的肠球菌，主要指具有重要临床意义的粪肠球菌和屎肠球
4设备和材料
4.1二级生物安全柜.4.2高压灭菌器. 4.3冰箱：2℃~8C、-80℃.4.4恒温培养箱：36C土1C.4.6电子天平：感量0.01g、0.001g. 4.5涡旋振荡器.4.7微量移液器：0.5μL~10μL、1μL~100μL、100μL~1000μL.4.8pl计. 4.9微生物生化鉴定系统或微生物质谱鉴定仪.4.10比浊仪4.11无菌锥形瓶：容量1000ml、500ml. 4.12无菌培养Ⅲ：直径90m4.13无菌接种环：1uL、10uL.4.151.5mlL离心管. 4.14无菌旋盖管：15mL.4.16微孔滤膜：0.22um.
5培养基和试剂
5.1实验用水：符合GB4789.28的规定. 5.2生理盐水：符合附录A1的规定.5.3Cary-Blair运送培养基：符合附录A.2的规定.5.5CR0筛查培养基：符合附录A.4的规定. 5.4ESBL筛查培养基：符合附录A.3的规定.5.6PRB筛查培养基：符合附录A.5的规定.5.7VRE筛查培养基：符合附录A.6的规定. 5.8脑心浸液琼脂：符合附录A.7的规定.5.9阳离子调节Mueller-Hinton肉汤（CAMHB）：符合附录A.8的规定.5.100.5麦氏单位（McFarland）标准比浊液.5.11商品化药敏试验板.
6质控菌株
6.1大肠埃希菌ATCC25922.6.2铜绿假单胞菌ATCC27853. 6.3粪肠球菌ATCC 29212.
7检测程序
