中华人民共和国国家标准
代替SN/T1984-2007
GB 23200.40-2016
食品安全国家标准 可乐饮料中有机磷、有机氯 农药残留量的测定 气相色谱法
National food safety standards-
Determination of organophosphorus and organochlorine residues
in cola drink
Gas chromatography
中华人民共和国农业部 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
法》. 本标准代替SN/T1984-2007《进出口可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量检测方法气相色谱
本标准与SN/T1984-2007相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准范围中增加“其它食品可参照执行”. 一标准名称中“进出口可乐饮料”改为“可乐饮料”.本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T .
食品安全国家标准
可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量的测定气相色谱法
1范围
本标准规定了可乐饮料中11种有机磷、有机氯农药残留量的气相色谱测定方法.
本标准适用于可乐饮料中敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷、七氯、六氯苯、六六六及其异构体（α-六六六、β-六六六、Y-六六六、6-六六六）、五氯硝基苯等11种有机磷、有机氯农药残留量的检测，其它食品可参照执行.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
器测定，外标法定量. 试样中有机磷残留经乙酸乙酯萃取，旋转蒸发浓缩，固相萃取柱净化，使用气相色谱火焰光度检测
试样中有机氯残留经乙酸乙酯萃取，旋转蒸发浓缩，磺化净化，使用气相色谱电子俘获检测器测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1正已烷（CgH）：色谱纯.4.1.3乙酸乙酯（CHgO）：优级纯. 4.1.2甲醇（CHOH）：色谱纯.4.1.4无水硫酸钠（NaSOa)：经650C灼烧4h，置于干燥器中备用.4.1.5氯化钠(NaCI).4.1.6氢氧化钠（NaOH）. 4.1.7浓硫酸（HSO4)：优级纯.
4.2溶液配制
4.2.1甲醇-水溶液（595 V/V)：量取5mL甲醇与95mL水混合. 4.2.2甲醇-水溶液（1090.V/V）：量取10mL甲醇与90mL水混合.4.2.3氢氧化钠溶液（1mol/L）：称20g氢氧化钠，用水溶解并定容至500mlL.
4.3标准品
4.3.1农药标准物质：参见附录A.
4.4标准溶液配制
4.4.1有机磷农药标准溶液 4.4.1.1有机磷农药标准储备溶液：准确称取适量的敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷，分别用丙酮溶解并定容至棕色容量瓶中，浓度相当于1000mg/L，储备液于-18C以下保存.4.4.1.2有机磷混合标准中间溶液：准确吸取适量敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷标准储备溶液 于棕色容量瓶中，用丙酮定容至刻度，各种有机磷农药标准溶液的浓度为10mg/L，此中间溶液于-18℃以下保存.4.4.1.3有机磷混合标准工作溶液：用乙酸乙酯将混合标准中间溶液按需要逐级稀释，配制为4种有 机磷农药混合标准工作溶液，混合标准工作溶液在0℃~4C保存.4.4.2有机氯农药标准溶液
4.4.2.1有机氯农药混合标准中间溶液：移取适量体积的七氯、六氯苯、六六六混合标准溶液、五氯
GB 23200.402016
硝基苯标准溶液于棕色容量瓶中，用正己烷定容至刻度，各种有机氯农药标准溶液的浓度为10mg/L，此中间溶液于-18℃以下保存.
4.4.2.2有机氯混合标准工作溶液：用正已烷将混合标准中间溶液按需要逐级稀释，配制为有机氯农药混合标准工作溶液，混合标准工作溶液于0C~4C保存.
4.5材料
4.5.1HLB固相萃取小柱：60mg.3mL，或相当者.
5仪器和设备
5.1气相色谱仪，配电子俘获检测器（ECD）和火焰光度检测器（FPD）磷滤光片，波长525nm.5.2分析天平：感量0.01g和0.0001g.5.4吹氮浓缩仪. 5.3离心机：5000r/min.5.5固相萃取装置.5.6旋转蒸发装置.5.8磨口玻璃圆底烧瓶：500ml. 5.7分液漏斗：500ml.5.9玻璃砂芯漏斗.5.10聚丙烯具塞离心管：15ml. 5.11旋涡混合器.
6分析步骤
6.1提取
取可乐样品于烧杯中，放置60min，并用玻璃棒搅拌排气.准确称取150g（精确至0.01g）可乐样品，加入1mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液pH值至7左右.将调节至中性的可乐样品转移至500mL 分液漏斗中，加入15g氯化钠和100mL乙酸乙酯，剧烈振荡2min并不时排气，静置10min后，取上层有机相，过预先填充的无水硫酸钠柱（在玻璃砂芯漏斗中装入15g左右无水硫酸钠，并用20mL乙酸乙酯淋洗），收集于500mL圆底烧瓶中.在分液漏斗中分两次加入200mL乙酸乙酯，每次100mL， 重复以上提取步骤，合并提取液于40C水浴下旋转蒸发至3mL~4mL，转移至15mL离心管中，用9mL正已烷分三次洗涤圆底烧瓶，合并洗涤液于15mL离心管中，40℃水浴下吹氮至近干.
6.2净化
6.2.1有机磷农药测定样品溶液净化
HLB固相萃取柱使用前分别用乙酸乙酯3mL淋洗一次，3mL甲醇和3mL水预处理两次，保持柱体湿润.将6.1中提取液用5mL10%甲醇水溶液溶解，以1滴/秒速率过HLB固相萃取柱，弃去流出 液，再用10mL5%甲醇水溶液润洗离心管并上HLB柱，弃去从HLB柱流出的润洗液，真空排干小柱10min.用9mL乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液于15mL离心管中，加入3g无水硫酸钠，振荡3min，5000r/min条件下离心2min，将溶液转移至另一离心管中，于40C水浴中吹氮浓缩至近干，用乙酸乙 酯定容至1.0mL，供气相色谱FPD测定.
6.2.2有机氯农药测定样品溶液净化
后，取上层有机相进气相色谱ECD测定，如净化效果不充分，可再加入浓硫酸净化一次. 将6.1中提取液用1mL正已烷溶解，加入0.5mL浓硫酸，手动轻摇混匀，5000r/min离心5min
6.3测定
6.3.1气相色谱电子俘获检测仪器参考条件
a）色谱柱：DB-5石英毛细管柱：30m×0.32mm（内径），膜厚0.25um，或相当者.b）色谱柱温度：80C（1min）30Tmm180°℃3/mn205C（4min）2/mn210C（1min），postrun：280′℃(1min);c）进样口温度：250℃. d）检测器温度：300℃.e）载气：氮气，纯度99.999%，恒压0.135Mpa. f）进样量：1μL.g）进样方式：分流进样，分流比12：1.
6.3.2气相色谱火焰光度检测仪器参考条件
GB 23200.402016
a）色谱柱：DB-1701石英毛细管柱：30m×0.32mm（内径），膜厚0.25μm，或相当者.c）进样口温度：250℃.d）检测器温度：250C.e）载气：氮气，纯度99.999%，恒压0.071Mpa. f）进样量：1gL.g）进样方式：不分流进样，1.0min后打开分流阀，吹扫流量50mL/min.
6.3.3色谱测定与确证
待测溶液分别进气相色谱电子俘获检测和气相色谱火焰光度检测，根据样液中被测有机磷或有机氯残留的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液.标准工作溶液和样液中有机磷或有机氯残留的响应在6.3.1与6.3.2色谱条件下，有机磷与有机氯农药的保留时间参见附录A.10ug/L有机磷和有机氯混合标准工作溶液色谱图分别参见附录B中图B.1，图B.2.
6.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行.
7结果计算和表述
按下式（1）计算试样中有机磷、有机氯农药化合物的含量.
A × Cs ×VX=- As ×m
式（1）中：
A-样液中有机磷、有机氯农药化合物峰面积：As-标准工作溶液中有机磷、有机氯农药化合物峰面积：m-称取的试样量，单位为克，g： V-样液最终定容体积，单位为毫升，mL.
x-样品中有机磷、有机氯农药化合物含量，单位为毫克每干克，mg/kg：
Cs-标准工作溶液中有机磷、有机氯农药化合物浓度，单位为毫克每升，mg/L：
注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字.
8精密度
8.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求.
8.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附 录E的要求.
9定量限和回收率
9.1定量限
本方法有机磷、有机氯农药定量限均为0.0001mg/kg.
9.2回收率
当添加水平为0.0001mg/kg、0.0002mg/kg、0.0005mg/kg时，有机磷、有机氯农药化合物的添加回收率参见附录C.
