GB
中华人民共和国国家标准
GB 23200.46-2016
代替SN/T1624-2009
食品安全国家标准 食品中嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌唑、嘧菌酯 残留量的测定 气相色谱-质谱法
National food safety standards-
Determination of pyrimethanil mepanipyrim myclobutanil and azoxystrobinresidues in foods
Gas chromatography-mass spectrometry
中华人民共和国农业部 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
气相色谱质谱法》. 本标准代替SN/T1624-2009《进出口食品中喀霉胺、嗜菌胺、晴菌唑、嘧菌酯残留量的检测方法
本标准与SN/T1624-2009相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“进出口食品”改为“食品”：本标准所代替标准的历次版本发布情况为： 一标准范围中增加“其它食品可参照执行”.-SN/T .
食品安全国家标准
食品中嘧霉胺、嘧菌胺、腈菌唑、嘧菌酯残留量的测定
气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了试样的制备方法和保存条件以及粮谷、蔬菜、水果、坚果、茶叶、畜、禽、水产品、蜂产品中嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌唑、嘧菌酯残留量检验的气相色谱-质谱测定方法.
唑、嘧菌酯残留量的测定，其它食品可参照执行. 本标准适用于大米、茄子、苹果、板票、茶叶、牛肉、鸡肉、鱼、蜂蜜中嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
用丙酮或乙酸乙酯、丙酮和氯化钠水溶液提取试样中残留的嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌唑、嘧菌酯，经液液萃取和石墨化炭黑柱/氨基柱组合柱净化，用气相色谱-质谱仪选择离子检测，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1丙酮（CHO）：农残级.4.1.2乙酸乙酯（CHO）. 4.1.3乙晴（CHCN）：HPLC级.：4.1.4甲苯（CH）.4.1.5正已烷（CH）. 4.1.6氯化钠（NaC1）.4.1.7无水硫酸钠（NaSO）：于650C灼烧4h，储于密封容器中备用.
4.2溶液配制
4.2.1氯化钠溶液（300g/L）：称取300g氯化钠用蒸馏水溶解并定容至1000mL.4.2.2乙晴-甲苯（32.体积比）：取30mL乙晴和20mL甲苯，混合均匀.4.2.3乙晴-甲苯（31，体积比）：取30mL乙晴和10mL甲苯，混合均匀.4.2.4丙酮-正已烷（11，体积比）：取50mL丙酮和50mL正已烷，混合均匀. 4.2.5乙晴饱和正已烷.4.2.6正已烷饱和乙.
4.3标准品
4.3.1嘧霉胺标准品：分子式，CgHN：CAS53112-28-0：纯度≥99%.4.3.2嘧菌胺标准品：分子式，CHN：CAS110235-47-7：纯度≥99%.4.3.3晴菌唑标准品：分子式，CHCIN:CAS 88671-89-0:纯度≥99%. 4.3.4嘧菌酯标准品：分子式，CHNOs：CAS131860-33-8：纯度≥99%.
4.4标准溶液配制
4.4.1嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌唑、嘧菌酯标准溶液：准确称取适量的嘧霉胺、嘧菌胺、晴菌唑、嘧菌酯标准品，用丙酮配制成100μg/mL标准储备液，5C以下贮存，6个月以内使用.再用丙酮稀释成适 当浓度的标准工作溶液，5℃以下贮存，3个月以内使用.
4.5材料
4.5.1石墨化炭黑柱/氨基柱组合柱：500mg，6ml：或者石墨化炭黑柱（500mg.6ml）与氨基柱（500mg.3ml）按照从上到下串联使用.
4.5.2无水硫酸钠柱：150mm×10mm玻璃层析柱，从下往上依次装入脱脂棉，5cm高的无水硫酸钠.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱联用仪，配电子轰击离子源（EI源）.5.2分析天平：感量0.01g和10.0001g.5.4均质器. 5.3涡混合器.5.5离心机：6000r/min.5.7旋转蒸发器 5.6固相萃取装置.5.8氮气吹干仪.5.10水平回旋式摇床. 5.9离心管：玻璃，50mL.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1水果、蔬菜、坚果
取约500g，用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识.
6.1.2动物源性食品
6.1.2.1肉类及水产品：取样品中有代表性的部分约500g，用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识.
6.1.2.2蜂蜜：取有代表性样品约500g，未结晶样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出样品可将样品 瓶盖塞紧后，置于不超过60C的水浴中，待样品全部溶化后搅匀，迅速冷却至室温.制备好的样品装入洁净容器内密封并做好标识.
6.1.3粮谷、茶叶
取样品约500g，用粉碎机粉碎至全部通过20目筛，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识.注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行.
6.2试样保存
水果、蔬菜、坚果、畜、禽和水产品等试样于-18C以下冷冻保存：粮谷、茶叶、蜂产品等试样于室温避光保存.
在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1水果、蔬菜
液于分液漏斗中，加25mL氯化钠溶液和30mL乙酸乙酯于同一分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收 回旋式摇床上振摇30min.过滤到250mL分液漏斗中，用20mL丙酮分两次洗涤锥形瓶及滤渣，合并滤集有机相.下层水相再用20mL乙酸乙酯萃取一次，合并有机相，过无水硫酸钠柱至心形瓶中.于45C水浴上抽真空旋转蒸发至干.
7.1.2畜、禽、水产品
称取搅碎混匀的试样约10g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加25mL乙酸乙酯，15g氯化钠，均分两次按上述步骤提取残渣，合并有机相于心形瓶中.于45C水浴上抽真空旋转蒸发至干.
7.1.3粮谷、茶叶、板栗
在水平回旋式摇床上振摇30min，过滤到250mL分液漏斗中，用20mL乙酸乙酯分两次洗涤锥形瓶及 称取搅碎混匀的试样约10g（精确到0.01g）于三角瓶中，加25mL乙酸乙酯（板票样品加5g氯化钠），滤渣，合并滤液于同一分液漏斗中并加入30mL氯化钠溶液，振荡1min液液萃取，静置分层，乙酸乙酯乙酸乙酯层于上述同一心形瓶中.于45C水浴上抽真空旋转蒸发至干. 层经无水硫酸钠柱转入心型瓶中：水相再加入25mL乙酸乙酯液液萃取，静置分层，弃去水相，合并
7.1.4蜂蜜
旋式摇床上振摇30min，转入250mL分液漏斗中，再分别用30mL氯化钠溶液分两次，50mL乙酸乙酯 称取10g（精确到0.01g）蜂蜜样品于三角瓶中，加入20mL氯化钠溶液和5mL丙酮溶解，在水平回分两次洗原三角瓶，均转入同一分液漏斗，振摇2min，静置分层（如果发生乳化，可将上层及乳化层在4000r/min离心5min，取上层转入心型瓶），收集有机相到另一个分液漏斗.水相再用20m乙酸乙酯生乳化，可将上层及乳化层在4000r/min离心5min），乙酸乙酯层过无水硫酸钠柱转入上述心形瓶，于 提取两次，合并有机相到同一分液漏斗中，分液漏斗中加入40mL氯化钠溶液振摇1min，静置（如果发45C水浴上抽真空旋转蒸发至干.
7.2净化
7.2.1畜、禽、水产品、粮谷、茶叶、板栗
对7.1.2和7.1.3获得的试样残渣，加入40mL乙饱和正已烷分两次溶解，转入同一250mL分液漏斗中，分别用50mL正已烷饱和乙晴分两次、乙晴饱和正已烷10mL洗心型瓶，均转入上述分液漏 斗中.振荡分层，乙晴层过无水硫酸钠柱转入原心型瓶，正已烷层每次再用正已烷饱和乙腊15mL洗两次，正已烷层弃去，乙晴层过无水硫酸钠柱合并入心型瓶，于45℃水浴上抽真空旋转蒸发至干.
7.2.2石墨化炭黑柱/氨基柱组合柱净化
用1mL乙晴-甲苯（31，体积比）溶解7.1.1、7.1.4、7.2.1得到的试样残渣，全部转入石墨化炭黑柱-氨基柱.再用1mL乙晴-甲苯（31，体积比）分两次洗心形瓶，并入上述石墨化炭黑柱-氨基柱，液.于45C水浴上氮气流吹干.用丙酮-正已烷（11，体积比）定容1.0mL.供气相色谱质谱分析. 弃去全部流出液.用10mL乙-甲苯（32，体积比）洗脱石墨化炭黑柱-氨基组合柱，接收全部洗脱
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
7.3.1.1色谱条件
a)色谱柱：DB-5MS，30mx0.25mm（内径），0.25μum，或相当者：b)色谱柱升温程序：210C（2min）30.Cmin280CnC/min290C(6min）： c)进样口温度：250℃：d)载气：氮气，纯度99.999%，e）载气流速：恒流模式1mL/min; f）进样方式：不分流：g）进样量：2μL：h）开阀时间：1min.
7.3.1.2质谱条件
a)接口温度：280“℃；b）离子源：电子轰击源（EI）：d)离子源温度：230“C： c)电离电压：70eV：e）检测方式：SIM：g)选择离子及相对丰度：见表1. f)溶剂延迟时间：2.5min；
表1选择离子及相对丰度
被测组分 嘧毒胺 定量离子（相对丰度）/% 198(100) 199(47) 定性离子（相对丰度）/% 188(3) 184(4)嘧菌胺 222(100) 223(51) 208(5) 181(3)晴菌唑 179(100) 150(53) 245(14) 288(13)
