中华人民共和国国家标准
GB31658.30-2025
食品安全国家标准 动物性食品中二苯乙烯类药物残留量的 测定液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of stilbenes residues in animal derived foodby liquid chromatography-tandem mass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 动物性食品中二苯乙烯类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了猪、牛、羊、鸡等动物组织（肌肉、肝脏、肾脏和脂肪）和禽蛋、牛奶中己烯雌酚、己烷雌酚和己二烯雌酚残留量检测的制样和液相色谱-申联质谱测定方法.
本文件适用于猪、牛、羊、鸡组织（肌肉、肝脏、肾脏和脂肪）和禽蛋、牛奶中己烯雌酚、己烷雌酚和己二烯雌酚残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的药物经酶解后用乙晴提取（脂肪样品先经乙睛提取，吹干复溶后再酶解），加人正已烷和取进行净化，液相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配内标法定量.
5试剂与材料
以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHCN）色谱纯.5.1.2氢氧化钠（NaOH).5.1.4乙酸乙酯（CH COOC H；). 5.1.3正已烷（CH）5.1.5乙酸铵（CH COONH）.5.1.6乙酸（CHCOOH）.5.1.7碳酸钠（NaCO）.5.1.8β-葡萄糖醛苷酸酶/芳基硫酸酯酶（β-glucuronidase/arylsulfatase）：3-葡萄糖醛甘酸酶4.5U/mL，芳基硫酸酯酶14U/mL.或相当者.
5.2溶液的配制
5.2.1乙酸铵溶液（0.02mol/L)；称取乙酸铵1.54g.加水约800mL溶解，用乙酸调节pH至5.2，加水至1000mL，混匀.5.2.210%碳酸钠溶液：取碳酸钠50g.加水450mL使其完全溶解.5.2.340%乙晴溶液：取乙睛200mL，加水至500mL，混匀.5.2.4乙酸乙酯正已烷（1585）：取75mL乙酸乙酯、正已烷425mL，混匀.
5.2.5乙酸乙酯正已烷（30：70）：取150ml.乙酸乙酯、正已烷350mL.混匀.
5.3标准品
己烯雌酚、已烷雌酚、己二烯雌酚、已烯雌酚-D、已烷雌酚-D 和己二烯雌酚-D，含量均≥95%，见附录A.
5.4标准溶液的制备
5.4.1标准储备液：取二苯乙烯类药物各标准品适量（相当于有效成分10mg），精密称定，用乙精溶解并稀释定容于100mL棕色容量瓶，配制成浓度均为100μg/mL的标准储备液.-18℃以下保存，有效期12个月，5.4.2同位素内标储备液；取二苯乙烯类药物各同位素内标标准品适量（相当于有效成分1mg），精密称定，用乙腾溶解并稀释定容于10mL棕色容量瓶，配制成浓度均为100μg/mL的同位素内标储备液. -18℃以下保存，有效期12个月.5.4.3混合标准储备液：分别准确移取已烯雌酚、已烷雌酚和己二烯雌酯标准储备液各0.5mL于10mL棕色容量瓶，用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为5.0μg/mL的混合标准储备液，一18℃以下保存，5.4.4混合内标储备液：分别准确移取已烯雌酚-D、已烷雌酚-D，和己二烯雌酚-D标准储备液各0.5mL 有效期12个月，于10mL棕色容量瓶，用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为5.0μg/mL的混合内标储备液.-18C以下保存，有效期12个月.5.4.5混合内标工作液：准确移取混合内标储备液0.2mL于10mL棕色容量瓶中.用乙晴稀释至刻度.该溶液中各内标浓度为100μg/L.现用现配.5.4.6混合标准工作液：准确移取混合标准储备液、混合内标工作液适量用40%乙精溶液稀释成浓度 为1.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、20μg/L、50μg/L和 200μg/L的系列标准工作溶液，每一标准工作溶液含各内标浓度均为10pg/L.现用现配.5.5材料5.5.1硅胶固相萃取小柱：500mg/3mL，或相当者.5.5.2针头式过滤器（通用型滤膜）：尼龙材质，孔径0.22pm，或性能相当者.
6仪器和设备
6.1液相色诺申联质谱仪：配电喷雾离子源，6.2分析天平：感量0.000 01g和0.01g.6.3氮吹仪.6.4恒温振荡器.6.6离心管；聚丙烯塑料离心管，50ml. 6.5固相萃取装置.6.7离心机：9000r/min或以上.6.8pH计.6.9涡旋混合器.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并均质.取新鲜或解冻的空白或供试牛奶，混合均匀.取适量新鲜或冷藏的空白或供试禽蛋，去壳后混合均匀.a）取均质后的供试样品，作为供试试样；2
