中华人民共和国国家标准
GB 31659.10-2025
食品安全国家标准 禽蛋中β-内酰胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of β-lactams residues in poultry eggs by liquidchromatography- tandem mass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 禽蛋中β-内酰胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了禽蛋中青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹际残留量检测的制样和液相色谱-申联质谱测定方法.
本文件适用于禽蛋中青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹际残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹厅，经80%乙晴水溶液提取，固相萃取柱净化浓缩，液相色谱-申联质谱测定，基质匹配标准溶液内标法定量.
5试剂与材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.2甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.3甲醇（CHOH）：色谱纯.
5.2溶液配制
5.2.150%乙晴水溶液；取乙晴50mL.用水稀释至100mL.
5.2.280%乙晴水溶液：取乙晴80mL 用水稀释至100ml.5.2.30.1%甲酸乙晴溶液：取甲酸1mL，用乙晴稀释至1000mL.5.2.40.1%甲酸水溶液，取甲酸1mL.用水稀释至1000mL.
5.3标准品
氨苄西林-D;、氯唑西林-C、呵莫西林-D、头孢氨苄-D;、头孢喹-D;标准品，含量均≥95%，具体见附 青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹肪、青霉素V-D、青霉素-D、录A.
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：取青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹厉标准品各
适量（相当于有效成分约10mg），精密称定，分别用50%乙晴水溶解并稀释定容于100mL容量瓶中，配
GB 31659. 10-2025
制成浓度为100μg/mL的标准储备液，2C~8℃C保存，有效期1个月.5.4.2内标储备液：取青霉素V-D:、青霉素-D、氨苄西林-D、氯唑西林-C、阿莫西林-D、头孢氨苄D:、头孢喹肪-D:标准品各适量（相当于有效成分约10mg），精密称定，分别用50%乙晴水溶解并稀释定 容于100mL容量瓶中，配制成浓度为100μg/mL的内标储备液，2℃～8℃保存，有效期1个月.5.4.3混合标准工作液：分别精密量取100pg/mL的青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢喹房标准储备液各0.1mL，于100mL容量瓶中，用50%乙晴水稀释至刻度，配制成浓度为100μg/L的混合标准工作液，临用现配.5.4.4混合内标工作液：分别精密量取100μg/mL的青霉素V-D、青霉素-D、氨苄西林-D、氯唑西林-C、网莫西林-D、头孢氨苄-D、头孢喹-D 内标储备液各0.1mL，于100mL容量瓶中，用50%乙 晴水稀释至刻度，配制成浓度为100μg/L的混合内标工作液，临用现配.
5.5材料
5.5.1固相萃取柱：反相混合型亲水亲脂平衡共聚物固相萃取柱，200mg/6mL，或相当者.5.5.2微孔尼龙滤膜：0.22μm
6仪器和设备
6.1液相色语-串联质诺仪：配电喷雾离子源.6.2分析天平：感量分别为0.00001g和0.01g.6.3涡旋混合器.6.4振荡器.6.5冷冻离心机：转速10000r/min.6.6氮吹仪.6.7固相萃取装置，
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或冷藏的空白或供试禽蛋，去壳后混合均匀.a）取均质的供试样品，作为供试试样：c）取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样. b）取均质的空白样品，作为空白试样；
7.2试样的保存
-18℃以下保存.
8测定步骤
8.1提取
称取禽蛋试料（2士0.05）g，置于50mL塑料离心管，添加混合内标工作液100μL，加80%乙晴水溶液6.0mL，涡旋混匀1min，中速振荡提取5min 4℃10000r/min离心10min，取上清液备用.
8.2净化
速，收集全部流出液，40C水浴氮吹至近干，加人水1.0mL溶解残余物，涡旋混匀，过0.22pm微孔滤 将固相萃取柱安装到预先清洁过的真空萃取装置上，直接取上清液3.0mL通过小柱，保持自然流膜，供液相色谱-申联质谱测定.
8.3基质匹配标准曲线的制备
精密量取混合标准工作液和混合内标工作液适量，用水稀释配制成青霉素V、青霉素G、氨苄西林、氯唑西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢唑胺浓度为1μg/L、2μg/L、5pg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L，内标2
