中华人民共和国国家标准
GB 31659.12-2025
食品安全国家标准 禽蛋和奶中氨基糖苷类药物残 留量的测定液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of aminoglycosides residues in eggs and milk by liquidchromatography-tandemmass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 禽蛋和奶中氨基糖苷类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了禽蛋和奶中大观霉素、双氢链霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素、潮霉素B和安普霉素等氨基糖苷类药物残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法.
本文件适用于禽蛋和牛奶、羊奶中大观霉素、双氢链霉素、链霉素、卡那霉素A、庆大霉素C1、庆大霉素C1a、庆大霉素C2C2a、新霉素B、潮霉素B和安普霉素等氨基糖苷类药物残留量的检测，其他类型奶的检测可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的氨基糖苷类药物用三氯乙酸溶液提取，亲水-亲脂固相萃取柱净化，液相色谱-申联质谱法测定，外标法定量.
5试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.2乙晴（CH CN)：色谱纯.5.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.5乙酸铵（CHCOONH）；色谱纯. 5.1.4异丙醇（CHOH）：色谱纯.5.1.6三氯乙酸（CLCCOOH）.5.1.7氨水（NH OH）.
5.2溶液配制
5.2.15%三氯乙酸溶液：取三氯乙酸50g.用水溶解并稀释至1000mlL.5.2.25%甲醇溶液：取甲醇5mL，用水稀释至100mL.5.2.30.1mol/L乙酸铵溶液；取乙酸铵0.77g.用水溶解并稀释至100mL.5.2.40.002mol/1乙酸铵溶液；取0.1mol/L乙酸铵溶液10ml 用水稀释至500ml.5.2.5洗脱溶液：取甲酸20mL、异丙醇10mL、0.002mol/L乙酸铵溶液170mL，混匀，用甲酸调节pH
8°05.2.6流动相A：取甲酸5mL、0.1mol/L乙酸铵溶液10mL.用水稀释至500mL.5.2.7流动相B：取甲酸5mL、0.1mol/L乙酸铵溶液10mL.用乙晴稀释至500mL.
5.3标准品
盐酸大观霉素、硫酸卡那霉素A含量≥96.0%，硫酸双氢链霉素、硫酸链霉素、潮霉素B含量≥92.0%，庆大霉素C1五乙酸盐、庆大霉素C1a五乙酸盐、庆大霉素C2五乙酸盐含量≥95.0%，硫酸新霉素B、硫酸安普霉素含量≥99.0%，具体见附录A.
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：取标准品各适量（相当于各活性成分约10mg），精密称定，用水适量使溶解并稀释定8℃保存，有效期1个月. 容至10mL聚丙烯容量瓶分别制成浓度均为1mg/mL的标准储备液.于聚丙烯圆形广口瓶中2C～
5.4.2混合标准中间液I：准确移取双氢链霉素、链霉素、卡那霉素A、庆大霉素C1、庆大霉素C2CZa、10mL聚丙烯容量瓶，用水稀释定容至刻度，配制成混合标准中间液，其中，双氢链霉素、链霉素、卡那霉Cla、新霉素B浓度均为20μg/mL.于聚丙烯圆形广口瓶中2“C～8℃C保存，有效期1周. 素A、庆大霉素C1、庆大霉素C2C2a、潮霉素B和安普霉素浓度均为10μg/mL，大观霉素、庆大霉素
5.4.3混合标准中间液Ⅱ：准确移取潮霉素（B）安普霉素标准储备液各0.1mL，大观霉素、双氢链霉素、链霉素、卡那霉素（A）庆大霉素C1、庆大霉素C1a、庆大霉素C2C2a、新霉素B标准储备液各0.4mL，于10mL聚丙烯容量瓶用水稀释至刻度，配制成混合标准中间液.其中，潮霉素（B）安普霉素浓度均为10μg/mL，大观霉素、双氢链霉素、链霉素、卡那霉素（A）庆大霉素C1、庆大霉素Cla、庆大霉素C2C2a、 新霉素B浓度均为40μg/mL.于聚丙烯圆形广口瓶中2℃～8℃保存，有效期1周.
5.4.4混合标准工作液I：准确移取混合标准中间液I适量，用洗脱溶液稀释，配制成双氢链霉素、链霉素、卡那霉素A、庆大霉素C1.庆大霉素C2C2a、潮霉素B和安普霉素浓度分别为0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、0.75μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL 大观霉素、庆大霉素C1a、新霉素B 浓度分别为 0. 25 μg/mL、0. 50 μg/mL、1 μg/mL、1. 5 μg/mL、2 μg/mL、4 μg/mL、6 μg/mL 的混合标 准工作液，临用现配.
素浓度分别为0 125μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、0.75μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL，大观霉素、双氢链霉素、链霉素、卡那霉素A、庆大霉素C1、庆大霉素C1a、庆大霉素C2C2a、新霉素B浓度分别为0.5 μg/mL、1 μg/mL、2μg/mL 3μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、12 μg/mL的混合标准工作液.临 用现配.
5.5材料
5.5.1亲水-亲脂固相萃取柱：200mg/6mL.或相当者.5.5.2尼龙微孔滤膜：0.22pm.
6仪器和设备
6.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）.6.2分析天平：感量0.00001g和0.01g-6.3涡旋混合器.6.4振荡混合器.6.5低温高速离心机：转速不低于10000r/min.6.6 pH计.6.7组织匀浆机. 2
