ICS 67.120.10 CCS X22
中华人民共和国农业行业标准
NY/T3876-2021
猪肉中卡拉胶的检测 液相色谱-串联质谱法
Determination of carrageenan in pork-Liquidchromatography-tandem mass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部发布
全国农警食品标准起草. 第1音
本文件由农业农村部畜牧兽医局提出.
本文件由全国屠宰加工标准化技术委员会（SAC/TC516）归口.
本文件起草单位：中国动物卫生与流行病学中心、必维信诺（山东）检测技术有限公司.
本文件主要起草人：王君玮、王琳、邓书、丛容、赵格、部绪卿、江翠芸、高玉斌、宋时萍.
猪肉中卡拉胶的检测液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了猪肉中卡拉胶检测的制样和液相色谐-串联质谱测定方法.本文件适用于鲜、冻猪肉中卡拉胶的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性 少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于 包括的修改）适用于本文件.
3术语和定义
4原理
RESE试样经盐酸游液量，外标法定量 RA 处理 其中的卡 期液用色 重谱仪检测寡糖含
5试剂和材料
5.1试剂
5.3材料
5.3.1滤膜：水相，0.22m.
5.3.2滤膜：有机相，0.22μm
5.4溶液配制
5.4.10.005mol/L乙酸铵水溶液：称取乙酸铵0.39g.用水溶解并定容至1000ml.过0.22gm水相滤膜.
5.4.2190g/L乙酸锌溶液：称取乙酸锌19g.用水溶解并定容至100ml..
5.4.3150g/1.亚铁氰化钾溶液：称取亚铁氰化钾15g.用水溶解并定容至100ml.
5.4.4标准储备液（1000mg/1.）：称取卡拉胶对照品0.0100g.加人适量水，60C恒温水浴溶解.冷却至室温后，转移至10ml.容量瓶用水定容至刻度，即为1000mg/1.储备液.临用现配.
6仪器设备
6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子（ESI）源.
b）扫描模式：负离子扫描： c）毛细管电压：-2.5kV（ESI）；d) 干燥气温度：325℃：c）干燥气流量：8L/min;g）销气温度：350°℃： ）雾化气压力：40psi；h）鞘气流量：10L/min;i）多反应监测条件见表2.
表2卡拉胶降解产物的质谱参数
定量离子对 定性离子对 碎裂电压 碰撞能量被测物名称 m/z m/z V eV特征性穿糖 403 0>97. 0 403. 0>241.0 403. 0>97. 0 190 190 34 46
9.3标准曲线的制作
取5个50ml离心管，分别准确加人1000mg/L标准储备液50ul.、100pL 250l.500l、1000pl..然后加人23ml.水，再加入2ml.浓盐酸，加盖后在涡旋混合器涡旋30s.置于80C恒温振荡水溶锅振荡2h.取出后冷却至室温，转移至50mL容量瓶中，用乙晴定容，过0.22um有机相滤膜，分别注入液相色谱-串联质谱仪中，即为1mg/1.、2mg/L.、5mg/L.、10mg/1.、20mg/L.工作液.以卡拉胶标准工作液浓度为横坐标、定量离子的峰面积为纵坐标绘制标准曲线.
9.4定性测定
通过试样色谱图的保留时间与相应标准溶液的保留时间、色谱峰的特征离子与相应浓度标准溶液色谱峰的特征离子相对照定性.试样与标准溶液保留时间的相对偏差不大于5%，试样特征离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断试样中存在相应的被 测物.
表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
单位为百分号
相对离子丰度 >50 20~50 10~20 ≤10允许的最大偏差 ±20 ±25 ±30 ±50
9.5定量测定
取试样溶液和标准溶液，按外标法，以峰面积定量.标准溶液及试样溶液中的卡拉胶降解产物特征性寡糖响应值均应在仪器检测的线性范围内.在上述色谱-质谱条件下，卡拉胶降解产物特征性寡糖的特征离子质量色谱图见附录A.
9.6空白试验
除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行测定.
10结果计算
结果按公式（1）计算.
x=cxy
式中：
X 试样中卡拉胶的含量数值，单位为毫克每千克（mg/kg）： 由标准曲线计算出的样品溶液中卡拉胶的浓度数值，单位为毫克每升（mg/L.)：V 试样溶液定容体积数值，单位为毫升（ml.）；
