中华人民共和国农业行业标准
水果、蔬菜及其制品中阿拉 伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖 和蔗糖的测定离子色谱法
Determination of arabinose galactose glucose fructose maltose andsucrose in fruits vegetables and processed products-lonchromatography
中华人民共和国农业农村部发布
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本文件按照GB/T1.1-2020(标准化工作导期第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件由农业农村部乡村产业发展司提出.
本文件由农业农村部农产品加工标准化技术委员会归口.
本文件起草单位:中国农业大学、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、赛默飞世尔科技(中国)有限公司、青岛盛滁色谱技术有限公司.
本文件主要起草人:徐贞贞、陈芳、王雪、廖小军、高立红、朱新勇、王冰峰、樊永蓉.
水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、 果糖、麦芽糖和蔗糖的测定离子色谱法
1范围
本文件规定了水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和磁糖的测定方法.
本文件适用于水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的含量测定,不适用于脂肪含量大于10%的水果、蔬菜及其制温中的阿拉伯、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过 文件必 日期的引用文件,仅该日期对应的版本 期的引用文件,其最 的 改单)适用于本文件.
3术语和定义
4原理
水果、蔬菜及片 ICUL 色谱法测定,以氢氧化钠溶液为满 标法定量.
5试剂和材料
5.1试剂
氢氧化钠溶液(50
5.2试剂配制
1000ml.情性气体保护. 氢氧化钠溶液(200mmg 称 氧化钠济 1).用 真先脱气的水稀释并定容至
5.3标准品
5.3.1阿拉伯糖(CHO,CAS号:5329-37-0)纯度≥90%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质.
5.3.2半乳糖(CHO,CAS号:59-23-4):纯度>99%,或经国家认证并授于标准物质证书的标准物质.
5.3.3葡萄糖(CHO,CAS号:50-99-7):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质.
5.3.4果糖(CHO,CAS号:57-48-7):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质.
5.3.5麦芽糖(C:HO,CAS号:6363-53-7):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质.
5.3.6蔗糖(CHO,CAS号:57-50-1):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准
NY/T 3902-2021
物质.
5.4标准溶液的配制
5.4.1标准储备液(10mg/ml.):分别准确称取经过(96士2)℃C干燥2h的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖各1.000g于100mL.容量瓶中,用水溶解并定容至刻度.置于4°C密封保存,有效期一个月,5.4.2标准工作液(1.0mg/ml.):分别吸取1.0ml.阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖标准储备液(5.4.1)于10ml容量瓶中,用水稀释定容至刻度,配制浓度为1.0mg/mL标准工作液,临用5.4.3混合系列标准工作液:准确吸取标准工作液(5.4.2)适量,用水稀释、得到浓度分别为0.5mg/L、 现配.1.0mg/L、5.0mg/L、8.0mg/1.、10.0mg/1.、12.0mg/1.、15.0mg/1.的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的混合系列标准工作溶液,临用现配.
注:可根据试样小阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、凌芽糖和蔗糖的种类与浓度调整混合工作液的组成及浓度范围.
5.5材料
5.5.1水性滤膜针式过滤器;0.22pm和0.45μcm.5.5.2定性快速滤纸.
6仪器设备
6.1离子色谱仪:配有梯度泵,脉冲安培检测器,Au工作电极.6.2分析天平:感量0.01g~0.0001g. 6.3涡旋振荡器.6.4离心机:转速不低于9500r/min.6.5组织捣碎机.6.6样品粉碎机.6.7超声波提取仪.6.8电热恒温鼓风干燥箱.
7样品
7.1试样制备
取适量有代表性的样品,液态均匀样品直接摇匀,周态非均匀样品切碎后匀浆混匀.
7.2提取净化
称取试样1.00g(干制样品称取0.10g),准确加入50ml.水,涡旋混匀10min,超声30min后,9000r/min离心10min,移取上清液.将前述上清液经定性快速滤纸粗过滤后,依次过0.45gm和0.22pm 的针式过滤器过滤得到待测样品,同时做空白试验.
注:试样中糖含量超出工作曲线浓度时,应选择适当的稀释倍数,以水稀释.
8分析步骤
8.1离子色谱条件设置
a)色谱柱:PA20型阴离子分离柱(3mm×150mm)和PA20型保护柱(3mm×30mm),或等效色谱柱;b)淋洗液A:水;c)淋洗液B:氢氧化钠溶液(200mmol/L);d)柱温:30℃; e)流速;0.4ml/min;
)进样量:10pl;g)工作电极:Au电极;i)检测池温度:30C: h)参比电极:Ag/AgCl参比电极;j)洗脱条件见表1.
表1洗脱程序
时间 淋洗液A 淋洗液Bmin % %20 0 95 95 5 520.1 30 80 20 2030. 1 80 0 10040 0 10040. 1 50 95 95 5
8.2标准工作曲线绘制
按照8.1设定的色谱工作条件,待仪器稳定后,依次测定混合系列标准工作液(5.4.3)中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的色谱峰面积.根据混合系列标准工作液(5.4.3)中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的浓度与相应峰面积绘制阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的浓 度-色谱峰面积标准曲线,标准品色谱图见附录B中的图B.1.
8.3试样溶液测定
将试样溶液按照8.1设定的色谐工作条件进行测定,根据保留时间定性,根据标准曲线得到试样中糖的浓度,同时测定试剂空白试验.
9结果计算和表述
试样中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖或蔗糖含量X:以质量分数计,单位为克每千克(g/kg),按公式(1)计算.
式中:
X. 试样中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量数值,单位为克每千克 (g/kg);C 试样溶液中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖和麦芽糖的浓度数值,单位为毫克每升(mg/L);C. 试剂空白中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖和麦芽糖的浓度数值,单位为毫克每升提取液体积数值,单位为毫升(ml); (mg/L);试样溶液稀释倍数;m 试样的质量数值.单位为克(g):000[ 换算系数.
阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量≥1g/kg时,计算结果保留3位有效数字;阿拉伯糖、半乳糖、葡萄、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量<1g/kg时,计算结果保留2位有效数字. 10精密度 在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%.