中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T4675.7-2016
出口葡萄酒中乙醛的测定 气相色谱-质谱法
Determination of acetaldehyde in wine for export-Gas-chromatography mass spectrometry method
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
SN/T4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分：-SN/T4675.1出口葡萄酒中甘油的测定酶法；SN/T4675.2出口葡萄酒中2.3-丁二醇的测定气相色谱法； SN/T4675.3出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；SN/T4675.4出口葡萄酒中乳酸的测定酶法：SN/T4675.5出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法：SN/T4675.6出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定：SN/T4675.7出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法； SN/T4675.8出口葡萄酒中5-羟甲基醛的测定液相色谱法；-SN/T4675.9出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法：SN/T4675.10出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法：SN/T4675.11出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法；SN/T4675.12出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法：SN/T4675.14出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法：SN/T4675.15出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法；SN/T4675.16出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法：SN/T4675.18出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法： SN/T4675.17出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法：SN/T4675.19出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；SN/T4675.20出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法；SN/T4675.21出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法： SN/T4675.22出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法；SN/T4675.23出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法：-SN/T4675.24出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法；SN/T4675.25出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L*a*b*）色空间法；SN/T4675.26出口葡萄酒浊度的测定散射光法； SN/T4675.27出口葡萄酒碱性灰分的测定：-SN/T4675.28出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数；SN/T4675.29出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法；-SN/T4675.30出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法.本部分为SN/T4675的第7部分. 本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.本部分主要起草人：谢力、韦晓群、曾广丰、陈毓芳、陈敬佳、金梦、李双、何吉子、余芝圻、李志勇、刘青. 本部分起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局.
出口葡萄酒中乙醛的测定 气相色谱-质谱法
1范围
SN/T4675的本部分规定了葡萄酒中乙醛含量的测定.
本部分适用于葡萄酒中乙醛含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
用气相色谱-质谱法测定，外标法定量. 试样中的乙醛经2.4-二硝基苯肼衍生后，用环已烷提取乙醛2，4-二硝基苯（CAS号1019-57-4），
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水采用GB/T6682规定的一级水.
4.22.4-二硝基苯肼（CHNO，简称DNPH.CAS号119-26-6），纯度≥99%4.3浓盐酸（HCI)（37.2%HCI水溶液）.4.4浓硫酸（HSO）. 4.5无水乙醇（CHO），色谱纯.4.6乙晴（CHN)，色谱纯.盐酸（4.3）和30mL乙睛（4.6）溶解，然后转移到100mL容量瓶中，用乙晴定容至刻度线.此溶液现配 现用.4.104mol/L的氢氧化钠溶液：准确称取8g氢氧化钠（4.1）（精确到0.001g）于烧杯中，加人40mL水溶解，转移到50mL容量瓶中，用水定容至刻度线. 4.1125%的硫酸溶液：准确量取12.5mL浓硫酸（4.4）于已有35mL水的烧杯中，冷却后转移至50mL容量瓶中，用水定容至刻度线.4.13100mg/L的乙醛标准中间溶液：在10mL容量瓶中加人5mL12%的乙醇溶液（4.9），然后准确
4.1氢氧化钠（NaOH）
4.7环已烷（CH），色谱纯.
4.912%的乙醇溶液：量取12mL无水乙醇（4.5）于100mL容量瓶中，用水定容至刻度线.
4.12乙醛标准储备液：1000mg/L.乙醛标准品.该溶液应在0℃C~4C冰箱中保存.
量取1.0mL乙醛标准储备液（4.12）.用12%的乙醇溶液（4.9）定容至刻度线.该溶液应在0℃~4℃
SN/T 4675.7-2016
冰箱中保存.
4.14乙醛标准工作溶液：分别准确量取0.02mL、0.1mL、0.2mL、1mL、4mL、10mL标准中间溶液（4.13）转移至10mL容量瓶中，12%的乙醇溶液（4.9）定容至刻度线，分别值得浓度为0.2mg/L、1mg/L、2mg/L、10mg/L、40mg/L、100mg/L.的乙醛标准工作液.该溶液应在0C~4C冰箱中保存.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱仪：配有EI源.
5.3离心机. 5.2涡旋混合器.5.4分析天平：感量为0.001g.5.5滤膜，0.22pm，有机系.
6测定步骤
6.1衍生化及提取
用移液管准确量取0.50ml样品（起泡酒需预先脱气.将100mL试样倒人带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出）于15mL离心管中，加人0.20mL4mol/L的氢氧化钠溶液（4.10），室温下静置20min.然后加人0.2mL25%的硫酸溶液（4.11）和0.5mL5g/L2min，4500r/min离心5min.下层溶液用5ml环已烷（4.7）重复提取1次.合并2次提取液定容至 的2，4-二硝基苯肼溶液（4.8），室温避光衍生6h.衍生结束后，加人5mL环已烷（4.7），涡旋提取10ml.过0.22μm滤膜于进样瓶中.供上机分析
阱溶液（4.8），室温避光衍生6h. 分别量取0.50mL标准工作波（4.14）于15mL离心管中，然后加人0.5mL5g/L的2，4-二硝基苯心5min.下层溶液用5mL环已烷（4.7）重复提取1次.合并2次提取液定容至10ml.过0.22μm滤膜于进样瓶中，供上机分析.
6.3空白试验
用0.5mL12%的乙醇水溶液（4.9）代替样品，按6.1处理.
6.4测定
6.4.1气相色谱参考条件
a）色谱柱：DB-5ms30.0mX0.25mm×0.25μm毛细管柱或性能类似的分析柱.b）程序升湿：初始温度130℃，保持1min，10℃/min升至280C，保持3min.c）进样口温度：280℃. d）接口温度：280℃.e) 载气：He（纯度>99.999%），1.2mL/min恒流.f) 进样量：1μl.g）进样方式：不分流进样.
6.4.2质谱参考条件
a）离子源温度：230℃b）四极杆温度：150℃，d) c) 溶剂延迟：8min. 电离方式：EI.e）质谱扫描方式：选择离子采集模式（SIM）f) 选择监测离子（SIM）：定量离子m/x224，定性离子m/=79、122、152.g）保留时间，第一个乙醛衍生物（即乙醛2.4-二硝基苯腺）的保留时间为11.386min士0.2min，第二个乙醛衍生物（即乙醛24 色谱图参见附录A. ）的保留时间为11.626min土0.2min，标准溶液
6.4.3标准曲线的绘制
按照6.4.1和6.4.2所列测定条件，对乙醛2.4- 硝基苯腺标准工作溶液（6.2）依次进样测定.以乙的双峰总面积为纵坐标，分别绘制标准工作曲线：得到线性方程.
按式（1）计算回归参数：
式中：
乙醛2.4-二硝基苯标准工作溶液（6.2）中乙醛2.4-二硝基苯棕异构体的峰面积；
2 回归曲线的斜率；x 乙醛标准工作溶液（4.14）中乙醛的浓度，单位为毫克每升（ mg/L);回归曲线的截距.
6.5定性
分别量取乙醛标准工作溶液（4.14）及样品溶液按6.1操作后，等体积注人气相色谱-质谱仪中，按6.4中的条件进行分析.进行样品测定时如果检出的色谐峰保留时间与标准品的保留时间相一致，并 且所选择的离子丰度与标准品对应的离子半度效果比，偏差在表1允许范围内，则可判断样品中含有乙醛.
表1使用气相色谱-质谱定性时相对离子丰度最大允许偏差
相对丰度/% ≥50 >20~50 >10~20 10GC/MS定性时相对离子丰度 最大允许偏差 ±10 ±15 ±20 ±50
6.6定量
分别量取乙醛标准工作溶液（4.14）及样品溶液按6.1操作后，等体积注入气相色谱-质谱仪中，按6.4中的条件进行分析.如果样品检出的色谱峰的保留时间和标准品的保留时间一致、双峰比例一致，符合6.5定性要求，并且色谱峰的强度落在标准品的线性范围内时，可以使用外标法进行定量测定.
7结果计算和表述
7.1试样中乙醛含量由色谱数据处理软件或按式（2）计算获得，并保留三位有效数字：
