GB/T 14926.55-2001实验动物 免疫酶组织化学法.pdf

免疫,化学法,抗原,粘合剂,蒸馏水,推荐性国家标准
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中华人民共和国国家标准

GB/T14926.55-2001

实验动物 免疫酶组织化学法

Laboratory animal-Immunohistochemistry(IH)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

本标准规定了免疫酶组织化学法所用试剂、器材和操作步骤等.本标准起草单位:中国实验动物学会, 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准主要起草人:贸争鸣.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.55-2001

实验动物免疫酶组织化学法

Laboratory animal-Immunohistochemistry(IH)

1范围

本标准规定了免疫酶组织化学法(IH)所用试剂、器材和操作步骤等.

本标准适用于实验动物病毒抗原的检测.

2原理

用已知的特异性抗体与标本中待测抗原反应,如待测抗原是特异性抗体的相应抗原则形成抗原抗体复合物.此抗原抗体复合物仍保持其抗原活性,可与相应的第二抗体酶结合物结合,遇酶底物产生颜 色反应,在普通显微镜下,根据颜色的反应判定结果.

3主要试剂与器材

氯化钠 8.5 g磷酸二氢钠(NaHPO2HO) 磷酸二氢钠(NaHPO12HO) 0.20 g 3.12 g蒸馏水 加至 1 000 mL

3.1.4底物溶液

3 3-二胺基联苯胺盐酸盐(DAB) 40 mgPBS 丙酮 100 mL 5 mL3%过氧化氢 0. 1 mL

3.2器材

3.2.1石蜡切片机或冰冻切片机.3.2.3普通显微镜, 3.2.2载玻片及盖玻片.

4操作步骤

4.1冰冻切片风干后用丙酮固定10~15min,石蜡切片,常规脱蜡至PBS(切片应用白胶或铬矾明胶 做粘合剂,以防脱片).

用0.3%过氧化氢甲醇溶液或1%盐酸酒精37C作用30min.

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