中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.58-2008代替GB/T 14926.582001
实验动物 传染性犬肝炎病毒检测方法
Laboratory animalMethod for examination ofInfectious canine hepatitis virus
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T14926《实验动物》共54个部分,为不同微生物和病毒检测技术方法. 本部分自实施之日起代替GB/T14926.58-2001《实验动物传染性犬肝炎病毒检测方法》.本部分与GB/T14926.58-2001相比主要技术差异如下:a)传染性犬肝炎是犬的主要烈性传染病之一,在我国犬群中广泛流行,是基础级犬和SPF犬的必检项目;b)“6结果判定”中增加了“6.3基础级犬群体免疫抗体合格率:免疫抗体合格率=(被检动物 抗体阳性数/被检动物总数)×100%.基础级犬群体免疫抗体合格率大于等于70%以上可判为该大群免疫合格”内容.本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口.本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草.本部分主要起草人:田克恭、贺争鸣、范薇. 本部分所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T 14926. 582001.
实验动物传染性犬肝炎病毒检测方法
1范围
本部分适用于犬ICHV的检测.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T14926的本部分的引用而成为本部分的条款.凡是注日期的引用文件,其随后的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本,凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分.
GB/T14926.50实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.54实验动物血凝抑制试验
3原理
根据免疫学原理,采用ICHV抗原检测犬血清中ICHV抗体:或根据ICHV在一定的条件下,能凝集人"O”型红细胞,这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测大血清中1CHV抗体.
4主要试剂和器材
4.1试剂
4.1.1ELISA抗原
4.1.1.1特异性抗原
十十重:严重,下同)时收获.冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再 用ICHV感染MDCK细胞,接种3d~4d后,当病变达~(-阴性;轻;中;经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
4.1.1.2正常抗原
MDCK细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液.
4.1.2血凝素
ICHV接种MDCK细胞,培养3d~4d,当病变达~时收获培养物.冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液分装后低温保存.
4.1.3阳性血清
ICHV实验感染或自然感染的犬血清.
无1ICHV感染、未经免疫的犬血清.
4.1.5酶结合物
辣根过氧化物酶标记羊或兔抗大IgG抗体.
4.1.6人"O”型红细胞.
4.2器材
4.2.1酶标仪.
4.2.237C培养箱或水浴箱.