中华人民共和国国家标准
GB/T17778-2005代替GB/T17778-1999
Determination of d-biotinin premix
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
中华人民共和国 国家标准预混合饲料中d-生物素的测定GB/T 177782005出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号htp:/ spe net. cn 邮政编码，100045电话： 637874472006年2月第一版2006年2月电子版制作书号：155066 • 1-26934
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前言
本标准是GB/T177781999预混料中d-生物素的测定》的修订版，本标准与前版相比主要技术内容变化如下： 补充了“高效液相色谱法”，并规定其为仲裁法.一在“分光光度法”中“试样溶液的提取”增加了用水先溶解的步骤：在“测定”中用“吸光度的一阶导数的峰差值”代替原“吸光度”本标准自实施之日起，代替GB/T17778-1999 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口.本标准起草单位：国家何料质量监督检验中心（武汉）.本标准主要起草人：钱肪、屈利文、杨林、杨先奎.
预混合饲料中d-生物素的测定
1范围
混合饲料的测定，提取液的浓度范围为2.0yg/mL~20.0μg/mL. 本标准规定的方法1和方法2适用于d-生物素含量大于1.0mg/kg的复合预混合饲料、维生素预
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T14699.1饲料采样
3方法1-分光光度法
3.1原理
用乙醇水溶液将试样中d生物素提取出来，在硫酸乙醇溶液中d-生物素和4-二甲氨基肉桂醛生成橙色化合物，在一定范围内颜色深浅与d生物素含量成正比.
3.2试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂.水符合GB/T6682三级水的规定.
3.2.5.1标准储备液：准确称取0.1000gd生物素标准品溶解于乙醇溶液（3.2.2）中，定量转人100mL容量瓶中，用乙醇水溶液稀释至刻度，混匀.此液1.00mL含d-生物素1.00mg.
醇溶液稀释至刻度，混匀.此液1.00mL含d生物素20.0μg. 3.2.5.2标准工作液：准确移取d-生物素标准储备溶液（3.2.5.1)1.00mL于50mL容量瓶中，加乙
3.3.1分光光度计（有一阶导数功能）.3.3.3分析天平：感量0.0001g- 3.3.2实验室用超声波提取器.
3.4试样的制备
按GB/T14699.1规定方法采样，选取饲料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，通过0.42mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，保存备用.
3.5分析步骤
3.5.1试样溶液的提取
称取维生素预混料约2g（精确至0.0001g）、复合预混料约5g~10g（精确至0.0001g），置于磨口平底烧瓶中，加人5.00mL水置超声波提取器（3.3.2）中超声20min后，再加人20mL无水乙醇
