中华人民共和国国家标准
GB/T17999.3-2008代替GB/T 17999.2-1999
SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 3:Serum neutralization test for SPF chicken
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
中华人民共和国国家标准SPF鸡微生物学监测第3部分：SPF鸡血清中和试验 GB/T 17999 3-2008出版发行 北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548 网址 spc. net cn秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本880×12301/16印张0.75字数14千字2009年4月第一版2009年4月第一次印刷书号：155066 • 1-36491
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前言
GB/T17999《SPF鸡微生物学监测》分为10个部分：
第1部分：SPF鸡微生物学监测总则； 第2部分：SPF鸡红细胞凝集抑制试验：-第3部分：SPF鸡血清中和试验；-第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验；第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验； 一第6部分：SPF鸡酵联免疫吸附试验：一第7部分：SPF鸡胚敏感试验：-第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验；第9部分：SPF鸡试管凝集试验：一第10部分：SPF鸡间接免疫荧光试验.
本部分为GB/T17999的第3部分.
本部分修订参照（IE（陆生动物（哺乳动物、禽鸟和蜜蜂）诊断试验和疫苗手册》（第五版）中的有关规定.
本部分代替GB/T17999.2-1999（SPF鸡血清中和试验》
本部分与GB/T17999.2-1999相比主要变化如下：
增加了规范性附录A"试剂的配制”、资料性附录B"病毒接种技术”以及资料性附录C"鸡胚接
种病毒后的病变特征”；
一在试验内容部分，增加了病毒的稀释梯度；
一对不同病毒致死鸡胚的时间重新确定.
本部分附录A为规范性附录，附录B、附录C为资料性附录.
本部分由中华人民共和国农业部提出.
本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口.
本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司.
本部分主要起草人：曲连东、刘家森、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、姜骞、司昌德、于海波、孟庆文.
本部分所代替标准的历次版本发布情况为：
GB/T 17999. 21999
SPF鸡微生物学监测 第3部分：SPF鸡血清中和试验
1范围
GB/T17999的本部分规定了血清中和试验的技术要求.
本部分适用于对SPF鸡进行以下病毒中和抗体的检测：禽脑脊髓炎病毒（Avian EncephalomyelitisVirus）、传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus）、传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus）、传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus).
2原理
中和试验系指有生物活性的病毒与相应的抗体结合后，失去原有的生物活性的中和反应.中和反应不仅有高度特异性，且具有严格的量的关系.因此可用中和试验鉴定病毒，也可用于相应抗体的定量检测.
3试剂和器材
3.1试剂
3.1.1病毒：禽脑脊髓炎病毒VanRoekel株（CVCCAV35）、传染性支气管炎病毒H52（CVCC3.1.2病毒稀释液：胰蛋白陈磷酸盐肉汤（见附录A）. AV1513）、传染性法氏囊病病毒A80株（CVCVAV2321）、传染性喉气管炎病毒A96（CVCCAV200）.3.1.3青霉素/链霉素（双抗）液（见附录A）.3.1.43%碘配溶液.3.1.5SPF胚蛋.
3.2器材3.2.26号针头， 3.2.1蛋钻（打孔器）.3.2.37号针头.3.2.4混合器.3.2.5照蛋器.
4操作程序
照胚检查胚体活力，选取血管清晰、胚体规律摆动的健康胚蛋，每个检测项目需胚蛋24枚.
4.1.3稀释病毒4.1.3.1取灭菌试管4支~9支，每管加人稀释液4mL、青霉素/链霉素液0.5mL.4.1.3.2第1管加人病毒液0.5mL，作连续10倍稀释.各种病毒的稀释度参见表1.
