中华人民共和国国家标准
GB/T20798-2006
Determination of 2 4-D in meat and meat products
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
SN0195-1993（出口肉及肉制品中2，4-滴残留量检测方法》和《CIPAC手册>中有关2，4-滴的测定 本标准主要参考了美国食品药品管理局的农药残留分析手册（FDA一PAM）中的有关方法，并参考方法.
本标准由中国商业联合会提出并归口.
本标准由农业部农产品质量监督检验测试中心（北京）、商务部屠宰技术鉴定中心负责起草.
本标准主要起草人：石阶平、马丽艳、林燕、王贵际、张新玲、刘虎成、吴广枫、赵坤霞、唐小革.
肉与肉制品中2，4-滴残留量的测定
1范围
本标准规定了肉及肉制品中2，4-滴残留量检验的抽样和测定方法.本标准适用于肉及肉制品中2，4-滴残留量的测定.
2原理
样品在酸性条件下，以二氯甲烷提取样品中残留的2，4-滴及其钠盐，并转移至碱液中.用有机溶剂洗涤后将其酸化，再用二氯甲烷提取2，4滴，去除溶剂后用乙晴定容作为待测溶液，取一定量注人高效液相色谱仪，用紫外检测器检测，外标法定量.
3试剂与仪器、设备
3.1试剂
3.1.1乙睛：色谱纯. 3.1.2水：三级水.3.1.3磷酸：分析纯.3.1.4二氯甲烷：分析纯，重蒸馏.3.1.6无水乙醚：分析纯，重蒸馏. 3.1.5无水乙醇：分析纯，重蒸馏.3.1.7硫酸-水（19）：以优级纯浓硫酸配制.每500mL硫酸-水（19）用50mL二氯甲烷抽提两次后备用.3.1.8氢氧化钠溶液（30g/L）;以优级纯氢氧化钠配制.每500mL氢氧化钠溶液（30g/L）用25mL 二氯甲烷抽提两次后备用.3.1.9氯化钠：优级纯，每250g氯化钠用100mL二氯甲烷超声波抽提两次，挥干，于600℃灼烧4h，于具塞瓶中.两次后备用.3.1.112，4-滴标准品：纯度≥99%.3.1.122.4-滴标准溶液：准确称取10mg2，4-滴标准品用乙晴溶解并定容至100mL，配制成浓度为0.100mg/mL标准贮备溶液，再以乙精稀释逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液.
3.2仪器和设备
3.2.1高效液相色谱仅：附紫外检测器，3.2.2组织捣碎机.3.2.3振荡器. 3.2.4旋转蒸发仪.注：全部玻璃器Ⅲ经超声波清洗，用前以少量二氯甲烷淋洗.
4分析步骤
4.1抽样
若成堆产品，则在维放空间的四角和中间设采样点，每点从上、中、下三层取若干小块混为一份样
GB/T 20798-2006
品；若零散样品，则随机从3~5片体上取若干小块混为一份样品.每份500g~1500g.
4.1.2检验批
以不超过5000箱为一检验批.同一检验批内商品应具有同一的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等，
4.1.3抽样数量
4.1.3.1肉
a）500箱及以下取5箱：b)501~1000箱取7箱；c）1001~3000箱取11箱；d）3001~4000箱取13箱； e）4001~5000箱取15箱.
4.1.3.2罐头
a）500箱及以下取5箱；b）501~1000箱取7箱：c）1001~3000箱取11箱： d）3 001~4000箱取13箱；e）4001~5000箱取15箱.
4.1.4抽样工具及方法
4.1.4.1肉
每箱取样一包，去掉塑料薄膜，从每包肉样中抽取肉块不少于25g，总样量不少于1kg，放人清洁的容器内，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，并及时送交实验室，
4.1.4.2罐头
每箱取一罐，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，及时送交实验室.
4.2试样制备
4.2.1肉
将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内，密封，冷藏.
4.2.2罐头
将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内，密封，冷藏.
注：在抽样和钢样的操作中，应防止样品受到污染或发生任何变化，以保证实验样品能代表总体样本.
4.3提取和净化
称取混合均匀的试样20.00g（精确到0.01g）于500mL具塞锥形瓶中，加15mL无水乙醇、5mL硫酸-水（19）、10g氯化钠和100mL二氯甲烷.加塞，振荡提取30min.通过快速滤纸过滤，滤液收集于500mL分液漏斗中，用约50mL二氯甲烷分三次洗涤锥形瓶及滤渣.合并洗液于分液漏斗中，于上述分液漏斗中加25mL氢氧化钠溶液（30g/L）和50mL蒸馏水，再加人10mL饱和氯化钠溶液C此时水相pH应大于12，否则应补加适量氢氧化钠溶液（3.1.8）.对于极易乳化的样品可再补加约3g氯化钠），振摇提取2min.静置分层，弃去二氯甲烷层.以25mL二氯甲烷洗涤水层二次，弃去二氯甲烷 层.再以25mL无水乙醚洗涤水层，静置分层，将下层水相转移至另一500mL分液漏斗中，弃去无水乙醚层.于上述水相中，加入25mL硫酸-水（19）进行酸化，摇匀（水相pH应小于2，否则应适量补加硫酸-水（19）），然后分别用50mL、25mL、20mL二氯甲烷提取水相.将二氯甲烷提取液收集于2
250mL旋转蒸发瓶中.于30C水浴中蒸干.用2mL乙晴溶解，经0.45ym微孔滤膜过滤后供色谱测定.
4.4测定
4.4.1色谱参考条件
a）色谱柱；ODS C3.9mm×150mm;b）流动相：乙精1.5%氢氧化钠（NaOH）水溶液（2080），加磷酸调节pH至2.95；c）流速：1.0mL/min;d）温度：30℃；[）检测波长：228nm. e）检测器：紫外检测器：
4.4.2测定
根据液相色谱仪灵敏度，取标准系列各浓度20gL分别注人液相色谱仪，测得该浓度标准溶液的峰面积（峰高）.以标准溶液浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积（峰高）为纵坐标绘制标准曲线.
取样品溶液20gL注人液相色谱仪，测得2，4-滴的峰面积（峰高）.从标准曲线中查出相应的浓度(μg/mL).
4.5结果计算
采用外标法用峰面积（峰高）定量，按式（1）计算2，4-滴残留量.
式中：
X样品中2，4-滴残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；（-样品峰在标准曲线中查得的相应浓度，单位为微克每毫升（pg/mL)：V-样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：V样品溶液进样体积、单位为微升（guL）； V.-标准溶液进样体积，单位为微升（L）；m样品质量，单位为克（g）；1000-单位换算系数.
5允许差
本方法允许差≤10%
6方法的最低检出限、回收率
6.1最低检出限
本方法的最低检出限为0.03mg/kg.
6.2回收率
本方法的回收率为70%～90%之间.
7液相色谱图
色谱图见图1.
