中华人民共和国国家标准
GB/T23198-2008
Determination of oxolinic acid residues in animal original food
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准附录A为资料性附录.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局.本标准主要起草人：王敏、郭德华、李波、韩丽、邓晓军、杨惠琴.
动物源性食品中喹酸 残留量的测定
1范围
本标准规定了动物源性食品中喹酸残留量的液相色谱测定方法.本标准适用于水产品、禽肉、猪肉、牛肉中呕唑酸残留量的测定.本方法检测低限为1μg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用面成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，1SO3696：1987 MOD）
3原理
样品经二氯甲烷提取，提取液浓缩后，残渣用稀盐酸溶液溶解.稀盐酸溶液中加人正已烷液液萃取，弃正已烷.再用二氯甲烷萃取稀盐酸溶液中的残留物，萃取液浓缩至干.残留物溶于甲醇中，用配 有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682一级水的标准.
4.1甲酸：色谱纯. 4.2乙睛：色谱纯.4.3甲醇：色谱纯.4.4正已烷.4.5二氯甲烷，4.6盐酸. 4.7无水硫酸钠：650C烘4h备用.4.8海砂.4.10盐酸溶液：1mol/L.吸取盐酸82.5mL.用水稀释至1000mL.4.121%甲酸水溶液：吸取甲酸10.0mL.用水稀释至1000mL.4.13曙唑酸标准物质：纯度大于等于98.0%.4.14唑酸标准储备溶液：100mg/L.准确称取吨唑酸标准物质10.0mg（精确至0.1mg），先加人1mL0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解，然后用甲醇溶解并定容至100mL，该标准储备液贮存于4C冰箱 中.可保存1个月.4.15唑酸标准工作溶液：根据需要取适量标准储备溶液，用甲醇稀释成适当浓度的标准工作溶液.标准工作溶液现用现配.
4.9氢氧化钠.
4.110.1mol/L氢氧化钠溶液：称取4.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至1L.
5仪器和设备
5.1高效液相色谱仪，配有荧光检测器. 5.2组织捣碎机.5.3旋转蒸发器.5.4玻璃研体.5.5砂芯漏斗.5.7蒸发瓶：150ml. 5.6层析柱：25cm×2.0cm（内径），用5.0g无水硫酸钠装填.5.8分液漏斗：150mL.5.90.45μm有机相针式过滤器：13mm（直径）.
6样品制备
6.1提取
称取经捣碎成浆的试样约5g（精确至0.01g），置于玻璃研钵中，加人约2g无水硫酸钠及1g海砂，充分研磨成糊状，再用60mL二氯甲烷分3次～4次研磨试样，将试样溶液通过砂芯漏斗过滤.收集滤液于鸡心瓶中，于40C水浴旋转蒸发浓缩近干.
6.2净化
静置分层.将下层盐酸溶液转移至另一分液漏斗中，加人30mL二氯甲烷，振摇5min.静置分层后，将 用30mL1mol/L盐酸溶液溶解上述残留物.转移至分液漏斗中，加人20ml正已烷，振摇5min二氯甲烷萃取液通过层析柱脱水，收集萃取液于鸡心瓶中，再加入30mL二氯甲烷，重复以上操作.然后用10mL二氯甲烷清洗层析柱，流出液合并至萃取液中，于40C水浴旋转蒸发浓缩至干.残留物加1.0mL甲醇溶解后，过0.45μm滤膜，供液相色谱测定用.
7液相色谱测定
7.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：C5μm，250mm×4.6mm（内径）或相当者；b）流动相：1%甲酸水溶液-乙睛（7030）；c）流速：1.OmL/min；d）检测器波长：激发波长312nm，发射波长366nm； e）进样量：50pl.
7.2色谱测定
根据试样中喹酸含量情况，选定峰面积相近的标准工作液，标准工作液和待测样液中曙喹酸的响应值均应在仪器检测线性范围内.对标准工作液和样液等体积参插进样测定.在上述色谱条件下，唑酸的保留时间约为8min，标准品色谱图参见附录A.
7.3空白实验
除不称取试样外，均按上述测定步骤进行.
8计算
用色谱数据处理机或按式（1）分别计算试样中喹酸残留含量，计算结果需将空白值扣除.
式中：
X试样中螺喹酸含量.单位为毫克每千克（mg/kg）：A--标准工作液中喹酸的色谱峰面积： A-样液中螺喹酸的色谱峰面积：（-标准工作液中喹酸的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V-样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m最终样液所代表的试样量，单位为克（g）.
9精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%，
