中华人民共和国国家标准
GB/T23476-2009
松材线虫病检疫技术规程
Technical regulation on quarantine for the pine wilt disease
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录F为规范性附录，附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录G为资料性附录.本标准由国家林业局提出. 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会归口.本标准负责起草单位：国家林业局森林病虫害防治总站、江苏省森防站.本标准主要起草人：熊惠龙、李海燕、徐克勤、赵宇翔.
松材线虫病检疫技术规程
1范围
本标准规定了松材线虫病的检疫技术规程.本标准适用于松材线虫寄主植物及其加工制品等检疫工作.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T23478-2009松材线虫普查监测技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准.
3. 1
松材线虫病pine wilt disease caused by pine wood nematode
由松材线虫寄生在松树体内引起松树迅速死亡的一种毁灭性林木病害.又称松树萎病、松材线虫萎病、松树枯萎病.
3.2
松材线虫Bursaphelenchus xylophilus（Steiner et Buhrer）Nickle
一种无脊椎动物，属于线虫门（Nematoda），侧尾腺纲（Secernentea），滑刃目（Aphelenchida），滑刃总科（Aphelenchoidoidea）、滑刃科（Aphelenchoididae）、伞滑刃亚科（Bursaphelenchinae）、伞滑刃属(Bxrsopkelenchas )
检疫quarantine
为了保护一个国家或一个地区人民的身体健康和农林牧业的生产安全，根据国家和地方政府颁布的检疫法规，由法定的专门机构，对那些主要通过人为活动而远距离传播的流行性疫病所采取的检疫检验和严格的检疫处理措施.
3.4
疫木the diseased wood
感染松材线虫病的寄主植物及其制品.主要为松属（Pinas）植物及其制品，包括松木包装材料、电缆盘等.
3.5
检疫检验quarantine inspection
对检疫法规所规定应施检疫的森林植物及其产品，通过一定的技术手段检查、检验是否带有害生物.
3.6
媒介昆虫intermediaryinsect
将松材线虫由霍病树中携带面出，通过补充营养或产卵时造成的创口又将其传染到其他寄主松树上的昆虫，是松材线虫病发生不可缺少的条件，是松材线虫病侵染循环的组成部分之一.松材线虫病媒
介昆虫必须具备以下三个条件：一是生活史与松材线虫的生活史相吻合；二是具有一定的种群密度：三是能够携带一定数量的松材线虫.
3.7
松木及制品pine wood and woodenware
松属原木、锯材和用于承载、包装、铺垫、支撑、加固货物的木质材料，如木板箱、木条箱、木托盘、木框、木桶、木轴、木樱、垫木、枕木、衬木等、经人工合成或经加热、加压等深度加工的包装木质材料，如胶合板、纤维板等除外.
8
松墨天牛Monochamus alternatus Hope
属节肢动物门（Arthropoda），昆虫纲（Hexapoda）鞘翘目（Colcoptera），天牛科（Cerambycidae），墨天牛属（Monochamus），是松材线虫病的主要媒介昆虫.又名松褐天牛、松天牛.
3.9
木材蓝变woed blue-stain
由于蓝变菌（或称青变菌）的存在面导致木材变为蓝灰色.它是松材线虫病木取样的一个输助而非必要依据.
3. 10
分散型3龄幼虫（L）dispersal third-stage larvae
夏末初秋，松材线虫病枯死木中出现与增殖期3龄幼虫不同的另一类型3龄幼虫，从形态上表现出内含物显著增加，它可以抵抗不良环境条件如冬季寒冷和本材失水，被称为分散型3龄幼虫.
3. 11
持久型4龄幼虫（Ly）dauer larvae
状，体表覆盖保护性的胶粘物.易于附着在媒介昆虫的体上，以利于媒介昆虫的携带和传播. 由分散型3龄幼虫蜕变面来，除虫体角质膜较厚外，它没有口针，食道退化，头圆丘形，尾端明显指
3. 12
批batch
应检验对象的抽样单位.“批”是指同一地点、同一日期、同一品名和同一运输工具运载的应检验物品.
3. 13
抽样sampling
为确定应检验对象是否感染松材线虫，根据检疫技术规程要求面抽取一定数量样本的过程.
4应施检疫的植物及其产品
来自国内外疫情发生区的松属、雪松属、冷杉属、云杉属和落叶松属等植物的苗木、接穗、插条、盆景等生长繁殖材料；来自国内外疫情发生区的上述植物的本材、枝桓、根桩、木片以及它们的制品；来自非发生区违规调运或不具备合法手续的松木及制品等；带有松材线虫及其传插媒介昆虫活体的货物、包装见附录A. 材料、铺垫材料及运输工具.自然界感染松材线虫病的寄主植物和通过人工接种感染此病的植物名录
5现场检疫
5.1产地检疫
5.1.1直观检验
产地检疫的直观检验主要通过现场踏查的方法进行.用目测方法查找有无死树或针叶褪色和黄化、枯萎变成红褐色并整齐地挂在松枝上，树脂分泌减少直至停止，近期死亡等典型症状的松树，选择抽
样对象.
5.1.2抽样
按照GB/T23478-2009中4.5.1.4执行（参见附录B）.
5.1.2.3抽样的数量
按照GB/T23478-2009中4.6.1执行（参见附录B）.
5.2调运检疫
5.2.1.1直接观察和借助锯、斧等工具检查应施检疫的松本或其加工制品等是否干枯：重量是否明显减轻：木质部是否有蓝变：松脂味是否消失：有无媒介昆虫栖居的痕迹，如侵人孔、蚌道、蛹室等.5.2.1.2检查松树及其枝条是否有天牛危害、补充营养取食痕迹.
5.2.2.1抽样比例按照GB/T23478-2009中4.8.1执行（参见附录B）.
5.2.2.2抽样方法
按照GB/T23478-2009中4.8.2执行（参见附录B）.
5.3复检
按照5.2调运检疫执行.
6取样方法
按照GB/T23478-2009中4.7执行（参见附录B）.
7松材线虫的室内鉴定
7.1松材线虫的分离
一般采取贝尔曼漏斗法、浅盘分离法、改进型线虫分离器分离（参见附录C）.
7.2松材线虫的镜检
取）做成临时水玻片（参见附录D）；或用尖头吸管吸取沉淀管底部分离液1～3滴，滴于载玻片上，在解 剖镜下观察，发现有线虫时制成临时水玻片.7.2.2将临时水玻片置于显微镜下观察、测量.
7.3松材线虫的培养
当只分离到幼虫或雌、雄成虫数量极少时，可以采用疫木保温保湿或真菌单异活体培养方法快速培单位制作.真菌培养基质4C冰箱冷藏备用. 养松材线虫（参见附录D）.不具备松材线虫真菌培养基质制作的检疫单位可以委托有无菌培养条件的
7.4松材线虫的形态学鉴定
7.4.1形态鉴定
松材线虫的繁殖型幼虫、分散型幼虫和持久型幼虫作为鉴定的辅助特征. 根据松材线虫成虫的形态特征为鉴定依据对松材线虫进行鉴定.松材线虫成虫形态特征参见附录E.
7.4.2检验记录
有关检验情况和鉴定结果填入《松材线虫病检验记录表》（见附录F）.
