T/CSC 中国柑桔学会团体标准
T/CSC003-2026
柑橘黄龙病田间防治药效试验准则
Guidelines for field efficacy evaluation against Citrus Huanglongbing
中国柑桔学会 发布
目次
前言 II1范围.2规范性引用文件3术语和定义4方法原理，5实验室设置..6药效评估方法，附录A（资料性） 树干注射相关信息附录B（资料性） 黄龙病菌（亚洲种）16SrDNA基因片段序列
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中国相桔学会提出并归口.
本文件起草单位：华中农业大学、广西特色作物研究院、赣州市柑桔科学研究所、广西大学、广西壮族自治区水果技术指导站、云南省农业科学院热带亚热带经济作物研究所、广西田园生化股份有限公司.
本文件主要起草人：徐强、张旺、黄伟、徐远涛、陈传武、严翔、夏长秀、王绍华、韦杰、郑吉祥、彭程、汪龙湛、李良军、丁芳、赵帅、袁恩林、黄树清.
柑橘黄龙病田间防治药效试验准则
1范围
本文件规定了柑橘黄龙病亚洲韧皮部杆菌（Candidatus Liberibacterasiaticus）田间防治药效试验的术语与定义、方法原理、实验室设置、药效评估方法等技术要求.
本文件适用于相橘黄龙病田间防治药效试验方法及药效评价.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T28062柑橘黄龙病菌实时荧光定量PCR检测技术规程
GB/T29393柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
末梢枝terminalshoot
也称为顶梢枝，是指位于植株最外围、最顶端的当年生枝条.
3. 2
有效检测枝effectivedetection branch
经过实时荧光定量PCR检测黄龙病菌含量处于中等稳定水平（26≤CT值≤32）的末梢枝.
3. 3
抑菌率bacterialinhibition rate
处理周期内植株黄龙病菌拷贝数的下降值占处理前植株拷贝数的百分比.
4方法原理
初始模板黄龙病菌含量的不同，实时荧光定量PCR反应管内的荧光物质达到设定的可检测阅值时所经历的CT值不同，因此CT值可以用于判定检测样品的初始菌量.通过将药剂处理前后的样品CT值换算为对应的拷贝数，并计算处理周期内拷贝数的下降值，计算出药剂的抑菌率，实现对处理药剂的药效评估.
5实验室设置
实验室的设置按照GB/T28062的规定执行.
6药效评估方法
6.1实验设计与材料
6.1.1实验植株筛选与有效检测枝的确定
6.1.1.1候选植株
环视植株一周，按照GB/T29393的规定选择具有黄龙病典型症状的植株作为候选植株.
6.1.1.2有效检测枝
对候选植株，从东、南、西、北四个方位各选取2个末梢枝（以有症状的枝条优先）进行挂牌标记.每个取样枝选择2片已充分展开的成熟叶，每个叶片用打孔器（孔径6mm）对叶片主叶脉打取2个叶盘，每个取样枝共4个叶盘，混样检测黄龙病菌含量.
选取26≤CT值≤32的枝条作为有效检测枝，并相应挂牌标记.
6.1.1.3实验植株
选定有效检测枝数≥3的植株作为实验植株.
6.1.2药剂配比与处理
6.1.2.1药剂配比
药剂浓度为5mg/mL，体积250mL～500mL，根据树体大小适当调整（可按照品种正常单株产量每50kg对应250mL进行配比）.
6.1.2.2对照设置
以水（溶剂）作为对照，参照6.1.2.1的配比进行配比.
6.1.2.3处理方式
对实验植株进行树干注射处理：每棵树有两个注射口，位于树干对侧，距离地面约15cm处，用4mm钻头与树干呈45度角，钻入木质部组织25mm～30mm.
6.1.2.4处理时间
处理时间以萌芽前为最佳时间.
6.1.2.5试验周期
试验周期为30d.
6.2处理后样品采集
6.2.1采样方式
实验处理后30d，参照6.1.1的方法采样，对同一有效检测枝的叶片进行采集，处理后采样叶片位置与处理前采样位置接近且处理后采样叶片与处理前采样叶片为同一梢期和同一叶龄为宜.
