中华人民共和国国家标准
GB/T29673-2013
Determination of hexachlorophene in cosmetics-High performance liquid chromatography
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中国轻工业联合会提出.本标准由全国香精香料化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所.本标准主要起草人：王超、马强、李新实、苏宁、张庆、郑红艳、陈静、喜飞、沈敏、康薇.
引言
本标准的被测物质是我国（化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中.如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品卫
目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法.
化妆品中六氯酚的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中六氯酚的高效液相色谱测定方法.本标准适用于膏霜、水剂、散粉、香波类化妆品中六氯酚的测定.本标准对于六氯酚的检出限为10mg/kg，定量限为20mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法.
3原理
试样经溶剂提取，离心过滤后用高效液相色谱进行测定，外标法定量.
4试剂和材料
4.1甲醇：色谱级.4.2乙睛：色谱级. 4.3磷酸.4.4六氯酚标准物质：分子式CHC1O，CAS号70-30-4，纯度不小于97%，结构式参见附录A的图 A.1.4.5六氯酚标准储备溶液：准确称取标准物质适量六氯酚标准物质（精确至0.0001g），以甲醇（4.1）
配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液，于4C避光保存.
5仪器和设备
5.1高效液相色谱（HPLC）仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器. 5.2液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）仪：配有电喷雾离子源（ESI）.5.3分析天平：感量为0.0001g和0.001g.5.4超声波水浴.5.5离心机：转速不低于5000r/min.5.7具塞聚四氟乙烯塑料离心管：15ml. 5.6具塞比色管：15ml5.8微孔滤膜：0.45μm，有机相
6分析步骤
6.1样品处理
称取1g（精确至0.001g）试样于15mL具塞比色管中，准确加人10mL甲醇，超声提取15min.取部分溶液转移至15mL具塞塑料离心管中，以不低于5000r/min离心10min，上清液经0.45pm微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液.
注：如离心难以获得上清液可加适量氧化钠破乳.
6.2测定条件
高效液相色谱测定的参考条件如下：
a）色谱柱：SymmetryC5μm.250mm×4.6mm（内径），或相当者：c)流速：1.0 mL/min； b）流动相：乙晴和0.5%磷酸水溶液（8020.体积比），等度洗脱：d）柱温：20℃：e）检测波长：205nm:f）进样量：10pl.
6.3标准曲线的绘制
用甲醇（4.1）将六氯酚标准储备溶液（4.5）逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL、0.8μg/ml、1 μg/ml、5μg/mL、10μg/mL、30μg/mL的混合标准工作溶液，按6.2的测定条件浓度由低到高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程.
六氯酚标准品色谱图参见图A.2.标准品常外吸收光谱图参见图A.3.
6.4测定
且在扣除背景后的样品色谐图中，该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致，则可初步认定样品中存在六氯酚，用外标法定量.待测样液中六氯酚的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释 后再进样分析.如采用紫外检测器，阳性样品需用液相色谱-质谱进行确认试验（参见附录B）.
6.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行.
7结果计算
结果按式（1）计算，计算结果保留两位小数，计算结果应扣除空白值：
式中：
（-从标准工作曲线上查出的样液中六氯酚的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； w-试样中六氯酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：V样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：一试样的质量，单位为克（g）.
