中华人民共和国国家标准
GB/T29764-2013
ChemicalsFish (Oryzias latipes，d-rR Medaka)early life stage toxicity test
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
目 次
前言1范围 2规范性引用文件3术语和定义受试物信息5方法概述6仪器设备7试验准备8试验程序9质量保证与质量控制10数据与报告附录A（资料性附录） 青解（Oryziaslatipes，d-rR Medaka）驯养繁殖和培育的环境参数附录B（资料性附录） 合格稀释水的化学特征 10附录C（资料性附录） 孵化液的配制成分 11参考文献 12
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
毒性试验》（英文版），并主要增加了以下内容： 本标准参照了经济合作与发展组织（OECD）化学品测试导则No.210（1992年）鱼类早期生命阶段
喂量等资料：异常特征中增加了多种胚胎损伤和幼鱼畸形表述： 在性别比率表述中增加了雌雄形态区别：
一受试生物选用d-rR品系青，增加了d-rR品系青鳞新孵化幼鱼、幼鱼和亲本的投喂次数、投
统计参数增加了试验结束时雌雄鱼性别比率.
本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251）提出并归口.
本标准起草单位：中国科学院生态环境研究中心、中国检验检疫科学研究院、环境保护部化学品登记中心、上海市检测中心.
本标准主要起草人：查金苗、王子健、李伟、朱莉飞、李兆利、李晞、程艳、刘纯新.
化学品青鱼早期生命阶段毒性试验
1范围
本标准规定了青鱼（d-rR品系青鳞，以下简称“鱼”）早期生命阶段化学品毒性试验的方法述、仪器设备、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告.
本标准适用于测试化学品对鱼类早期生命阶段（胚胎发育和幼鱼生长阶段）的毒性.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T27861化学品鱼类急性毒性试验
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1 最低可观察效应浓度lowestobservedeffeet concentration：LOEC与对照组相比，对受试物产生显著效应（p<0.05）的最低受试物浓度. 3. 2无观察效应浓度no observedeffeet concentration;NOEC试验中直接低于LOEC的受试物浓度. 半数致死浓度medianlethalconcentration：LC引起50%的受试鱼死亡的受试物浓度，以LC表示. 4受试物信息 a）结构式；b）纯度；c）水中溶解度； d）蒸汽压；e）水解离常数（pKa）；f）正辛醇/水的分配系数（P）；g）在水中和光中的稳定性；i）在试验条件下的稳定性： h）在试验液中受试物的可靠定量分析方法及其精确度、检测限：j）d-rR品系青的LC值：k）快速生物降解性试验结果. 5方法概述 鱼类早期生命阶段毒性试验优先采用流水式试验系统，可选择半静态（静水更新）试验系统，将胚胎-幼鱼阶段的受试鱼（d-rR品系青鳞）暴露于一定浓度范围的受试物水溶液中.试验自受精卵放入试验容器时开始，至幼鱼达到21日龄时结束.通过测定受试鱼的致死和亚致死效应，并与对照组值相比较来测定受试物的LOEC和NOEC. 6仪器设备 仪器设备如下： a）实验室常规仪器设备：b）测定水温、pH值、溶解氧和硬度的仪器； c）温度控制仪：d）试验容器或装置：全玻璃、不锈钢或其他化学情性材质制成，容器的尺寸符合负荷率标准.流水式试验方法采用流水式试验装置，具备受试物贮备液连续分配和稀释系统，并具控温、充气、流量等装置. 7试验准备 7.1系统选择 试验期间应尽可能维持条件的恒定，推荐流水式试验系统或半静态试验系统. 7.2受试生物 7.2.1受试生物的选择 本试验推荐受试生物为d-rR品系青. 7.2.2受试生物的聊养 亲鱼到化所需适宜条件的详细资料可参见附录A. 7.3试验水质 试验用水符合附录B要求，或参照附录C配制孵化液作为试验用水.实验用水应满足以下要求：对照组中受试鱼的孵化率应大于或等于80%，孵化后幼鱼的存活率应大于或等于80%.试验期间应保持水质恒定，并对水样进行定期分析，以保证稀释不会对试验结果和亲鱼繁殖产生不良影响（例如对受试物的络合作用）.稀释水样的水质分析指标包括：重金属（如Cu²、Pb、Zn²、Hg、Cd、 Ni），主要阴、阳离子（如Ca²、Mg、Na、K、CI、SO），常见农药，总有机碳和悬浮物等. 7.4试验溶液 7.4.1通过稀释受试物的浓缩贮备液（母液）来配制所选择浓度的试验溶液. 7.4.2贮备液配制：最好选择机械方法（如搅拌或超声），使受试物在稀释水中简单地混合或搅动.根 据受试物溶解度值来确定浓缩贮备液的适宜浓度，某些情况下，配制高浓度贮备液需要添加助溶剂或分散剂，但应尽可能避免使用.适合本试验的助溶剂有：丙酮、乙醇、甲醇、二甲基亚矾、二甲基替甲酰
