中华人民共和国国家标准
GB/T33419-2016
环氧乙烷灭菌生物指示物检验方法
Test method of biological indicator for ethylene oxide sterilization processes
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
目 次
前言 11E E2规范性引用文件 1范围3术语和定义4技术要求5检验方法附录A（规范性附录） 抗力测定仪要求及抗力试验附录B（规范性附录） 活菌培养计数方法附录C（规范性附录） 存活曲线方法测定D值附录D（规范性附录） 部分阴性分析法测定D值附录E（规范性附录）验证法测定D值 10
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中华人民共和国卫生和计划生育委员会提出并归口.
本标准起草单位：江苏省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、国家卫生计生委卫生和计划生育监督中心、徐州市疾病预防控制中心.
标准起草人：徐燕、孙俊、吴晓松、陈越英、张流波、段亚波、史绍毅、王洪敏、黄靖雄、谈智、张剑、王玲、孙巍、张伟、褚宏亮、常桂秋.
环氧乙烷灭菌生物指示物检验方法
1范围
本标准规定了环氧乙烷灭菌生物指示物的术语和定义、技术要求和检验方法.本标准适用于对环氧乙烷灭菌生物指示物的检验.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB18281.1医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则GB18281.2医疗保健产品灭菌生物指示物第2部分：环氧乙烷灭菌用生物指示物GB/T24628医疗保健产品灭菌生物与化学指示物测试设备 消毒技术规范（2002年版）卫生部
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
生物指示物biological indicator;Bl
对指定条件下的特定灭菌程序具有一定抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体.包含菌片和自含式生物指示物.
载体carrier试验微生物的支持物.
3.2
3.3指示微生物test organism
用于制备染菌载体的微生物.
3.4
活菌计数viable test organism count
在规定的培养条件下，测定细菌悬液、染菌载体等样本中含有的活菌数量.通过计算长成的单个菌落数，而得到单位体积菌悬液中或染菌载体上的存活试验菌菌数，
D值Dvalue
在设定的条件下，杀灭微生物数量达90%所需的时间.注：单位为分（rain）.
存活曲线survivorcurve
在设定的条件下，微生物的存活情况与对灭菌介质暴露变化的关系曲线.
3.7
菌落形成单位colony-formingunit：CFU
其表达活菌的数量. 在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以
3.8
存活-杀灭区间survival-kill window
在规定的条件下灭菌处理时，生物指示物从全部长菌（存活暴露）过渡到全部不长菌（杀灭暴露）的暴露程序，
3.9
自含式生物指示物self-contained biological indicator
内层包装中含有细菌复苏生长所需培养基的生物指示物.
3.10
存活时间survival time:ST
用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本经杀菌因子作用后全部样本有菌生长的最长作用时间，
3.11
杀灭时间killing time:KT
用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本经杀菌因子作用后全部样本无菌生长的最短作用时间，
4技术要求
4.1指示微生物
4.1.1菌种
NCTC 10073 NCIMB 8058 DSM 2277 NRRL B-4418 CIP 77.18)芽胞. 环氧乙烷灭菌指示微生物应采用枯草杆菌黑色变种（Bacillas atrophzeusATCC9372，
4.1.2菌量
回收菌量大于等于1.0×10°CFU/片，回收菌量同时应在制造商标明菌量的-50%~300%范围内.
4.1.3抗力
当暴露于环氧乙烷浓度600mg/L土30mg/L，温度54°C±1℃，相对湿度60%士10%时，D值大于等于2.5min，测试的D值应在制造商规定的D值士20%范围内.
4.2载体
符合GB18281.1和GB18281.2的要求；同时，暴露于温度大于等于55℃，环氧乙烷浓度大于等于800mg/L，相对湿度大于等于70%、暴露时间大于等于6h等条件下灭菌过程中不会变形、熔化、腐蚀和其他损坏.
4.3培养基
4.3.1培养基和培养条件应能稳定地生产出符合4.1和GB18281.1和GB18281.2性能要求的试验菌2
